Salmonella spp. real time PCR Visikit FFR-02

Đặc điểm chung của vi khuẩn Salmonella spp.

Salmonella spp. thuộc họ Enterobacteriaceae, là một giống vi khuẩn hình que, trực khuẩn gram âm, kị khí tùy nghi không tạo bào tử, di động bằng tiêm mao, sinh sống trong đường ruột, có đường kính khoảng 0,7 um đến 1,5 µm, dài từ 2 µm đến 5 µm và có vành lông rung hình roi. 

Salmonella spp. là một trong những nguyên nhân quan trọng gây ra nhiễm khuẩn trên thực phẩm. Trong đó, S. typhimurium và S. enteritidis là hai kiểu huyết thanh thường gặp gây bệnh phổ biến cho người. Ước tính có 75% trường hợp ở người mắc bệnh do Salmonella là do ăn phải những thức ăn bị nhiễm khuẩn bao gồm thịt bò, thịt heo, thịt gia cầm và trứng. 

Vi khuẩn Salmonella là nguyên nhân gây ngộ độc thực phẩm hàng đầu trên thế giới. Theo báo cáo hàng năm của Cơ quan An toàn thực phẩm châu Âu (EFSA) và Trung tâm Phòng chống dịch bệnh châu Âu (ECDC), trong năm 2018 thì gần 1/3 số vụ ngộ độc thực phẩm tại các quốc gia Châu Âu do Salmonella gây ra.

Vì vậy việc thử nghiệm kiểm tra sự hiện diện của vi khuẩn Salmonella spp. trong tục phẩm là hết sức cần thiết. 

Nguyên nhân gây nhiễm khuẩn Salmonella spp.

Không bảo đảm an toàn thực phẩm trong khâu chế biến

Do các chất bài tiết (nước bọt, nước tiểu, phân và nước dịch cơ thể khác) của người bệnh và động vật

Do mặt nước bị ô nhiễm và nước tù đọng (ví dụ như trong ống vòi sen và các thiết bị truyền nước mà không được sử dụng lâu dài trước đó)

Do sự không vệ sinh của gia cầm đông lạnh khi làm tan đá (nhiều vi khuẩn có trong nước đông)

Do trứng tươi sống đến từ gia cầm bị nhiễm khuẩn salmonella (thường là salmonella chỉ có trên vỏ trứng, nhưng cũng có thể lọt vào trong nếu vỏ trứng bị hư hay là rạn nứt, hay là qua tay người), thường gây ngộ độc khi ăn trứng hoặc sản phẩm gia cầm chưa chế biến kỹ hoặc nấu chín

Nhưng cũng có thể qua sữa chưa được tiệt trùng, cá ngừ sống, dưa chuột, cà chua, giá đỗ nhiễm khuẩn.

Lợi ích của việc kiểm tra nhanh vi khuẩn Salmonella spp.

Hiện nay có rất nhiều phương pháp thử nghiệm sự hiện diện của vi khuẩn Staphylococcus aureus như: các phương pháp phân lập và thử nghiệm sinh hóa truyền thống, Petrifilm 3M… Tuy nhiên hầu hết các phương pháp này đều mang lại các kết quả có độ chính xác tương đối và thời gian thử nghiệm lâu, không phù hợp với các đơn vị sản xuất lớn với các yêu cầu nghiêm ngặt về chất lượng sản phẩm. 

Salmonella spp. real time PCR ViSiKit

Để có thể giải quyết các vấn đề tồn đọng ở trên Visitech giới thiệu đến các bạn một phương pháp mang lại giá trị thử nghiệm đạt độ nhạy và độ đặc hiệu cao trong phát hiện Salmonella spp.. Phương pháp mà chúng tôi đề cập là phương pháp real-time PCR để kiểm tra sự hiện diện của Salmonella spp. trên mẫu thực phẩm. Bên cạnh các ưu điểm của phương pháp realtime-PCR sử dụng bộ kit Salmonella spp. realtime PCR ViSiKit cũng yêu cầu các trung tâm xét nghiệm cần trang bị các phòng thử nghiệm đạt độ an toàn và các thiết bị như máy realtime PCR, máy ly tâm, tủ âm sâu… cùng đội ngũ kỹ thuật viên được đào tạo chuyên nghiệp. Visitech chúng tôi sẽ giúp bạn giải quyết tất cả các vấn đề trên để mang lại hiệu quả công việc và lợi nhuận tốt nhất.

