Lọc

Kit qPCR chẩn đoán virus JEV gây bệnh viêm não Nhật Bản trên heo ANIFR- 09 Visikit

TƯ VẤN

Danh mục: Kit Real time PCR

Mô tả
Đánh giá (0)

JEV gây bệnh gì trên heo?

JEV (viết tắt của Japanese encephalitis virus) là một loại virus được tìm thấy vào năm 1870 tại Nhật Bản. Đây là tác nhân chính gây ra bệnh viêm não virus xuất hiện đầu tiên ở Nhật Bản và sau đó lan ra toàn thế giới.
Virus viêm não Nhật bản B là sợi đơn ARN chứa 10.976 nucleotid được tạo ra bởi sự liên kết của 3.437 amino acid, được giải mã gồm 3 cấu trúc protein và 5– 6 protein phi cấu trú kháng nguyên của virus cũng là protein gồm 3 loại: Envelope glycol-protein, Non glycosylate protein M8 KD và Capsid protein C. Khi nghiên cứu về cấu trúc kháng nguyên của những virus viêm não B được phân lập từ Nhật bản và Thái Lan, Kimura Koruda và Yashi phát hiện thêm protein N được tách ra từ glycoprotein có vai trò quyết đinh độc lực của virus.
Virus viêm não Nhật Bản không chịu được nhiệt, bị bất hoạt ở 56⁰C trong 30 phút, 70⁰C trong 10 phút và 1000C trong 2 phút. Nhưng khi đông lạnh virus có thể tồn tại hàng năm.
Các chất sát trùng thông thường có thể tiêu diệt đưaợc virus như Iodine 10%, Formalin 1,5 – 2%, nước vôi 20%.
Các loại động vật hoang dã mẫn cảm với virus như: Khỉ, chuột, muỗi Culex… đây chính là ổ dịch tự nhiên của mầm bệnh cũng như là vector truyền bệnh.

Cơ chế gây bệnh

Sau khi thâm nhập vào cơ thể heo, virus nhanh chóng vào máu đến các phủ tạng, chúng phát triển rất mạnh và tăng nhanh về số lượng trong khoảng 12 giờ đến vài ngày. Tại đây, chúng gây ra các tổn thương ở gan, thận, lách, cơ bắp và cuối cùng là các tế bào thuộc hệ thần kinh trung ương bao gồm não bộ, tủy sống, tế bào thần kinh lưới, đại thực bào, hệ thống hạch lâm ba. Do đó, heo bị nhiễm virus thường bị suy giảm hệ miễn dịch rất nặng. Heo nái bị nhiễm virus trong thời kỳ mang thai sẽ bị sảy thai hoặc thai nhi mất khả năng tạo miễn dịch, do đó dễ bị chết lưu thai, sảy thai…

Điều trị

Ở người bị viêm não Nhật Bản B, dùng kháng nhiễm tố alpha A để can thiệp mang lại hiệu quả điều trị tốt. Song alpha A lại không có kết quả trong điều trị viêm não Nhật Bản B ở heo. Tỷ lệ heo mắc bệnh cao có thể lên đến 100% nhưng tỷ lệ chết thấp. Heo khỏi bệnh có nhiều di chứng về thần kinh, chậm lớn và có thể vẫn mang mầm bệnh nên sẽ là ổ dịch tự nhiên nếu như không được xử lý tốt.

Nếu viêm não Nhật Bản B xuất hiện ở heo thì phải nhanh chóng khoanh vùng và dập dịch một cách triệt để nhất. Tất cả heo trong vùng dịch đều phải đem đi tiêu hủy, tiến hành khử trùng tiêu độc nhằm tránh phát tán virus ra khỏi vùng dịch.

Phòng bệnh

Phải phòng bệnh từ xa: Kiểm soát, kiểm dịch tận gốc heo ngoại nhập ngay từ nơi xuất xứ.
Bảo vệ các trang trại chăn nuôi heo bằng các giải pháp an toàn sinh học, thường xuyên chủ động gửi mẫu đi xét nghiệm virus viêm não Nhật Bản B.
Chấp hành tốt các quy định Nhà nước về kiểm dịch, kiểm soát chăn nuôi, giết mổ và chế biến thịt heo.
Để phòng chống bệnh, người nuôi cần phải sử dụng thuốc hoặc hóa chất diệt muỗi ở nơi ở, chuồng trại chăn nuôi, phát quang bụi rậm, khơi thông cống rãnh nhằm hạn chế muỗi sinh sôi và phát triển.

Phương pháp phát hiện JEV

Hiện nay có rất nhiều phương pháp thử nghiệm sự hiện diện của vi rút gây bệnh trên thú y như: các phương pháp phân lập và thử nghiệm sinh hóa truyền thống, quan sát máu dưới kính hiển vi, kit test nhanh [*],… Tuy nhiên hầu hết các phương pháp này đều mang lại kết quả có độ chính xác tương đối và thời gian thử nghiệm lâu, không phù hợp với các đơn vị sản xuất cần kết quả thử nghiệm có độ tin cậy, chính xác cao.

