WSSV là bệnh gì?
Vi rút gây hội chứng đốm trắng WSSV (White Spot Syndrome Virus) là một loại vi rút gây bệnh cho tôm có độc lực mạnh và khả năng phát tán mầm bệnh nhanh chóng. Chúng có thể lây nhiễm trên nhiều loài giáp xác (nước ngọt, nước lợ và nước mặn) theo chiều ngang (qua môi trường nước và ăn vật nhiễm bệnh tại ao nuôi) và chiều dọc (từ tôm mẹ nhiễm bệnh sang tôm con trong các trại sản xuất giống)
Virus hội chứng đốm trắng (WSSV) là một loại virus sợi đôi DNA thuộc họ Nimaviridae ảnh hưởng đến tất cả loại tôm. Loại vi rút này dẫn đến tỷ lệ chết cao ở các trang trại nuôi tôm trên toàn thế giới và rất dễ lây lan.
WSSV đặc trưng gây ra các đốm trắng nhỏ xuất hiện trên bề mặt bên trong của lớp biểu bì, vỏ và phần phụ, được cho là kết quả của sự rối loạn chức năng của cơ quan, dẫn đến sự tích tụ muối canxi trong lớp biểu bì.
Biểu mô của mang, dạ dày và dạ dày bị tổn thương nghiêm trọng nhất và các rối loạn chức năng liên quan dẫn đến tử vong trong giai đoạn cuối của nhiễm bệnh. Các dấu hiệu lâm sàng khác bao gồm biểu bì lỏng lẻo, giảm tiêu thụ thức ăn đột ngột và hôn mê.
Khi virus đã đạt đến ngưỡng nồng độ, dịch bệnh bùng phát cực kỳ nhanh chóng, buộc người nông dân phải thu hoạch khẩn cấp. Tôm nhiễm WSSV có thể nhanh chóng phát triển các đốm trắng (đường kính từ 0.5–3.0 mm) trên vỏ và bên trong biểu bì.
Do đó, việc phát hiện sớm vi rút bằng PCR kịp thời cải thiện hệ thống miễn dịch của vật chủ và giảm sự phát triển của vi rút là điều rất quan trọng.
Loài cảm nhiễm
Tôm sú (Penaeus monodon), tôm chân trắng (Litopenaeus vannamei) và các loài giáp xác khác ở mọi giai đoạn sinh trưởng;
Phân bố, mùa vụ, lan truyền
Bệnh đốm trắng xuất hiện đầu tiên ở Trung Quốc vào năm 1992 sau đó lan nhanh sang các nước khác như Thái Lan, Nhật Bản, Indonesia. Ở Việt Nam, bệnh được phát hiện lần đầu tiên vào năm 1993. Bệnh đốm trắng thường xuất hiện vào giai đoạn chuyển mùa giữa mùa mưa hoặc cuối mùa mưa đầu mùa khô, khi tôm nuôi được khoảng 45 – 60 ngày tuổi. Bệnh lan truyền theo đường truyền ngang và đường truyền dọc;
Đặc điểm bệnh lý
Tôm bị bệnh có màu hồng đến hồng đỏ, xuất hiện những đốm màu trắng có đường kính từ 0,5-3 mm ở mặt trong lớp vỏ kitin vùng đầu ngực và đốt bụng thứ 5, 6 sau đó lan ra toàn thân. Tỷ lệ chết có thể lên tới 100% trong vòng 3-5 ngày.
Công dụng của công cụ chẩn đoán nhanh bệnh Đốm trắng trên tôm WSSV
- Kiểm soát tôm giống, phát hiện sớm bệnh WSSV trên tôm giống để đưa ra pháp đồ điều trị
- Sàng lọc thức ăn cho tôm bố mẹ
- Kiểm soát bệnh của ao nuôi, nguồn nước cần được kiểm tra, lấy mẫu nhằm chẩn đoán bệnh WSSV trên tôm định kỳ, thường xuyên.
- Kiểm tra tôm thành phẩm định kỳ theo từng giai đoạn trong khu vực nuôi trồng.
