ASFV gây bệnh gì?
ASFV gây bệnh tả lợn châu Phi. Đây là một bệnh truyền nhiễm nguy hiểm do vi rút African swine fever virus gây ra ảnh hưởng rất lớn đối với kinh tế người dân nên cần triển khai quyết liệt các biện pháp ngăn chặn và kiểm soát sớm dịch bệnh trên các đàn lợn.
Phương thức lây nhiễm
Bệnh lây nhiễm từ qua đường hô hấp và đường tiêu hóa, Thông qua việc tiếp xúc trực tiếp hoặc gián tiếp với các vật nhiễm virus như: lợn nhiễm bệnh, chuồng trại, phương tiện vận chuyển, dụng cụ, đồ dùng, quần áo nhiễm virus và thức ăn chứa thịt lợn nhiễm bệnh.
Triệu chứng gây bệnh
Dấu hiệu mắc bệnh ở lợn có thể khác nhau, phụ thuộc vào độc lực của virus cũng như chủng/ loài lợn. Trong trường hợp cấp tính, lợn có thể có các dấu hiệu đặc trưng như sốt cao, lờ đờ, bỏ ăn, xuất huyết da (đỏ da tai, bụng và chân), sẩy thai, tím tái, nôn, tiêu chảy và tử vong trong vòng 6-13 ngày (hoặc tối đa 20 ngày).
Tỷ lệ tử vong có thể lên tới 100%. Đối với các trường hợp nhẹ hơn thì tỷ lệ tử vong có thể dao động từ 30-70%. Bệnh cũng có xảy ra dưới dạng mạn tính với các triệu chứng bao gồm giảm cân, sốt không liên tục, các dấu hiệu hô hấp, loét da mãn tính và viêm khớp.
Phương pháp phát hiện ASFV
Hiện nay có rất nhiều phương pháp thử nghiệm sự hiện diện của vi rút gây bệnh trên thú y như: các phương pháp phân lập và thử nghiệm sinh hóa truyền thống, quan sát máu dưới kính hiển vi, kit test nhanh [*],… Tuy nhiên hầu hết các phương pháp này đều mang lại kết quả có độ chính xác tương đối và thời gian thử nghiệm lâu, không phù hợp với các đơn vị sản xuất cần kết quả thử nghiệm có độ tin cậy, chính xác cao.
Vì vậy, việc sử dụng phương pháp real-time PCR để kiểm tra sự hiện diện của tổ hợp nhiều loại vi rút gây bệnh trên thú y chỉ thông qua một thí nghiệm sẽ giúp cải thiện được thời gian, độ nhạy và độ đặc hiệu cao.
ASFV qPCR Visikit
Sản phẩm ASFV PCR Visikit được sử dụng phổ biến trong phương pháp này mang lại giá trị thử nghiệm đạt độ nhạy và độ đặc hiệu cao trong phát hiện vi rút gây bệnh ASFV. Đối với phương pháp real-time PCR sử dụng bộ kit ASFV PCR Visikit yêu cầu phải trang bị một số thiết bị phục vụ cho việc phát hiện mầm bệnh như máy real-time PCR, máy ly tâm, tủ bảo quản và một số vật tư tiêu hao thông thường,…cùng đội ngũ kỹ thuật viên được đào tạo về chuyên môn cũng như kỹ năng.
Visitech sẽ giúp bạn giải quyết tất cả các vấn đề trên để mang lại hiệu quả công việc và lợi nhuận tốt nhất. Chúng tôi sẽ lựa chọn cho bạn một giải pháp tốt nhất phù hợp với yêu cầu của bạn.
Điều kiện lưu trữ
-200C
Tên sản phẩm
ASFV qPCR Visitech
Mã sản phẩm
FFP-07
Nhà sản xuất
Visitech- Việt Nam
Hạn sử dụng
12 tháng kể từ ngày sản xuất
Thành phần bộ kit
Thành phần | Quy cách |
50 test | |
ASFV PCR mix | 64×20µL |
Chứng dương ASFV | 1×100 µL |
Chứng âm | 1x1mL |
Hướng dẫn sử dụng
Chuẩn bị mẫu
✓ Mẫu bệnh phẩm từ lách, hạch amidan, hạch bạch huyết, thận từ lợn: được nghiền thành huyễn dịch 10% với dung dịch nước sinh lý hoặc PBS vô trùng. Sau đó ly tâm 1500 rpm trong 10 phút. Thu dịch nổi có thể dùng để chẩn đoán phát hiện vi rút dịch tả lợn Châu phi bằng phản ứng real-time PCR.
✓ Mẫu máu toàn phần: máu được thu trong ống chuyên dụng chứa chất chống đông máu (không sử dụng ống chứa heparin vì sẽ gây ức chế phản ứng).
✓ Huyết thanh: Lấy 3mL máu cho vào tube (không chứa chất chống đông EDTA và heparin). Sau đó, tiến hành phân tách huyết thanh bằng cách ly tâm ở 3000 rpm trong 15 phút. Huyết thanh sau đó được chuyển vào tube polypropylene vô trùng.