Vì vậy, việc sử dụng phương pháp real- time PCR để kiểm tra sự hiện diện của tổ hợp nhiều loại vi rút gây bệnh trên thú y chỉ thông qua một thí nghiệm sẽ giúp cải thiện được thời gian, độ nhạy và độ đặc hiệu cao.

JEV RT qPCR Visikit

Sản phẩm JEV RT qPCR Visikit được sử dụng phổ biến trong phương pháp này mang lại giá trị thử nghiệm đạt độ nhạy và độ đặc hiệu cao trong phát hiện vi rút gây bệnh. Đối với phương pháp real- time PCR sử dụng bộ kit JEV RT qPCR Visikit yêu cầu phải trang bị một số thiết bị phục vụ cho việc phát hiện mầm bệnh như máy real- time PCR, máy ly tâm, tủ bảo quản và một số vật tư tiêu hao thông thường,…cùng đội ngũ kỹ thuật viên được đào tạo về chuyên môn cũng như kỹ năng.

Visitech sẽ giúp bạn giải quyết tất cả các vấn đề trên để mang lại hiệu quả công việc và lợi nhuận tốt nhất. Chúng tôi sẽ lựa chọn cho bạn một giải pháp tốt nhất phù hợp với yêu cầu của bạn

Điều kiện lưu trữ

-20⁰C

Tên sản phẩm

JEV RT qPCR Visikit

Mã sản phẩm

ANIFR- 09

Nhà sản xuất

Visitech- Việt Nam

Hạn sử dụng

12 tháng kể từ ngày sản xuất

Thành phần bộ kit

Thành phần	Quy cách
Thành phần	50 test
JEV qPCR mix	64×20µL
Chứng dương JEV	1×100 µL
Chứng âm	1x1mL

Hướng dẫn sử dụng

Tách chiết RNA

✓ Viral DNA/RNA Extraction Visikit được khuyến cáo sử dụng cho tách chiết RNA virus từ mẫu máu toàn phần hoặc mẫu huyết thanh sử dụng chung với bộ JEV Realtime RT-PCR Visikit. Qui trình lấy, bảo quản mẫu và tách chiết RNA theo HDSD của bộ Viral DNA/RNA Extraction Visikit

Thực hiện phản ứng Realtime RT- PCR

✓ Lấy đúng số lượng ống JEV rRT- PCR Mix cần thiết, rã đông bằng cách để ở nhiệt độ phòng, sau đó spindown để toàn bộ chất lỏng di chuyển xuống đáy.

✓ Hút 5 μL RNA mẫu, chứng âm tách chiết, chứng dương cho vào các tube JEV rRT-PCR mix đã chuẩn bị ở trên.

Chú ý:

– Mỗi lần chạy nên có ít nhất 1 chứng âm tách chiết, 1 chứng dương và 1 chứng âm PCR.

– Chuẩn bị phản ứng theo thứ tự sau: Chứng âm, chứng âm tách chiết, mẫu và chứng dương.

✓ Đóng nắp PCR và spindown để chất lỏng di chuyển xuống đáy trước khi đặt vào máy. Chọn kênh màu FAM cho JEV và kênh màu HEX cho chứng nội. Cài đặt chương trình nhiệt như bên dưới:

1 chu kỳ:	45^oC	15 phút
1 chu kỳ:	95^oC	3 phút
45 chu kỳ:	95^oC	10 giây
45 chu kỳ:	60^oC	30 giây (chọn đọc tín hiệu ở bước này)

✓ Không xuất hiện tín hiệu nào, kể cả màu HEX: Phản ứng real-time RT- PCR bị ức chế, do đó không thể kết luận
✓ Mẫu âm tính với JEV: chỉ có đường biểu diễn huỳnh quang HEX của chứng nội vượt lên khỏi ngưỡng tín hiệuPhân tích kết quả

được là mẫu âm tính hay dương tính. Tiến hành pha loãng mẫu 10 lần hoặc tách lại RNA.

✓ Mẫu dương tính với JEV: đường biểu diễn huỳnh quang FAM, HEX cùng vượt lên khỏi ngưỡng tín hiệu. Trong 1 số trường hợp mẫu dương tính mạnh với trình tự mục tiêu, đường biểu diễn huỳnh quang HEX có thể nằm dưới ngưỡng tín hiệu.

