Listeria monocytogenes real time PCR ViSiKit FFR-03

Vi khuẩn Listeria monocytogenes là gì?

Trực khuẩn gây bệnh Listeria monocytogenes là vi khuẩn gram dương, hiếu kỵ khí tùy tiện, có khả năng di động, vi khuẩn không tiết ra ngoại độc tố nhưng có nội độc tố gây hoại tử. Chúng phát triển ở nhiệt độ 1 – 45°C, tốt nhất là khoảng 45° C và ở pH 6 – 8.

Vi khuẩn Listeria monocytogenes được phân bố rộng rãi trong tự nhiên. Chúng có thể được tìm thấy trong đất, nước, thực vật và phân của một số loài động vật và có thể lây nhiễm vào thực phẩm. Những loại thực phẩm có nguy cơ cao bao gồm thịt nguội và các sản phẩm ăn liền từ thịt (các sản phẩm thịt nấu sẵn, và/ hoặc thịt lên men, xúc xích), phô mai mềm và các sản phẩm cá xông khói nguội.

Những triệu chứng của Listeria monocytogenes

Những triệu chứng bệnh có thể bao gồm sốt, đau nhức cơ, và đôi khi những hiện tượng liên quan đến dạ dày-ruột như là buồn nôn, hay tiêu chảy. Nếu bệnh lan truyền đến hệ thống thần kinh, những triệu chứng như nhức đầu, cứng cổ, nhầm lẫn, mất thăng bằng, hay chứng co giật có thể xảy ra.

Một số phương pháp chuẩn đoán khuẩn Listeria monocytogenes

Hiện nay có rất nhiều phương pháp thử nghiệm sự hiện diện của vi khuẩn Listeria monocytogenes như: các phương pháp phân lập và thử nghiệm sinh hóa truyền thống, Petrifilm 3M… Tuy nhiên hầu hết các phương pháp này đều mang lại các kết quả có độ chính xác tương đối và thời gian thử nghiệm lâu, không phù hợp với các đơn vị sản xuất lớn với các yêu cầu nghiêm ngặt về chất lượng sản phẩm. Hiện nay, sử dụng kỹ thuật realtime PCR để xác định đoạn gen đặc hiệu của Listeria monocytogenes là phương pháp đang được quan tâm trên thị trường. Kỹ thuật này có độ nhạy và độ chính xác rất cao. Các bạn có thể tham khảo sản phẩm của Visitech bên dưới.

Listeria Monocytogenes  Realtime PCR ViSiKit

Để có thể giải quyết các vấn đề trên chúng ta có thể sử dụng phương pháp real-time PCR để kiểm tra sự hiện diện của vi khuẩn Listeria monocytogenes  trên mẫu thực phẩm.  Sản phẩm Listeria Monocytogenes  Realtime PCR ViSiKit được sử dụng phổ biến trong phương pháp này mang lại giá trị thử nghiệm đạt độ nhạy và độ đặc hiệu cao trong phát hiện Listeria monocytogenes . Bên cạnh các ưu điểm của phương pháp real-time PCR sử dụng bộ kit Listeria Monocytogenes  Realtime PCR ViSiKit cũng đòi hỏi các phòng thử nghiệm phải trang bị các phòng thử nghiệm đạt độ an toàn và các thiết bị như máy real-time PCR, máy ly tâm, tủ âm sâu,… và đội ngũ kỹ thuật viên được đào tạo chuyên nghiệp. Visitech sẽ giúp bạn giải quyết tất cả các vấn đề trên để mang lại hiệu quả công việc và lợi nhuận tốt nhất.

Phương pháp này có thể sử dụng cho các phòng thí nghiệm nhỏ, các công ty, doanh nghiệp yêu cầu kiểm nghiệm, kiểm soát sự hiện diện của vi khuẩn Listeria monocytogenes trong sản phẩm. 

