Hướng dẫn sử dụng Kit ELISA Test Flouroquinolones (FQNs) trong Thủy Sản

Hướng dẫn sử dụng Kit ELISA Test Flouroquinolones (FQNs) trong Thủy sản. Thao tác gồm các bước chuẩn bị dung dịch hóa chất, chuẩn bị mẫu và quy trình thực hiện với bộ Kit. Xem thêm bài viết 

Độ nhạy kit: 0.2 ppb (ng/mL)

Chuẩn bị hóa chất:

  • Dung dịch 1: Dung dịch HCl 0.15M.

Lấy 5mL dung dịch Concentrated hydrochloric acid (HCl) cho vào 400mL nước cất, trộn đều.

  • Dung dịch 2: Dung dịch ly trích mẫu.

Cho 10mL HCl 0.15M vào 90mL anhydrous acetonitrile, trộn đều.

  • Dung dịch 3: Reconstitution Buffer

Pha loãng 5xReconstitution buffer với nước cất theo tỷ lệ 1:4. Bảo quản ở 4oC trong vòng 1 tháng.

  • Dung dịch 4: Wash buffer.

Pha loãng 20xConcentrated Wash Buffer với nước cất (Wash buffer : Nước cất theo tỷ lệ (V) 1:19).

Xử lý mẫu:

  1. Cân 2.0 ± 0.05g mẫu đã được đồng nhất vào ống ly tâm 50ml.
  2. Thêm 8mL dung dịch Sample Extraction Solution (Solution 2), lắc nhẹ trong 5phút, ly tâm 4000vòng trong 10 phút ở nhiệt độ phòng.
  3. Lấy 2mL phần dịch nổi cho vào tube sạch và sấy khô ở 50 – 60oC bằng khí Nitơ hoặc không khí.
  4. Thêm vào 1mL N-hexane và lắc trong vòng 2 phút. Sau đó thêm vào 1mL Reconstitution buffer và lắc trong 30 giây để hòa tan hoàn toàn, ly tâm 4000vòng trong 5phút ở nhiệt độ thường.
  5. Loại bỏ phần dịch nổi N-hexane, lấy 50µl phần dịch phía dưới để phân tích. Hệ số pha loãng mẫu; 2, liều phát hiện tối thiểu 0.6ppb

Hướng dẫn sử dụng Kit ELISA Test Flouroquinolones:

  • Thuốc thử được trộn bằng tay trước khi hút, tránh tạo bọt.
  1. Number: Số của mẫu và dung dịch chuẩn được đánh theo thứ tự.
  2. Thêm 50µl Standard hoặc mẫu vào mỗi giếng, sau đó thêm 50µl HRP Conjugate vào. Thêm 50µl antibody working solution. Lắc nhẹ trong 5s để trộn và sử dụng màng che. Ủ trong 45phút ở 25o
  3. Rửa: Loại bỏ chất lỏng trong mỗi giếng. Lập tức thêm 250 µl wash buffer vào mỗi giếng và rửa. Lặp lại 5 lần, mỗi lần khoảng 30s. Lật ngược khay giếng đổ bỏ dịch rửa và úp vào khăn giấy sạch (chú ý tránh tạo bọt trong giếng, nếu có bọt sử dụng các mẹo làm sạch để loại bỏ).
  4. Tạo màu: Thêm 50 µl dung dịch Substrate A vào mỗi giếng, sau đó cho thêm vào 50 µl dung dịch Substrate B. Lắc nhẹ trong 5s để  trộn đều. Ủ trong 15 phút ở 25oC trong bóng tối.
  5. Ngừng phản ứng: Thêm 50 µl dung dịch Stop vào mỗi giếng, lắc nhẹ để trộn hoàn toàn.
  6. Đo OD: Bước sóng 450 (Bước sóng kép 450/630nm). Nên thực hiện bước này sau khi ngưng phản ứng trong 10 phút.

Trên đây là Hướng dẫn sử dụng Kit ELISA Test Flouroquinolones (FQNs) trong Thủy sản. Để biết thêm thông tin sản phẩm, quý anh chị vui lòng gửi về địa chỉ mail: info@visitech.vn hoặc liên hệ trực tiếp qua hotline của Công ty TNHH Khoa Học Kỹ Thuật Việt Sinh.

0 0 Bình chọn
Article Rating
Đăng ký
Thông báo về
guest
0 Comments
Inline Feedbacks
Xem tất cả bình luận
0
Would love your thoughts, please comment.x
()
x
Hotline: 0919.112.141
Zalo
Gọi điện ngay