Hiện nay có rất nhiều phương pháp kiểm tra sự có mặt của virus gây bệnh WSSV như: các phương pháp phân lập và thử nghiệm sinh hóa truyền thống, các loại kit test nhanh (**)… Các phương pháp này không cần đầu tư các trang thiết bị cao cấp tuy nhiên kết quả cho độ nhạy và độ đặc hiệu không cao chỉ phù hợp cho các hộ nuôi trồng nhỏ lẻ. Đối với một số nhà máy, trung tâm kiểm nghiệm, kết quả kiểm nghiệm yêu cầu có độ tin cậy cao, để tránh hạn chế gây thiệt hại lớn nhất. Phương pháp tối ưu nhất là kiểm tra sự có mặt của WSSV bằng phương pháp phân tử (PCR -Realtime PCR) mà Visitech sẽ giới thiệu ở bên dưới.
WSSV PCR VISKIT
Để có thể giải quyết các vấn đề về độ đặc hiệu chúng ta có thể sử dụng phương pháp PCR để kiểm tra sự hiện diện của virus gây bệnh WSSV trên mẫu tôm. WSSV PCR VISKIT được sử dụng phổ biến trong phương pháp này mang lại giá trị thử nghiệm đạt độ nhạy và độ đặc hiệu cao trong phát hiện virus gây bệnh WSSV. Bên cạnh các ưu điểm của phương pháp PCR sử dụng bộ kit WSSV PCR VISKIT cũng yêu cầu các phòng kiểm nghiệm phải trang bị một số thiết bị để hỗ trợ quá trình xét nghiệm như: máy PCR, máy ly tâm, tủ bảo quản, thiết bị điện di, … cùng với đó là đội ngũ kỹ thuật viên được đào tạo chuyên nghiệp. Visitech sẽ giúp bạn giải quyết tất cả các vấn đề trên để mang lại hiệu quả công việc và lợi nhuận tốt nhất.
Điều kiện lưu trữ
-200C
Tên sản phẩm
WSSV PCR VISKIT
Mã sản phẩm
FAPA-01
Nhà sản xuất
Visitech- Việt Nam
Hạn sử dụng
12 tháng kể từ ngày sản xuất
Thành phần bộ kit
| Thành phần | Quy cách |
| 50 test | |
| WSSV PCR mix | 64×20µL |
| Chứng dương WSSV | 1×100 µL |
| Chứng âm | 1x1mL |
Hướng dẫn sử dụng
Quy trình tách chiết DNA
- Quy trình tách thủ công: sẽ được áp dụng cho các phòng kiểm nghiệm nhỏ và số lượng mẫu tương đối ít. Các bạn có thể sử dụng các phương pháp thu hồi DNA bằng các hóa chất như Phenol, Chloroform, Isopropanol,…hoặc sử dụng bộ tách chiết thô (Crude DNA Extraction ViSiKit) (**) hoặc bộ tách chiết bằng phương pháp cột Silica (Highpure Viral Extraction ViSiKit) (**)
- Quy trình tách chiết tự động: Được áp dụng phù hợp cho các phòng kiểm nghiệm độc lập, công ty thực phẩm, doanh nghiệp sản xuất có số lượng mẫu lớn, đòi hỏi thời gian kiểm nghiệm nhanh. Visitech hiện đang cung cấp các loại hóa chất tự động trên đa dạng nhiều loại máy khác nhau như máy tách chiết DNA/ RNA tự động Gene Pure Plus (NPA-32) (**) của hãng Bioer, máy tách chiết tự động của hãng Thermo Kingfisher, máy tách chiết tự động của hãng TANbead… Đối với mỗi dòng máy tách chiết tự động sẽ có những đặc điểm khác nhau như số lượng mẫu tách cho mỗi lượt, thời gian thực hiện, các vật tư tiêu hao dành riêng cho từng máy,.. Từ đó chúng tôi sẽ chọn Kit phù hợp cho nhu cầu của từng đơn vị. Ví dụ đối với máy NPA-32 của hãng Bioer chúng tôi có Kit tách chiết: Maga Genomic DNA/RNA Extraction VISIKIT (MGEKA-32.R.B) (**)
- Để biết thêm chi tiết cho các thiết bị liên quan đến tách chiết DNA/RNA tự động các bạn có thể liên hệ Visitech qua số hotline hoặc email (**)
Thực hiện phản ứng PCR
- Đầu tiên bạn kiểm tra số lượng mẫu, lấy số lượng cần thiết ống WSSV PCR mix sau đó rã đông ống ở nhiệt độ phòng (15–25°C), spindown để toàn bộ chất lỏng di chuyển xuống đáy.