Bảng tóm tắt phân tích kết quả

STT	JEV (FAM)	IC (HEX)	Kết luận
1	–	+	Mẫu âm tính JEV
2	+	+/-	Dương tính JEV
3	–	–	Không thể kết luận

Xử lý sự cố

Đối với bất kì sự cố nào khi sử dụng sản phẩm của Visitech chúng tôi sẽ hỗ trợ bạn giải quyết một cách chuyên nghiệp nhất. Dưới đây là một số lỗi thường gặp và cách khắc phục

Sự cố	Nguyên nhân	Khắc phục
Không xuất hiện tín hiệu nào ở tất cả các giếng, kể cả chứng dương	Cài đặt sai chương trình qPCR Khai báo vị trí và thông số giếng sai Thiết bị qPCR gặp sự cố Hóa chất của kit không được bảo quản theo đúng chỉ định	Kiểm tra lại chương trình chạy qPCR Kiểm tra lại thông tin các giếng Kiểm tra lại hoạt động của thiết bị qPCR Kiểm tra lại điều kiện bảo quản và hạn sử dụng của kit
Chứng dương bình thường mẫu xét nghiệm không cho tín hiệu vượt ngưỡng nào, kể cả màu HEX	Hàm lượng DNA thu được quá cao Có chất ức chế trong mẫu	Pha loãng 10 lần dịch DNA và thực hiện lại phản ứng PCR Bổ sung một lượng nhỏ chứng dương mục tiêu vào mẫu tách chiết. Nếu kết quả vẫn âm tính thì kết luận có chất ức chế trong mẫu. Tiến hành tách chiết lại hoặc xử lý như cách 1
Tín hiệu FAM, HEX vượt ngưỡng trong chứng âm, chứng âm tách chiết	Micropipet bị nhiễm DNA mục tiêu hoặc sản phẩm PCR Hóa chất PCR bị nhiễm DNA mục tiêu hoặc sản phẩm PCR Môi trường làm việc bị nhiễm DNA mục tiêu hoặc sản phẩm PCR	Vệ sinh hoặc thay micropipet mới; sử dụng filter tip Sử dụng hóa chất PCR khác Yêu cầu bộ phận kỹ thuật đến vệ sinh môi trường làm việc.

Visitech– Nhà sản xuất Kit PCR chất lượng cao

Ngoài việc phát hiện JEV trên gia súc, Visitech chúng tôi còn cung cấp thêm các kit qPCR phát hiện các loài virus, vi khuẩn gây bệnh trên thú y theo link danh mục sau: Visitech – Nhà sản xuất Kit PCR chất lượng cao

https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/kit-test/kit-pcr/

Khi truy cập vào link này, chúng ta sẽ thấy thêm rất nhiều loại Kit cũng thường xuyên được sử dụng. Ví dụ như: Kit qPCR CDV [*] để phát hiện bệnh trong nhóm thú y. Hay Kit ASFV gây bệnh trên heo [*] hay Kit qPCR PED [*] để phát hiện PED gây bệnh trên heo và còn rất nhiều Kit khác…

Đặc biệt, ngoài việc cung cấp hóa chất cho phát hiện bệnh, Visitech cũng đem đến cho Qúy khách hàng một giải pháp tổng thể và đầy đủ về các trang thiết bị, vật tư tiêu hao cho một phòng thử nghiệm PCR, realtime PCR đạt chuẩn. Mời Qúy khách hàng tham khảo Link bên dưới: https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/sinh-hoc-phan-tu/

Tại sao nên chọn Visikit

Visitech tự hào là đơn vị tư nhân với nhiều năm kinh nghiệm trong nhiều lĩnh vực khác nhau, trong đó lĩnh vực sinh học phân tử là một trong những thế mạnh của chúng tôi.

Chúng tôi cam kết đưa đến tay khách hàng sản phẩm đạt chất lượng theo tiêu chuẩn ISO 13485 năm 2016, là tiêu chuẩn ISO về hệ thống quản lý an toàn cho sản phẩm.

Bên cạnh đó, Visitech có đội ngũ R & D có chuyên môn cao và giàu kinh nghiệm, luôn nghiên cứu, trau dồi để chọn lọc và đưa ra sản phẩm tốt nhất đến tay người sử dụng.

Đặc biệt, công ty chúng tôi có hàng DEMO để chạy thử nghiệm nhằm chứng minh chất lượng đối với những khách hàng có nhu cầu. Kỹ sư chúng tôi sẽ trực tiếp hướng dẫn và training cho tới khi thành thạo.

Thông tin liên hệ Visitech

Trên đây là những thông tin chi tiết về Kit PCR phát hiện JEV của Visitech mà chúng tôi biên soạn. Hy vọng những chia sẻ trên sẽ mang đến cho Quý Khách hàng những thông tin bổ ích.

Visitech chúng tôi tự tin và tự hào với đội ngũ nhân viên có nhiều năm kinh nghiệm về lĩnh vực sinh học phân tử, đặc biệt là các xét nghiệm liên quan đến phát hiện virus, vi khuẩn trong thực phẩm, thủy sản, thú y…Chúng tôi luôn trên tinh thần sẵn sàng được tư vấn chi tiết, giải đáp thắc mắc và hỗ trợ mọi ý kiến của Qúy khách hàng. Hãy liên hệ ngay với chúng tôi theo địa chỉ bên dưới: