WSSV gây bệnh đốm trắng trên tôm
WSSV thuộc họ Nimaviridae, có dạng hình trụ, elip hoặc hình trứng, rộng khoảng 121 ± 9nm, dài khoảng 276 ± 26nm, có vỏ bọc, không có thể vùi.
Bộ gen của virus WSSV này là DNA sợi đôi với kích thước khoảng 305 kb.
WSSV là loại virus gây chết tôm nhiều nhất, nhanh nhất và có khả năng lây nhiễm cao. Khi thâm nhập vào cơ thể vật chủ, virus này cư trú ở nhiều bộ phận như mô nội bì, mô dạ dày, mang, buồng trứng (hay tinh hoàn), hệ thống thần kinh, mắt, chân bơi, …
Khi nhiễm bệnh, WSSV ban đầu là các đốm trắng trên vỏ đầu và sau đó là toàn bộ cơ thể của tôm. Tình trạng lờ đờ, phụ bộ xuất hiện mảng đỏ hoặc toàn bộ cơ thể, vỏ mềm, bụng ốp, ruột rỗng.
EMS gây hội chứng chết sớm trên tôm
EMS (Early Mortality Syndrome) hay còn gọi là bệnh hoại tử gan tụy cấp tính. Đây là bệnh đặc trưng có tỷ lệ tử vong cao. Bệnh lây truyền qua đường miệng và ký sinh trong đường tiêu hóa của tôm. Sau đó tạo ra một độc tố gây phá hủy mô và rối loạn chức năng cơ quan tiêu hóa của tôm.
Khi bị bệnh này, tôm thường xuất hiện các triệu chứng như: bơi không bình thường hoặc bơi gần đáy ao; làm trắng gan tụy của tôm hoặc có màu nhợt nhạt; làm giảm kích thước gan tụy; Vỏ tôm và đầu tôm mềm và lỏng lẻo; gan tụy tôm xuất hiện các vết đốm hoặc vệt đen hoặc bị xơ cứng
Công dụng của công cụ chẩn đoán nhanh WSSV và EMS
- Kiểm soát tôm giống, phát hiện sớm bệnh WSSV/ EMS trên tôm giống để đưa ra pháp đồ điều trị
- Sàng lọc thức ăn cho tôm bố mẹ
- Kiểm soát bệnh của ao nuôi, nguồn nước cần được kiểm tra, lấy mẫu nhằm chẩn đoán bệnh WSSV/EMS trên tôm định kỳ, thường xuyên.
- Kiểm tra tôm thành phẩm định kỳ theo từng giai đoạn trong khu vực nuôi trồng.
Hiện nay có rất nhiều phương pháp kiểm tra sự có mặt của virus gây bệnh WSSV/EMS như: các phương pháp phân lập và thử nghiệm sinh hóa truyền thống, các loại kit test nhanh [**],… Các phương pháp này không cần đầu tư các trang thiết bị cao cấp tuy nhiên kết quả cho độ nhạy và độ đặc hiệu không cao chỉ phù hợp cho các hộ nuôi trồng nhỏ lẻ. Đối với một số nhà máy, trung tâm kiểm nghiệm, kết quả kiểm nghiệm yêu cầu có độ tin cậy cao, để tránh hạn chế gây thiệt hại lớn nhất. Phương pháp tối ưu nhất là kiểm tra sự có mặt của WSSV/EMS bằng phương pháp phân tử (PCR -Realtime PCR) mà Visitech sẽ giới thiệu ở bên dưới.
