FMDV gây bệnh gì?

FMDV- Foot and mouth disease virus: do virus thuộc giống Aphthovirus, họ Picornaviridae. Có bảy chủng huyết thanh của virus FMD, đặt tên là O, A, C, SAT 1, SAT 2, SAT 3 và Asia 1, gây nhiễm cho thú móng guốc. Bệnh nhiễm ở bất kỳ chủng huyết thanh nào cũng không cho ra miễn dịch đối với chủng huyết thanh khác. Bên trong các chủng huyết thanh, nhiều dòng có thể được nhận diện bằng các xét nghiệm sinh hóa và miễn dịch học.                         

FMDV gây bệnh lở mồm long móng là bệnh truyền lây mạnh nhất của thú có vú và có khả năng gây ra tổn thất kinh tế nặng nề trên chăn nuôi gia súc móng guốc mẫn cảm. 

Triệu chứng nhiễm FMDV- gây lở mồm long móng

Khi nhiễm bệnh, nhiệt độ cơ thể của gia súc khá cao (khoảng 40°C). Đồng thời, gia súc trở nên kém ăn, ủ rũ, tiết nước bọt nhiều và nhiễu xuống; ở vùng miệng (miệng, lợi và lưỡi), vùng chân (kẽ móng và bờ móng chân) và vú xuất hiện các mụn nước chứa dịch màu vàng nhạt. Trong vòng 24 giờ, mụn nước sẽ tự vỡ, làm bờ móng sưng đau dẫn tới con vật đi lại khó khăn, phải nằm một chỗ. Nếu bệnh phát triển mạnh, khoảng từ 5 đến 6 ngày, con vật sẽ yếu, khó thở và chết.

Đường lây truyền bệnh

• Sự lây truyền trực tiếp cũng xảy ra 
• Lây truyền gián tiếp qua thức ăn, nước uống, bãi chăn, đồng cỏ, dụng cụ, quần áo, tay chân bị nhiễm trùng. Ở đây, con người là yếu tố quan trọng làm lây lan bệnh, nhất là khi đưa gia súc có bệnh hoặc các sản phẩm của chúng đến nơi khác. Bệnh có thể truyền qua bào thai. 

Phương pháp phát hiện FMDV

Hiện nay có rất nhiều phương pháp thử nghiệm sự hiện diện của vi rút gây bệnh trên thú y  như: các phương pháp phân lập và thử nghiệm sinh hóa truyền thống, quan sát máu dưới kính hiển vi, kit test nhanh [*],… Tuy nhiên hầu hết các phương pháp này đều mang lại kết quả có độ chính xác tương đối và thời gian thử nghiệm lâu, không phù hợp với các đơn vị sản xuất cần kết quả thử nghiệm có độ tin cậy, chính xác cao. 

Vì vậy, việc sử dụng phương pháp real-time PCR để kiểm tra sự hiện diện của tổ hợp nhiều loại vi rút gây bệnh  trên thú y chỉ thông qua một thí nghiệm sẽ giúp cải thiện được thời gian, độ nhạy và độ đặc hiệu cao.  

FMDV realtime PCR Visikit

Sản phẩm FMDV realtime PCR Visikit được sử dụng phổ biến trong phương pháp này mang lại giá trị thử nghiệm đạt độ nhạy và độ đặc hiệu cao trong phát hiện vi rút gây bệnh.  Đối với phương pháp real-time PCR sử dụng bộ kit FMDV realtime PCR Visikit yêu cầu phải trang bị một số thiết bị phục vụ cho việc phát hiện mầm bệnh như máy real-time PCR, máy ly tâm, tủ bảo quản và một số vật tư tiêu hao thông thường,…cùng đội ngũ kỹ thuật viên được đào tạo về chuyên môn cũng như kỹ năng.

Visitech sẽ giúp bạn giải quyết tất cả các vấn đề trên để mang lại hiệu quả công việc và lợi nhuận tốt nhất. Chúng tôi sẽ lựa chọn cho bạn một giải pháp tốt nhất phù hợp với yêu cầu của bạn. 

Điều kiện lưu trữ

-20⁰C

Tên sản phẩm

FMDV realtime PCR Visikit

Mã sản phẩm

ANIFR- 05

Nhà sản xuất

Visitech- Việt Nam

Hạn sử dụng 

12 tháng kể từ ngày sản xuất

Thành phần bộ kit

Hướng dẫn sử dụng

Chuẩn bị mẫu

✓ Mẫu biểu mô: Lấy khoảng 1- 2 g mô biểu bì từ túi mụn nước chưa vỡ hoặc mới vỡ, thường là từ lưỡi, niêm mạc miệng hoặc chân chưa xử lí hóa chất sát trùng. Bảo quản trong dung dịch đệm PBS 0,4 M có glycerol, pH 7,2 – 7,6.

✓ Mẫu dịch mụn nước: Đối với mụn nước chưa vỡ, rút dịch mụn nước bằng ống tiêm vô trùng cho vào tube chứa sẵn 500 μL dung dịch đệm PBS 0,4 M có glycerol, pH 7,2- 7,6. Đối với mụn nước mới vỡ dùng tăm bông vô trùng thấm dịch sau đó cho vào tube chứa sẵn dung dịch đệm

✓ Huyết thanh: Lấy ít nhất 3 mL máu cho vào tube (không chứa chất chống đông EDTA và heparin). Sau đó, tiến hành phân tách huyết thanh bằng cách ly tâm ở 3000 rpm trong 15 phút. Huyết thanh sau đó được chuyển vào tube polypropylene vô trùng.

✓ Mẫu dịch hầu họng: Dùng gạc để quét lấy dịch ở họng đối với lợn (heo) sau đó cho vào tube chứa sẵn dung dịch đệm. Ở động vật nhai lại, dùng cốc probang để thu dịch họng sau đó rót vào ống chứa mẫu có sẵn dung dịch đệm.

✓ Mẫu môi trường:

o Khu vực lấy mẫu: Nền, chuồng trại, máng thức ăn, dụng cụ thiết bị chăn nuôi

o Lấy mẫu: Dùng tăm bông vô trùng chà xát bề mặt môi trường xung quanh theo chiều zizac, sau đó cho tăm bông cho vào tube chứa sẵn 500 μL dung dịch đệm.

– Lưu ý:

o Mẫu được ưu tiên chuẩn đoán là mẫu biểu mô từ mụn nước chưa vỡ hoặc mới vỡ hoặc dịch mụn nước. Nếu không thể thu được mẫu này do không có sẵn (ví dụ khi sắp phát bệnh hoặc mới khỏi bệnh hoặc trường hợp nghi ngờ nhiễm bệnh mà không có dấu hiệu lâm sàng) thì huyết thanh hoặc mẫu dịch ở họng, mẫu môi trường được xem như nguồn mẫu thay thế.

o Mẫu sau khi lấy nên vận chuyển trong điều kiện lạnh và bảo quản ở tủ đông cho đến khi tiến hành xét nghiệm.

Tách chiết DNA/RNA

✓ Bộ Genomic DNA extraction kit được khuyến cáo sử dụng cho tách chiết RNA virus từ mẫu biểu mô, dịch mụn nước, dịch hầu họng và mẫu môi trường; và bộ kit Serum viral extraction kit được khuyến cáo sử dụng cho tách chiết RNA virus từ mẫu huyết thanh. Qui trình thực hiện xem theo HDSD của các bộ kit kể trên.

Thực hiện phản ứng Realtime RT- PCR:

✓ Lấy số lượng cần thiết ống FMDV rRT-PCR Mix. Rã đông ống ở nhiệt độ phòng (15–25°C), sau đó spindown để toàn bộ chất lỏng di chuyển xuống đáy.

✓ Hút 5 μL DNA mẫu, chứng âm tách chiết, chứng dương cho vào các tube FMDV rRT-PCR mix đã chuẩn bị ở trên.

Chú ý:

– Mỗi lần chạy nên có ít nhất 1 chứng âm tách chiết, 1 chứng dương và 1 chứng âm PCR.

– Chuẩn bị phản ứng theo thứ tự sau: Chứng âm, chứng âm tách chiết, mẫu và chứng dương.

✓ Đóng nắp PCR và spindown để chất lỏng di chuyển xuống đáy trước khi đặt vào máy. Chọn kênh màu FAM cho FMDV và kênh màu HEX cho chứng nội.Cài đặt chương trình nhiệt như bên dưới:

Phân tích kết quả

+ Mẫu âm tính với FMDV: chỉ có đường biểu diễn huỳnh quang HEX của chứng nội vượt lên khỏi ngưỡng tín hiệu

+ Không xuất hiện tín hiệu nào, kể cả màu HEX: Phản ứng real-time RT-PCR bị ức chế, do đó không thể kết luận

được là mẫu âm tính hay dương tính. Tiến hành pha loãng mẫu 10 lần hoặc tách lại RNA.

+ Mẫu dương tính với FMDV: đường biểu diễn huỳnh quang FAM, HEX cùng vượt lên khỏi ngưỡng tín hiệu. Trong 1 số trường hợp mẫu dương tính mạnh với trình tự mục tiêu, đường biểu diễn huỳnh quang HEX có thể nằm dưới ngưỡng tín hiệu.

Bảng tóm tắt phân tích kết quả

Xử lý sự cố

Đối với bất kì sự cố nào khi sử dụng sản phẩm của Visitech chúng tôi sẽ hỗ trợ bạn giải quyết một cách chuyên nghiệp nhất. Dưới đây là một số lỗi thường gặp và cách khắc phục

Visitech – Nhà sản xuất Kit PCR chất lượng cao

Ngoài việc phát hiện bệnh lở mồm long móng trên heo, Visitech chúng tôi còn cung cấp thêm các kit qPCR phát hiện các loài virus, vi khuẩn gây bệnh trên thú y  theo link danh mục sau: 

https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/kit-test/kit-pcr/

Khi truy cập vào link này, chúng ta sẽ thấy thêm rất nhiều loại Kit cũng thường xuyên được sử dụng. Ví dụ như: Kit qPCR CDV [*] để phát hiện bệnh trong nhóm thú y. Hay Kit Babesia gây bệnh lê dạng trùng cho chó [*] hay Kit qPCR JEV [*] để phát hiện JEV gây bệnh cho động vật ở nhóm thú y và còn rất nhiều Kit khác…

Đặc biệt, ngoài việc cung cấp hóa chất cho phát hiện bệnh, Visitech cũng đem đến cho Qúy khách hàng một giải pháp tổng thể và đầy đủ về các trang thiết bị, vật tư tiêu hao cho một phòng thử nghiệm PCR, realtime PCR đạt chuẩn. Mời Qúy khách hàng tham khảo Link bên dưới: https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/sinh-hoc-phan-tu/ 

Tại sao nên chọn Visikit

Visitech tự hào là đơn vị tư nhân với nhiều năm kinh nghiệm trong nhiều lĩnh vực khác nhau, trong đó lĩnh vực sinh học phân tử là một trong những thế mạnh của chúng tôi. 

Chúng tôi cam kết đưa đến tay khách hàng sản phẩm đạt chất lượng theo tiêu chuẩn ISO 13485 năm 2016, là tiêu chuẩn ISO về hệ thống quản lý an toàn cho sản phẩm.

Bên cạnh đó, Visitech có đội ngũ R & D có chuyên môn cao và giàu kinh nghiệm, luôn nghiên cứu, trau dồi để chọn lọc và đưa ra sản phẩm tốt nhất đến tay người sử dụng. 

Đặc biệt, công ty chúng tôi có hàng DEMO để chạy thử nghiệm nhằm chứng minh chất lượng đối với những khách hàng có nhu cầu. Kỹ sư chúng tôi sẽ trực tiếp hướng dẫn và training cho tới khi thành thạo.

Thông tin liên hệ Visitech 

Trên đây là những thông tin chi tiết về Kit PCR phát hiện FMDV của Visitech mà chúng tôi biên soạn. Hy vọng những chia sẻ trên sẽ mang đến cho Quý Khách hàng những thông tin bổ ích. 

Visitech chúng tôi tự tin và tự hào với đội ngũ nhân viên có nhiều năm kinh nghiệm về lĩnh vực sinh học phân tử, đặc biệt là các xét nghiệm liên quan đến phát hiện virus, vi khuẩn trong thực phẩm, thủy sản, thú y…Chúng tôi luôn trên tinh thần sẵn sàng được tư vấn chi tiết, giải đáp thắc mắc và hỗ trợ mọi ý kiến của Qúy khách hàng. Hãy liên hệ ngay với chúng tôi theo địa chỉ bên dưới:

• Email: info@visitech.vn
• Hotline: 0919112141
• Zalo: 0919112141
• Website: https://visitech.vn/
• Map: Công ty TNHH Khoa Học Kỹ Thuật Việt Sinh 
• Kênh Youtube: Visitech
• Fanpage: Visitech
• Địa chỉ: 730/1/2/7C Hương Lộ 2, Phường Bình Trị Đông A, Quận Bình Tân, Tp.HCM