- Bạn hãy mở nắp lần lượt và hút 5 µL mẫu cho vào các tube WSSV PCR mix đã chuẩn bị ở trên theo thứ tự: Chứng âm, chứng âm tách chiết, DNA mẫu và cuối cùng là mẫu đối chứng dương sau đó đóng nắp tube để hạn chế việc nhiễm chéo tốt nhất.
- Mỗi lần chạy nên có ít nhất một chứng âm tách chiết,một chứng dương và một chứng âm PCR để có thể kiểm soát kết quả test.
- Sau khi bạn thực hiện các bước trên bạn hãy kiểm tra lại nắp PCR và spindown để chất lỏng di chuyển xuống đáy trước khi đặt vào máy.
Cài đặt chương trình nhiệt như bên dưới:
| 1 chu kỳ | 95oC | 3 phút |
| 45 chu kỳ | 95oC | 10 giây |
| 60oC | 10 giây | |
| 72oC | 20 giây | |
| 1 chu kỳ | 72oC | 3 phút |
Điện di
Bộ kit điện di Agarose Electrophoresis (AE-01) được khuyến cáo sử dụng cho điện di sản phẩm PCR. Quy trình thực hiện xem hướng dẫn của bộ Agarose Electrophoresis (AE-01) (**)
Phân tích kết quả
Bảng tóm tắt phân tích kết quả
- Sau khi điện di hoàn tất, kết quả điện di được đọc trên bàn đèn UV hoặc máy đọc gel sử dụng đèn UV
- Thang DNA 100 bp sử dụng gồm 10 vạch từ 100 đến 1000 bp
- Kết quả dự kiến như sau:
+ Mẫu dương tính với WSSV: hiện băng với kích thước 526 bp (ngay trên vạch 500 bp của Thang 100 bp)
+ Chứng nội: hiện băng với kích thước 102 bp
Chú ý: Một số trường hợp xuất hiện vạch mờ phía dưới vạch 100 bp là do mồi thừa sau phản ứng.
Trong chứng dương đã bao gồm sẵn DNA tôm và WSSV
| STT | WSSV (526 bp) | IC (102 bp) | Kết luận |
| 1 | + | -/+ | Mẫu dương tính WSSV |
| 2 | – | + | Mẫu âm tính WSSV |
| 3 | – | – | Không thể kết luận |
Xử lý sự cố
Đối với bất kì sự cố nào khi sử dụng sản phẩm của VISITECH chúng tôi sẽ hỗ trợ bạn giải quyết một cách chuyên nghiệp nhất. Dưới đây là một số lỗi thường gặp và cách khắc phục:
| Sự cố | Nguyên nhân | Khắc phục |
| Không xuất hiện vạch nào ở tất cả các giếng, kể cả chứng dương | . Cài đặt sai chương trình PCR
|
1. Kiểm tra lại chương trình chạy PCR
2. Kiểm tra lại hoạt động của thiết bị PCR 3. Kiểm tra lại điều kiện bảo quản và hạn sử dụng của kit |
| Chứng dương bình thường mẫu xét nghiệm không cho vạch DNA, kể cả vạch của đối chứng nội |
|
|
| Xuất hiện vạch DNA trong chứng âm, chứng âm tách chiết | 1. Micro pipet bị nhiễm DNA mục tiêu hoặc sản phẩm PCR
2. Hóa chất PCR bị nhiễm DNA mục tiêu hoặc sản phẩm PCR 3. Môi trường làm việc bị nhiễm DNA mục tiêu hoặc sản phẩm PCR |
|
Tại sao nên chọn Visikit
Visitech tự hào là đơn vị tư nhân với nhiều năm kinh nghiệm trong nhiều lĩnh vực khác nhau, trong đó lĩnh vực sinh học phân tử là một trong những thế mạnh của chúng tôi.