WSSV|EMS PCR Visikit
Để có thể giải quyết các vấn đề về độ đặc hiệu chúng ta có thể sử dụng phương pháp PCR để kiểm tra sự hiện diện của virus, vi khuẩn gây bệnh trên tôm. WSSV|EMS PCR Visikit được sử dụng phổ biến trong phương pháp này mang lại giá trị thử nghiệm đạt độ nhạy và độ đặc hiệu cao trong phát hiện virus gây bệnh. Bên cạnh các ưu điểm của phương pháp PCR sử dụng bộ kit WSSV|EMS PCR Visikit cũng yêu cầu các phòng kiểm nghiệm phải trang bị một số thiết bị để hỗ trợ quá trình xét nghiệm như: máy PCR, máy ly tâm, tủ bảo quản, thiết bị điện di, … cùng với đó là đội ngũ kỹ thuật viên được đào tạo chuyên nghiệp. Visitech sẽ giúp bạn giải quyết tất cả các vấn đề trên để mang lại hiệu quả công việc và lợi nhuận tốt nhất.
Điều kiện lưu trữ
-200C
Tên sản phẩm
WSSV|EMS PCR Visikit
Mã sản phẩm
FAPA-15
Nhà sản xuất
Visitech- Việt Nam
Hạn sử dụng
12 tháng kể từ ngày sản xuất
Thành phần bộ kit
Thành phần | Quy cách |
50 test | |
WSSV/EMS PCR mix | 64×20µL |
Chứng dương WSSV/EMS | 1×100 µL |
Chứng âm | 1x1mL |
Hướng dẫn sử dụng
Quy trình tách chiết DNA
- Quy trình tách thủ công: sẽ được áp dụng cho các phòng kiểm nghiệm nhỏ và số lượng mẫu tương đối ít. Các bạn có thể sử dụng các phương pháp thu hồi DNA bằng các hóa chất như Phenol, Chloroform, Isopropanol,…hoặc sử dụng bộ tách chiết thô (Crude DNA Extraction ViSiKit) (**) hoặc bộ tách chiết bằng phương pháp cột Silica (Highpure Viral Extraction ViSiKit) (**)
- Quy trình tách chiết tự động: Được áp dụng phù hợp cho các phòng kiểm nghiệm độc lập, công ty thực phẩm, doanh nghiệp sản xuất có số lượng mẫu lớn, đòi hỏi thời gian kiểm nghiệm nhanh. Visitech hiện đang cung cấp các loại hóa chất tự động trên đa dạng nhiều loại máy khác nhau như máy tách chiết DNA/ RNA tự động Gene Pure Plus (NPA-32) [**] của hãng Bioer, máy tách chiết tự động của hãng Thermo Kingfisher, máy tách chiết tự động của hãng TANbead… Đối với mỗi dòng máy tách chiết tự động sẽ có những đặc điểm khác nhau như số lượng mẫu tách cho mỗi lượt, thời gian thực hiện, các vật tư tiêu hao dành riêng cho từng máy,.. Từ đó chúng tôi sẽ chọn Kit phù hợp cho nhu cầu của từng đơn vị. Ví dụ đối với máy NPA-32 của hãng Bioer chúng tôi có Kit tách chiết: Maga Genomic DNA/RNA Extraction VISIKIT (MGEKA-32.R.B) [**]
Để biết thêm chi tiết cho các thiết bị liên quan đến tách chiết DNA/RNA tự động các bạn có thể liên hệ Visitech qua số hotline hoặc email [**]
Thực hiện phản ứng PCR
Lấy số lượng cần thiết ống WSSV/EMS PCR mix. Rã đông ống ở nhiệt độ phòng (15–25°C), sau đó spindown để toàn bộ chất lỏng di chuyển xuống đáy.
✓ Hút 5 μL DNA mẫu, chứng âm tách chiết, chứng dương cho vào các tube WSSV/EMS PCR mix đã chuẩn bị ở trên.
✓ Chú ý:
✓ Mỗi lần chạy nên có ít nhất 1 chứng âm tách chiết, 1 chứng dương và 1 chứng âm PCR.
✓ Chuẩn bị phản ứng theo thứ tự sau: Chứng âm, chứng âm tách chiết, mẫu và chứng dương.
✓ Đóng nắp PCR và spindown để chất lỏng di chuyển xuống đáy trước khi đặt vào máy.