Điều kiện lưu trữ

 -20⁰C

Tên sản phẩm

Listeria Monocytogenes  Realtime PCR ViSiKit 

Mã sản phẩm

FFR-03

Nhà sản xuất

Visitech- Việt Nam

Hạn sử dụng

12 tháng kể từ ngày sản xuất

Thành phần bộ kit

Hướng dẫn sử dụng

Quy trình tách chiết DNA

Quy trình tách thủ công: Được áp dụng cho các phòng kiểm nghiệm nhỏ và số lượng mẫu tương đối ít. Các bạn có thể sử dụng các phương pháp thu hồi DNA bằng các hóa chất như Phenol, Chloroform, Isopropanol,…hoặc để tiện lợi hơn Visitech giới thiệu các bạn tham khảo bộ Kit tách chiết bằng phương pháp cột Silica của chúng tôi: Food DNA Extraction ViSiKit (**) hoặc bộ Tissue Viral Extraction kit (**)

Quy trình tách tự động: Được áp dụng phù hợp cho các phòng kiểm nghiệm độc lập, công ty thực phẩm, doanh nghiệp sản xuất có số lượng mẫu lớn, đòi hỏi thời gian kiểm nghiệm nhanh. 

Visitech hiện đang cung cấp các loại hóa chất tự động trên đa dạng nhiều loại máy khác nhau như máy tách chiết DNA/ RNA tự động Gene Pure Plus (NPA-32) (**) của hãng Bioer, máy tách chiết tự động của hãng Thermo Kingfisher, máy tách chiết tự động của hãng TANbead… Đối với mỗi dòng máy tách chiết tự động sẽ có những đặc điểm khác nhau như số lượng mẫu tách cho mỗi lượt, thời gian thực hiện, các vật tư tiêu hao dành riêng cho từng máy,.. Từ đó chúng tôi sẽ chọn Kit phù hợp cho nhu cầu của từng đơn vị. Ví dụ đối với máy NPA-32 của hãng  Bioer chúng tôi có Kit tách chiết: Maga Genomic DNA/RNA Extraction VISIKIT (MGEKA-32.R.B) (**)

Để biết thêm chi tiết cho các thiết bị liên quan đến tách chiết DNA/RNA tự động các bạn có thể liên hệ Visitech qua số hotline hoặc email (**)

Thực hiện phản ứng PCR

• Đầu tiên bạn kiểm tra số lượng mẫu, lấy số lượng cần thiết ống FFR-03 rPCR mix sau đó rã đông ống ở nhiệt độ phòng (15–25°C), spindown để toàn bộ chất lỏng di chuyển xuống đáy.
• Bạn hãy mở nắp lần lượt và hút 5 µL mẫu cho vào các tube FFR-03 rPCR mix đã chuẩn bị ở trên  theo thứ tự: Chứng âm, chứng âm tách chiết, DNA mẫu và cuối cùng là mẫu  đối chứng dương nhất sau đó đóng nắp tube để hạn chế việc nhiễm chéo tốt nhất.
• Mỗi lần chạy nên có ít nhất một chứng âm tách chiết,một  chứng dương và một chứng âm PCR để có thể kiểm soát kết quả test.
• Sau khi bạn thực hiện các bước trên bạn hãy kiểm tra lại nắp PCR và spindown để chất lỏng di chuyển xuống đáy trước khi đặt vào máy. Chọn kênh màu FAM cho Listeria monocytogenes và kênh màu HEX cho chứng nội.

Cài đặt chương trình nhiệt như bên dưới:

Phân tích kết quả

Mẫu âm tính với Listeria monocytogenes: chỉ có đường biểu diễn huỳnh quang HEX của chứng nội vượt lên khỏi ngưỡng tín hiệu

Không xuất hiện tín hiệu nào, kể cả màu HEX: Phản ứng qPCR bị ức chế, do đó không thể kết luận được là mẫu âm tính hay dương tính. Tiến hành pha loãng mẫu 10 lần hoặc tách lại DNA.

Mẫu dương tính với Listeria monocytogenes: đường biểu diễn huỳnh quang FAM, HEX cùng vượt lên khỏi ngưỡng tín hiệu. Trong 1 số trường hợp mẫu dương tính mạnh với trình tự mục tiêu, đường biểu diễn huỳnh quang HEX có thể nằm dưới ngưỡng tín hiệu.