Chúng tôi cam kết đưa đến tay khách hàng sản phẩm đạt chất lượng theo tiêu chuẩn ISO 13485 năm 2016, là tiêu chuẩn ISO về hệ thống quản lý an toàn cho sản phẩm.
Bên cạnh đó, Visitech có đội ngũ R & D có chuyên môn cao và giàu kinh nghiệm, luôn nghiên cứu, trau dồi để chọn lọc và đưa ra sản phẩm tốt nhất đến tay người sử dụng.
Đặc biệt, công ty chúng tôi có hàng DEMO để chạy thử nghiệm nhằm chứng minh chất lượng đối với những khách hàng có nhu cầu. Kỹ sư chúng tôi sẽ trực tiếp hướng dẫn và training cho tới khi thành thạo.
Visitech – Nhà sản xuất Kit PCR chất lượng cao
Ngoài việc phát hiện bệnh WSSV trên tôm , Visitech chúng tôi còn cung cấp thêm các kit PCR phát hiện các loài vi sinh gây bệnh thủy sản khác theo link danh mục sau:
https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/kit-test/kit-pcr/
Khi truy cập vào link này, chúng ta sẽ thấy thêm nhiều loại Kit dùng để phát hiện bệnh trên thủy sản như: Kit PCR MBV để phát hiện Monodon Baculovirus ở trên tôm. Khi bị bệnh này Tôm sẽ có biểu hiện lơ mơ, biếng ăn, có màu sẫm và có nhiều vết như bị bám bẩn trên bề mặt vỏ tôm; Kit PCR IHHNV để phát hiện Infectiou Hyperdermal and Hematopietic Necrosis Virrus. Khi bị nhiễm virus này gây dị dạng và coi cọc trên tôm (**); Kit PCR YHV (Yellow head virus) để phát hiện YHV gây bệnh đầu vàng trên tôm và còn rất nhiều Kit phát hiện bệnh trên thủy sản khác. Các bạn có thể truy cập link bên dưới:
https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/kit-test/kit-pcr/?filter=dau-nhua-a
Bên cạnh đó, Visitech chúng tôi cũng đã có danh mục sản phẩm Kit Realtime PCR phát hiện bệnh trên thủy sản gây bệnh tương tự Kit PCR. Tuy nhiên, Realtime PCR là kỹ thuật được cải tiến từ PCR. Nó khắc phục được những khuyết điểm mà PCR chưa làm được. Thông tin chi tiết xin truy cập Link:
https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/kit-test/kit-real-time-pcr/
Đặc biệt, ngoài việc cung cấp hóa chất cho phát hiện bệnh, Visitech cũng đem đến cho Qúy khách hàng một giải pháp tổng thể và đầy đủ về các trang thiết bị, vật tư tiêu hao cho một phòng thử nghiệm PCR, realtime PCR đạt chuẩn. Mời Qúy khách hàng tham khảo Link bên dưới: https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/sinh-hoc-phan-tu/
Thông tin liên hệ Visitech
Trên đây là những thông tin chi tiết về Kit PCR phát hiện WSSV của Visitech mà chúng tôi biên soạn. Hy vọng những chia sẻ trên sẽ mang đến cho Quý Khách hàng những thông tin bổ ích.
Visitech chúng tôi tự tin và tự hào với đội ngũ nhân viên có nhiều năm kinh nghiệm về lĩnh vực sinh học phân tử, đặc biệt là các xét nghiệm liên quan đến phát hiện virus, vi khuẩn trong thực phẩm, thủy sản, thú y…Chúng tôi luôn trên tinh thần sẵn sàng được tư vấn chi tiết, giải đáp thắc mắc và hỗ trợ mọi ý kiến của Qúy khách hàng. Hãy liên hệ ngay với chúng tôi theo địa chỉ bên dưới:
- Email: info@visitech.vn
- Hotline: 0919112141
- Zalo: 0919112141
- Website: https://visitech.vn/
- Map: Công ty TNHH Khoa Học Kỹ Thuật Việt Sinh
- Kênh Youtube: Visitech
- Fanpage: Visitech
- Địa chỉ: 730/1/2/7C Hương Lộ 2, Phường Bình Trị Đông A, Quận Bình Tân, Tp.HCM
Đánh giá
Chưa có đánh giá nào.