Cài đặt chương trình nhiệt cho PCR:
1 chu kỳ | 95oC | 3 phút |
45 chu kỳ | 95oC | 10 giây |
60oC | 20 giây | |
72oC | 40 giây | |
1 chu kỳ | 72oC | 3 phút |
Điện di
Bộ kit điện di Agarose Electrophoresis (AE-01) được khuyến cáo sử dụng cho điện di sản phẩm PCR. Quy trình thực hiện xem hướng dẫn của bộ Agarose Electrophoresis (AE-01).[**]
Phân tích kết quả
Bảng tóm tắt phân tích kết quả
Sau khi điện di hoàn tất, kết quả điện di được đọc trên bàn đèn UV hoặc máy đọc gel Sau khi điện di hoàn tất, kết quả điện di được đọc trên bàn đèn UV hoặc máy đọc gel sử dụng đèn UV
✓ Thang DNA 100bp sử dụng gồm 10 vạch từ 100 đến 1000 bp
✓ Kết quả dự kiến như sau:
+ Mẫu dương tính với WSSV: xuất hiện băng kích thước 526bp (giữa vạch 500bp và 600 bp), nằm trên cùng
+ Mẫu dương tính với EMS: xuất hiện băng với kích thước 316bp (giữa vạch 200 và 300)
+ Chứng nội: xuất hiện băng với kích thước 102bp
Chú ý: Vạch mờ phía dưới vạch 100bp là vạch mồi còn thừa lại sau phản ứng
Trong chứng dương bao gồm sẵn DNA tôm, WSSV và EMS.
STT | WSSV (526 bp) | EMS (316 bp) | IC (102 bp) | Kết luận |
1 | + | + | -/+ | Mẫu dương tính với cả WSSV/EMS |
2 | + | – | + | Mẫu dưong tính WSSV |
3 | – | + | + | Mẫu dương tính EMS |
4 | – | – | + | Mẫu âm tính |
5 | – | – | – | Không thể kết luận |
Xử lý sự cố
Đối với bất kì sự cố nào khi sử dụng sản phẩm của Visitech chúng tôi sẽ hỗ trợ bạn giải quyết một cách chuyên nghiệp nhất. Dưới đây là một số lỗi thường gặp và cách khắc phục:
Sự cố | Nguyên nhân | Khắc phục |
Không xuất hiện vạch nào ở tất cả các giếng, kể cả chứng dương | . Cài đặt sai chương trình PCR
|
1. Kiểm tra lại chương trình chạy PCR
2. Kiểm tra lại hoạt động của thiết bị PCR 3. Kiểm tra lại điều kiện bảo quản và hạn sử dụng của kit |
Chứng dương bình thường mẫu xét nghiệm không cho vạch DNA, kể cả vạch của đối chứng nội |
|
|
Xuất hiện vạch DNA trong chứng âm, chứng âm tách chiết | 1. Micro pipet bị nhiễm DNA mục tiêu hoặc sản phẩm PCR
2. Hóa chất PCR bị nhiễm DNA mục tiêu hoặc sản phẩm PCR 3. Môi trường làm việc bị nhiễm DNA mục tiêu hoặc sản phẩm PCR |
|
Visitech – Nhà sản xuất Kit PCR chất lượng cao
Ngoài việc phát hiện bệnh WSSV/EMS trên tôm , Visitech chúng tôi còn cung cấp thêm các kit PCR phát hiện các loài vi sinh gây bệnh thủy sản khác theo link danh mục sau:
https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/kit-test/kit-pcr/
Khi truy cập vào link này, chúng ta sẽ thấy thêm nhiều loại Kit dùng để phát hiện bệnh trên thủy sản như: Kit PCR MBV để phát hiện Monodon Baculovirus ở trên tôm. Khi bị bệnh này Tôm sẽ có biểu hiện lơ mơ, biếng ăn, có màu sẫm và có nhiều vết như bị bám bẩn trên bề mặt vỏ tôm; Kit PCR IHHNV để phát hiện Infectiou Hyperdermal and Hematopietic Necrosis Virrus. Khi bị nhiễm virus này gây dị dạng và coi cọc trên tôm [**]; Kit PCR YHV (Yellow head virus) để phát hiện YHV gây bệnh đầu vàng trên tôm và còn rất nhiều Kit phát hiện bệnh trên thủy sản khác. Các bạn có thể truy cập link bên dưới:
