Virus viêm gan A (HAV) và Norovirus I và II trên bề mặt thực phẩm, động vật nhuyễn thể
Virus viêm gan A (HAV) và norovirus (NoV) là các tác nhân chính gây ngộ độc thực phẩm cho người. Chưa có phương pháp thông thường để nuôi cấy các virus này từ nền mẫu thực phẩm.
Do đó, việc phát hiện phải dựa trên phương pháp phân tử, sử dụng phản ứng chuỗi polymerase phiên mã ngược (RT-PCR).
Virus thuộc họ Picornaviridae gây bệnh viêm gan. Virus trưởng thành có kích thước 27nm hạt virus không có vỏ ngoài, được cấu tạo gồm 4 polypeptid có khối lượng phân tử khác nhau được ký hiệu từ VP1– VP4.
HAV nhân lên trong nguyên tương tế bào gan, tế bào bị xâm nhiễm giải phóng hạt virus vào máu gây nhiễm virus máu rồi được thải qua mật vào trong phân.
Virus thuộc họ Caliciviridae gây ra bệnh viêm dạ dày-ruột cấp tính không thường xuyên.
Norovirus là nhóm vi-rút gây ra bệnh tiêu chảy, nôn mửa và đau bụng. Norovirus thường được gọi bằng những tên khác như vi-rút viêm dạ dày-ruột, viêm dạ dày và ngộ độc thực phẩm. Bệnh này không liên quan đến bệnh cúm (influenza), thường gây ra bệnh về hô hấp.
Sản phẩm HaV/NoV Real-time PCR Visikit
Điều kiện lưu trữ
-200C
Tên sản phẩm
HaV/NoV Real-time PCR Visikit
Mã sản phẩm
FARA-03
Nhà sản xuất
Visitech – Việt Nam
Hạn sử dụng
12 tháng kể từ ngày sản xuất
Thành phần bộ kit
Thành phần | Quy cách |
50 test | |
HNoV RT-qPCR mix bao gồm:
|
64×20µL |
Chứng dương HNoV | 1×100 µL |
Chứng âm |
1x1mL |
Hướng dẫn sử dụng bộ kit Real time PCR xác định Virus viêm gan A (HAV) và Norovirus I và II
Chuẩn bị mẫu
Mẫu bề mặt thực phẩm
Sử dụng gạc bông vô trùng đã làm ẩm trước trong PBS 1X Buffer, lau bề mặt (diện tích tối đa 100 cm2) mẫu thử, ấn nhẹ gạc bông để dính các hạt chứa virus. Sau khi hoàn tất, nhúng gạc vào đệm phân giải để thu virus, lặp lại quá trình ba hoặc bốn lần để đảm bảo thu được lượng virus tối đa.
Động vật nhuyễn thể hai mảnh vỏ (BMS)
Dùng kéo hoặc kẹp hoặc dụng cụ tương đương để cắt bỏ tuyến tiêu hóa của tất cả các mẫu động vật, khối lượng không quá 2g.
Đồng hóa tạo thành huyễn dịch 10% bằng PBS 1X Buffer, sau đó ly tâm 2,500 rpm trong 5 phút.
Quy trình tách chiết DNA/ RNA
Quy trình tách thủ công
Thường được áp dụng cho các phòng kiểm nghiệm nhỏ và số lượng mẫu tương đối ít. Các bạn có thể sử dụng các phương pháp thu hồi DNA bằng các hóa chất như Phenol, Chloroform, Isopropanol,…hoặc sử dụng các bộ tách chiết cột silica từ mẫu tôm như Highpure Viral Extraction Visikit (HEKA-01).
Quy trình tách tự động
Phù hợp cho các phòng kiểm nghiệm độc lập, công ty, doanh nghiệp sản xuất có số lượng mẫu lớn, yêu cầu thời gian kiểm nghiệm nhanh. Bộ Maga Genomic DNA/RNA Extraction VISIKIT (MGEKA-32.R.B) được khuyến cáo sử dụng cho tách chiết DNA/RNA vi rút từ mẫu tôm kết hợp với các loại máy tách chiết hạt từ như: Máy tách chiết DNA/ RNA tự động Gene Pure Plus (NPA-32) Bioer,… Đối với mỗi dòng máy tách chiết tự động sẽ có những đặc điểm khác nhau như số lượng mẫu tách cho mỗi lượt, thời gian thực hiện, các vật tư tiêu hao khác.