Điều kiện lưu trữ

 -20⁰C

Tên sản phẩm

Salmonella spp. Real time PCR ViSiKit

Mã sản phẩm

FFR-02

Nhà sản xuất

Visitech- Việt Nam

Hạn sử dụng

12 tháng kể từ ngày sản xuất

Thành phần bộ kit

Hướng dẫn sử dụng

Quy trình tách chiết DNA 

Quy trình tách thủ công: Được áp dụng cho các phòng kiểm nghiệm nhỏ và số lượng mẫu tương đối ít. Các bạn có thể sử dụng các phương pháp thu hồi DNA bằng các hóa chất như Phenol, Chloroform, Isopropanol,…hoặc để tiện lợi hơn Visitech giới thiệu các bạn tham khảo bộ Kit tách chiết bằng phương pháp cột Silica của chúng tôi: Food DNA Extraction ViSiKit (**) hoặc bộ Tissue Viral Extraction kit (**)

Quy trình tách tự động: Được áp dụng phù hợp cho các phòng kiểm nghiệm độc lập, công ty thực phẩm, doanh nghiệp sản xuất có số lượng mẫu lớn, đòi hỏi thời gian kiểm nghiệm nhanh. Visitech hiện đang cung cấp các loại hóa chất tự động trên đa dạng nhiều loại máy khác nhau như máy tách chiết DNA/ RNA tự động Gene Pure Plus (NPA-32) (**) của hãng Bioer, máy tách chiết tự động của hãng Thermo Kingfisher, máy tách chiết tự động của hãng TANbead… Đối với mỗi dòng máy tách chiết tự động sẽ có những đặc điểm khác nhau như số lượng mẫu tách cho mỗi lượt, thời gian thực hiện, các vật tư tiêu hao dành riêng cho từng máy,.. Từ đó chúng tôi sẽ chọn Kit phù hợp cho nhu cầu của từng đơn vị. Ví dụ đối với máy NPA-32 của hãng  Bioer chúng tôi có Kit tách chiết: Maga Genomic DNA/RNA Extraction VISIKIT (MGEKA-32.R.B)(**)

Để biết thêm chi tiết cho các thiết bị liên quan đến tách chiết DNA/RNA tự động các bạn có thể liên hệ Visitech qua số hotline hoặc email (**)

• Đầu tiên bạn kiểm tra số lượng mẫu, lấy số lượng cần thiết ống FFR-02 rPCR mix sau đó rã đông ống ở nhiệt độ phòng (15–25°C), spindown để toàn bộ chất lỏng di chuyển xuống đáy.
• Bạn hãy mở nắp lần lượt và hút 5 µL mẫu cho vào các tube FFR-02 rPCR mix đã chuẩn bị ở trên  theo thứ tự: Chứng âm, chứng âm tách chiết, DNA mẫu và cuối cùng là mẫu  đối chứng dương nhất sau đó đóng nắp tube để hạn chế việc nhiễm chéo tốt nhất.
• Mỗi lần chạy nên có ít nhất một chứng âm tách chiết,một  chứng dương và một chứng âm PCR để có thể kiểm soát kết quả test.
• Sau khi bạn thực hiện các bước trên bạn hãy kiểm tra lại nắp PCR và spindown để chất lỏng di chuyển xuống đáy trước khi đặt vào máy. Chọn kênh màu FAM cho Salmonella spp. và kênh màu HEX cho chứng nội.