https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/kit-test/kit-pcr/?filter=dau-nhua-a
Bên cạnh đó, Visitech chúng tôi cũng đã có danh mục sản phẩm Kit Realtime PCR phát hiện bệnh trên thủy sản gây bệnh tương tự Kit PCR. Tuy nhiên, Realtime PCR là kỹ thuật được cải tiến từ PCR. Nó khắc phục được những khuyết điểm mà PCR chưa làm được. Thông tin chi tiết xin truy cập Link:
https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/kit-test/kit-real-time-pcr/
Đặc biệt, ngoài việc cung cấp hóa chất cho phát hiện bệnh, Visitech cũng đem đến cho Qúy khách hàng một giải pháp tổng thể và đầy đủ về các trang thiết bị, vật tư tiêu hao cho một phòng thử nghiệm PCR, realtime PCR đạt chuẩn. Mời Qúy khách hàng tham khảo Link bên dưới: https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/sinh-hoc-phan-tu/
Tại sao nên chọn Visikit
Visitech tự hào là đơn vị tư nhân với nhiều năm kinh nghiệm trong nhiều lĩnh vực khác nhau, trong đó lĩnh vực sinh học phân tử là một trong những thế mạnh của chúng tôi.
Chúng tôi cam kết đưa đến tay khách hàng sản phẩm đạt chất lượng theo tiêu chuẩn ISO 13485 năm 2016, là tiêu chuẩn ISO về hệ thống quản lý an toàn cho sản phẩm.
Bên cạnh đó, Visitech có đội ngũ R & D có chuyên môn cao và giàu kinh nghiệm, luôn nghiên cứu, trau dồi để chọn lọc và đưa ra sản phẩm tốt nhất đến tay người sử dụng.
Đặc biệt, công ty chúng tôi có hàng DEMO để chạy thử nghiệm nhằm chứng minh chất lượng đối với những khách hàng có nhu cầu. Kỹ sư chúng tôi sẽ trực tiếp hướng dẫn và training cho tới khi thành thạo.
Thông tin liên hệ Visitech
Trên đây là những thông tin chi tiết về Kit PCR phát hiện WSSV/EMS của Visitech mà chúng tôi biên soạn. Hy vọng những chia sẻ trên sẽ mang đến cho Quý Khách hàng những thông tin bổ ích.
Visitech chúng tôi tự tin và tự hào với đội ngũ nhân viên có nhiều năm kinh nghiệm về lĩnh vực sinh học phân tử, đặc biệt là các xét nghiệm liên quan đến phát hiện virus, vi khuẩn trong thực phẩm, thủy sản, thú y…Chúng tôi luôn trên tinh thần sẵn sàng được tư vấn chi tiết, giải đáp thắc mắc và hỗ trợ mọi ý kiến của Qúy khách hàng. Hãy liên hệ ngay với chúng tôi theo địa chỉ bên dưới:
- Email: info@visitech.vn
- Hotline: 0919112141
- Zalo: 0919112141
- Website: https://visitech.vn/
- Map: Công ty TNHH Khoa Học Kỹ Thuật Việt Sinh
- Kênh Youtube: Visitech
- Fanpage: Visitech
- Địa chỉ: 730/1/2/7C Hương Lộ 2, Phường Bình Trị Đông A, Quận Bình Tân, Tp.HCM
Đánh giá
Chưa có đánh giá nào.