Bảng tóm tắt phân tích kết quả:

Xử lý sự cố

Đối với bất kì sự cố nào khi sử dụng sản phẩm của Visitech chúng tôi sẽ hỗ trợ bạn giải quyết một cách chuyên nghiệp nhất. Dưới đây là một số lỗi thường gặp và cách khắc phục:

Tại sao nên chọn Visikit

Visitech tự hào là đơn vị tư nhân với nhiều năm kinh nghiệm trong nhiều lĩnh vực khác nhau, trong đó lĩnh vực sinh học phân tử là một trong những thế mạnh của chúng tôi. 

Chúng tôi cam kết đưa đến tay khách hàng sản phẩm đạt chất lượng theo tiêu chuẩn ISO 13485 năm 2016, là tiêu chuẩn ISO về hệ thống quản lý an toàn cho sản phẩm.

Bên cạnh đó, Visitech có đội ngũ R & D có chuyên môn cao và giàu kinh nghiệm, luôn nghiên cứu, trau dồi để chọn lọc và đưa ra sản phẩm tốt nhất đến tay người sử dụng. 

Đặc biệt, công ty chúng tôi có hàng DEMO để chạy thử nghiệm nhằm chứng minh chất lượng đối với những khách hàng có nhu cầu. Kỹ sư chúng tôi sẽ trực tiếp hướng dẫn và training cho tới khi thành thạo.

Visitech – Nhà sản xuất Kit PCR chất lượng cao

Ngoài việc phát hiện Listeria monocytogenes trong thực phẩm bằng phương pháp realtime PCR, Visitech chúng tôi còn cung cấp thêm các kit qPCR phát hiện các loài vi sinh gây bệnh thực phẩm khác theo link danh mục sau: https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/kit-test/kit-real-time-pcr/   

Khi truy cập vào link này, chúng ta sẽ thấy thêm một số loại Kit realtime khác dùng để phát hiện một số tác nhân gây bệnh trong thực phẩm. Ví dụ như: Kit qPCR để phát hiện Staphylococcus aureus (**) ; Kit qPCR Shighella (**), Kit qPCR Vibrio cholera (**)…

Đặc biệt, ngoài việc cung cấp hóa chất cho phát hiện bệnh, Visitech cũng đem đến cho Qúy khách hàng một giải pháp tổng thể và đầy đủ về các trang thiết bị, vật tư tiêu hao cho một phòng thử nghiệm PCR, realtime PCR đạt chuẩn. Mời Qúy khách hàng tham khảo Link bên dưới: https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/sinh-hoc-phan-tu/ 

Thông tin liên hệ Visitech 

Trên đây là những thông tin chi tiết về Kit qPCR phát hiện Listeria monocytogenes của Visitech mà chúng tôi biên soạn. Hy vọng những chia sẻ trên sẽ mang đến cho Quý Khách hàng những thông tin bổ ích. 

Visitech chúng tôi tự tin và tự hào với đội ngũ nhân viên có nhiều năm kinh nghiệm về lĩnh vực sinh học phân tử, đặc biệt là các xét nghiệm liên quan đến phát hiện virus, vi khuẩn trong thực phẩm, thủy sản, thú y…Chúng tôi luôn trên tinh thần sẵn sàng được tư vấn chi tiết, giải đáp thắc mắc và hỗ trợ mọi ý kiến của Qúy khách hàng. Hãy liên hệ ngay với chúng tôi theo địa chỉ bên dưới:

• Email: info@visitech.vn
• Hotline: 0919112141
• Zalo: 0919112141
• Website: https://visitech.vn/
• Map: Công ty TNHH Khoa Học Kỹ Thuật Việt Sinh 
• Kênh Youtube: Visitech
• Fanpage: Visitech
• Địa chỉ: 730/1/2/7C Hương Lộ 2, Phường Bình Trị Đông A, Quận Bình Tân, Tp.HCM