Visitech hiện đang cung cấp các loại hóa chất tự động trên đa dạng nhiều loại máy khác nhau như máy tách chiết DNA/ RNA tự động Gene Pure Plus (NPA-32) [ẩn link] của hãng Bioer, máy tách chiết tự động của hãng Thermo Kingfisher, máy tách chiết tự động của hãng TANbead… Đối với mỗi dòng máy tách chiết tự động sẽ có những đặc điểm khác nhau như số lượng mẫu tách cho mỗi lượt, thời gian thực hiện, các vật tư tiêu hao dành riêng cho từng máy. Để biết thêm chi tiết cho các thiết bị liên quan đến tách chiết DNA/RNA tự động các bạn có thể liên hệ Visitech qua số hotline hoặc email.
- Cài đặt chương trình nhiệt như bên dưới:
1 chu kỳ | 45oC | 15 phút |
1 chu kỳ | 95oC | 3 phút |
45 chu kỳ | 95oC | 10 giây |
60oC | 60 giây (chọn đọc tín hiệu ở bước này) |
Phân tích kết quả
- Mẫu âm tính với cả Norovirus I, II và HAV: chỉ có đường biểu diễn huỳnh quang HEX của chứng nội vượt lên khỏi ngưỡng tín hiệu
- Không xuất hiện tín hiệu nào, kể cả màu HEX: Phản ứng qPCR bị ức chế, do đó không thể kết luận được là mẫu âm tính hay dương tính. Tiến hành pha loãng mẫu 10 lần hoặc tách lại DNA.
- Mẫu dương tính với Norovirus I,II: đường biểu diễn huỳnh quang FAM, HEX cùng vượt lên khỏi ngưỡng tín hiệu. Trong 1 số trường hợp mẫu dương tính mạnh với trình tự mục tiêu, đường biểu diễn huỳnh quang HEX có thể nằm dưới ngưỡng tín hiệu.
- Mẫu dương tính với HAV: đường biểu diễn huỳnh quang Cy5, HEX cùng vượt lên khỏi ngưỡng tín hiệu. Trong 1 số trường hợp mẫu dương tính mạnh với trình tự mục tiêu, đường biểu diễn huỳnh quang HEX có thể nằm dưới ngưỡng tín hiệu.
Bảng tóm tắt phân tích kết quả
STT | HAV (CY5) | Norovirus I và II (FAM) | IC (HEX) | Kết luận |
1 | – | – | + | Mẫu âm tính với Norovirus I và II và HAV |
2 | + | + | -/+ | Mẫu dương tính với HAV và Norovirus I và II |
3 | + | – | -/+ | Mẫu dương tính với HAV |
4 | – | + | -/+ | Mẫu dương tính với Norovirus I và II |
5 | – | – | – | Không thể kết luận |
Xử lý sự cố
Đối với bất kì sự cố nào khi sử dụng sản phẩm của VISITECH chúng tôi sẽ hỗ trợ bạn giải quyết một cách chuyên nghiệp nhất. Dưới đây là một số lỗi thường gặp và cách khắc phục:
Sự cố | Nguyên nhân | Khắc phục |
Không xuất hiện tín hiệu nào ở tất cả các giếng, kể cả chứng dương |
|
|
Chứng dương bình thường mẫu xét nghiệm không cho tín hiệu vượt ngưỡng nào, kể cả màu HEX |
|
|
Tín hiệu FAM, HEX vượt ngưỡng trong chứng âm, chứng âm tách chiết |
|
|
Danh mục Visikit cho xác định bệnh trong mẫu thủy sản
Bên cạnh đó Visitech còn cung cấp thêm các kit thử nghiệm định danh một số loài vi khuẩn, vi rút gây bệnh khác trong nuôi trồng thủy hải sản bạn có thể tham khảo tại Danh mục các kit test bệnh thủy sản bằng phương pháp real-time PCR
Bên cạnh bộ kít phát hiện bệnh phát hiện Virus Norovirus I, II và HAV chúng tôi còn cung cấp một số bộ kit phát hiện các bệnh khác như bệnh đốm trắng, hội chứng gan tụy cấp tính , bệnh hoại tử cơ quan tạo máu và cơ quan lập biểu mô,..
Đặc biệt, ngoài việc cung cấp hóa chất cho phát hiện định danh loài Visitech cũng đem đến cho Qúy khách hàng một giải pháp tổng thể và đầy đủ về các trang thiết bị, vật tư tiêu hao cho một phòng thử nghiệm PCR, realtime PCR đạt chuẩn. Chúng tôi sẽ hỗ trợ bạn thiết kế tối ưu một phòng thí nghiệm đạt chuẩn với chất lượng và giá cả cạnh tranh nhất. Mời Qúy khách hàng tham khảo trong Danh mục sản phẩm liên quan lĩnh vực sinh học phân tử
Tại sao nên chọn Visikit
Visitech tự hào là đơn vị tư nhân với nhiều năm kinh nghiệm trong nhiều lĩnh vực khác nhau, trong đó lĩnh vực sinh học phân tử hiện nay đang là mũi nhọn phát triển của chúng tôi.
Chúng tôi cam kết đưa đến tay khách hàng sản phẩm đạt chất lượng theo tiêu chuẩn ISO 13485:2016, là tiêu chuẩn ISO về hệ thống quản lý chất lượng cho sản phẩm đảm bảo sản phẩm đến tay bạn là luôn có chất lượng đảm bảo nhất.
Bên cạnh đó, Visitech có đội ngũ R&D có chuyên môn cao và giàu kinh nghiệm, luôn nghiên cứu, trau dồi để chọn lọc và đưa ra sản phẩm tốt nhất đến tay người sử dụng.
Đặc biệt chúng tôi luôn hỗ trợ các khách hàng mới thử nghiệm các sản phẩm của chúng tôi trước khi bạn quyết định mua và sử dụng các sản phẩm của chúng tôi cho doanh nghiệp của mình. Bằng cách này bạn sẽ có cách nhìn trực quan nhất, có thể so sánh với các dòng sản phẩm khác mà bạn đang sử dụng hoặc phân vân lựa chọn. Chúng tôi sẽ hỗ trợ bạn về kỹ thuật một cách tốt nhất, chia sẻ cùng bạn các khó khăn khi thực hiện các thao tác thí nghiệm để bạn có kết quả kiểm tra chính xác và kịp thời nhất.
Thông tin liên hệ Visitech
Trên đây là những thông tin chi tiết về Kit real time PCR phát hiện Virus Norovirus I, II và HAV do Visitech nghiên cứu và sản xuất. Hy vọng những chia sẻ trên sẽ mang đến cho Quý Khách hàng những thông tin bổ ích.
Visitech chúng tôi tự tin và tự hào với đội ngũ nhân viên có nhiều năm kinh nghiệm về lĩnh vực sinh học phân tử, đặc biệt là các xét nghiệm liên quan đến phát hiện virus, vi khuẩn, định danh trong thực phẩm, thủy sản, thú y…Chúng tôi luôn trên tinh thần sẵn sàng được tư vấn chi tiết, giải đáp thắc mắc và hỗ trợ mọi ý kiến của Qúy khách hàng. Hãy liên hệ ngay với chúng tôi theo địa chỉ bên dưới:
- Email: info@visitech.vn
- Hotline: 0919112141
- Zalo: 0919112141
- Website: https://visitech.vn/
- Map: Công ty TNHH Khoa Học Kỹ Thuật Việt Sinh
- Kênh Youtube: Visitech
- Fanpage: Visitech
Đánh giá
Chưa có đánh giá nào.