Cài đặt chương trình nhiệt như bên dưới:

Phân tích kết quả

• Mẫu âm tính với Salmonella spp.: chỉ có đường biểu diễn huỳnh quang HEX của chứng nội vượt lên khỏi ngưỡng tín hiệu
• Không xuất hiện tín hiệu nào, kể cả màu HEX: Phản ứng qPCR bị ức chế, do đó không thể kết luận được là mẫu âm tính hay dương tính. Tiến hành pha loãng mẫu 10 lần hoặc tách lại DNA.
• Mẫu dương tính với Salmonella spp.: đường biểu diễn huỳnh quang FAM, HEX cùng vượt lên khỏi ngưỡng tín hiệu. Trong 1 số trường hợp mẫu dương tính mạnh với trình tự mục tiêu, đường biểu diễn huỳnh quang HEX có thể nằm dưới ngưỡng tín hiệu.

Bảng tóm tắt phân tích kết quả:

Xử lý sự cố

Tại sao nên chọn Visikit

Visitech tự hào là đơn vị tư nhân với nhiều năm kinh nghiệm trong nhiều lĩnh vực khác nhau, trong đó lĩnh vực sinh học phân tử là một trong những thế mạnh của chúng tôi. 

Chúng tôi cam kết đưa đến tay khách hàng sản phẩm đạt chất lượng theo tiêu chuẩn ISO 13485 năm 2016, là tiêu chuẩn ISO về hệ thống quản lý an toàn cho sản phẩm.

Bên cạnh đó, Visitech có đội ngũ R & D có chuyên môn cao và giàu kinh nghiệm, luôn nghiên cứu, trau dồi để chọn lọc và đưa ra sản phẩm tốt nhất đến tay người sử dụng. 

Đặc biệt, công ty chúng tôi có hàng DEMO để chạy thử nghiệm nhằm chứng minh chất lượng đối với những khách hàng có nhu cầu. Kỹ sư chúng tôi sẽ trực tiếp hướng dẫn và training cho tới khi thành thạo.

Visitech – Nhà sản xuất Kit PCR chất lượng cao

Ngoài việc phát hiện Salmonella spp. trong thực phẩm bằng phương pháp realtime PCR, Visitech chúng tôi còn cung cấp thêm các kit qPCR phát hiện các loài vi sinh gây bệnh thực phẩm khác theo link danh mục sau: https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/kit-test/kit-real-time-pcr/   

Khi truy cập vào link này, chúng ta sẽ thấy thêm một số loại Kit realtime khác dùng để phát hiện một số tác nhân gây bệnh trong thực phẩm. Ví dụ như: Kit qPCR để phát hiện Staphylococcus aureus (**) ; Kit qPCR Listeria spp. (**), Kit qPCR E.coli (**) …

Đặc biệt, ngoài việc cung cấp hóa chất cho phát hiện bệnh, Visitech cũng đem đến cho Qúy khách hàng một giải pháp tổng thể và đầy đủ về các trang thiết bị, vật tư tiêu hao cho một phòng thử nghiệm PCR, realtime PCR đạt chuẩn. Mời Qúy khách hàng tham khảo Link bên dưới: https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/sinh-hoc-phan-tu/ 

Thông tin liên hệ Visitech 

Trên đây là những thông tin chi tiết về Kit qPCR phát hiện Salmonella spp. của Visitech mà chúng tôi biên soạn. Hy vọng những chia sẻ trên sẽ mang đến cho Quý Khách hàng những thông tin bổ ích. 

Visitech chúng tôi tự tin và tự hào với đội ngũ nhân viên có nhiều năm kinh nghiệm về lĩnh vực sinh học phân tử, đặc biệt là các xét nghiệm liên quan đến phát hiện virus, vi khuẩn trong thực phẩm, thủy sản, thú y…Chúng tôi luôn trên tinh thần sẵn sàng được tư vấn chi tiết, giải đáp thắc mắc và hỗ trợ mọi ý kiến của Qúy khách hàng. Hãy liên hệ ngay với chúng tôi theo địa chỉ bên dưới:

• Email: info@visitech.vn
• Hotline: 0919112141
• Zalo: 0919112141
• Website: https://visitech.vn/
• Map: Công ty TNHH Khoa Học Kỹ Thuật Việt Sinh 
• Kênh Youtube: Visitech
• Fanpage: Visitech
• Địa chỉ: 730/1/2/7C Hương Lộ 2, Phường Bình Trị Đông A, Quận Bình Tân, Tp.HCM