Tách chiết DNA/RNA
✓ Bộ Genomic DNA Extraction Visikit được khuyến cáo sử dụng cho tách chiết DNA virus từ mẫu huyễn dịch 10%; bộ kit Blood DNA Extraction Visikit được khuyến cáo sử dụng cho tách chiết DNA virus từ mẫu máu toàn phần; và bộ kit Serum Viral Extraction Visikit được khuyến cáo sử dụng cho tách chiết DNA virus từ mẫu huyết thanh. Quy trình thực hiện xem theo HDSD của các bộ kit kể trên.
Thực hiện phản ứng PCR
✓ Lấy số lượng cần thiết ống ASFV PCR mix. Rã đông ống ở nhiệt độ phòng (15–25°C), sau đó spindown để toàn bộ chất lỏng di chuyển xuống đáy.
✓ Hút 5 μL DNA mẫu, chứng âm tách chiết, chứng dương cho vào các tube ASFV PCR mix đã chuẩn bị ở trên.
Chú ý:
– Mỗi lần chạy nên có ít nhất 1 chứng âm tách chiết, 1 chứng dương và 1 chứng âm PCR.
– Chuẩn bị phản ứng theo thứ tự sau: Chứng âm, chứng âm tách chiết, mẫu và chứng dương.
✓ Đóng nắp PCR và spindown để chất lỏng di chuyển xuống đáy trước khi đặt vào máy.
Cài đặt chương trình nhiệt như bên dưới:
1 chu kỳ | 95oC | 3 phút |
45 chu kỳ | 95oC | 10 giây |
60oC | 60 giây |
Điện di
✓ Bộ kit điện di Agarose Electrophoresis được khuyến cáo sử dụng cho điện di sản phẩm PCR sử dụng chung với bộ ASFV PCR Visikit. Quy trình thực hiện xem hướng dẫn của bộ Agarose Electrophoresis
Phân tích kết quả
✓ Sau khi điện di hoàn tất, kết quả điện di được đọc trên bàn đèn UV hoặc máy đọc gel sử dụng đèn UV
✓ Thang DNA 100 bp sử dụng gồm 10 vạch từ 100 đến 1000 bp
✓ Kết quả dự kiến như sau:
+ Mẫu dương tính với ASFV: hiện băng với kích thước 250 bp (giữa vạch 200bp và 300bp của Thang 100 bp)
+ Chứng nội: hiện băng với kích thước 102 bp
Chú ý: Một số trường hợp xuất hiện vạch mờ phía dưới vạch 100 bp là do mồi thừa sau phản ứng.
Trong chứng dương đã bao gồm sẵn DNA chứng nội và ASFV
STT | ASFV (250 bp) | IC (102 bp) | Kết luận |
1 | + | -/+ | Mẫu dương tính ASFV |
2 | – | + | Mẫu âm tính ASFV |
3 | – | – | Không thể kết luận |
Xử lý sự cố
Đối với bất kì sự cố nào khi sử dụng sản phẩm của Visitech chúng tôi sẽ hỗ trợ bạn giải quyết một cách chuyên nghiệp nhất. Dưới đây là một số lỗi thường gặp và cách khắc phục:
Sự cố | Nguyên nhân | Khắc phục |
Không xuất hiện vạch nào ở tất cả các giếng, kể cả chứng dương | . Cài đặt sai chương trình PCR
|
1. Kiểm tra lại chương trình chạy PCR
2. Kiểm tra lại hoạt động của thiết bị PCR 3. Kiểm tra lại điều kiện bảo quản và hạn sử dụng của kit |
Chứng dương bình thường mẫu xét nghiệm không cho vạch DNA, kể cả vạch của đối chứng nội |
|
|
Xuất hiện vạch DNA trong chứng âm, chứng âm tách chiết | 1. Micro pipet bị nhiễm DNA mục tiêu hoặc sản phẩm PCR
2. Hóa chất PCR bị nhiễm DNA mục tiêu hoặc sản phẩm PCR 3. Môi trường làm việc bị nhiễm DNA mục tiêu hoặc sản phẩm PCR |
|
Visitech – Nhà sản xuất Kit PCR chất lượng cao
Ngoài việc phát hiện AFSV trên heo, Visitech chúng tôi còn cung cấp thêm các kit PCR phát hiện các loài virus, vi khuẩn gây bệnh trên thực phẩm, thủy sản. Các bạn có thể tham khảo link sau: https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/kit-test/kit-pcr/
Đặc biệt, ngoài việc cung cấp hóa chất cho phát hiện bệnh, Visitech cũng đem đến cho Qúy khách hàng một giải pháp tổng thể và đầy đủ về các trang thiết bị, vật tư tiêu hao cho một phòng thử nghiệm PCR, realtime PCR đạt chuẩn. Mời Qúy khách hàng tham khảo Link bên dưới: https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/sinh-hoc-phan-tu/
Tại sao nên chọn Visikit
Visitech tự hào là đơn vị tư nhân với nhiều năm kinh nghiệm trong nhiều lĩnh vực khác nhau, trong đó lĩnh vực sinh học phân tử là một trong những thế mạnh của chúng tôi.
Chúng tôi cam kết đưa đến tay khách hàng sản phẩm đạt chất lượng theo tiêu chuẩn ISO 13485 năm 2016, là tiêu chuẩn ISO về hệ thống quản lý an toàn cho sản phẩm.
Bên cạnh đó, Visitech có đội ngũ R & D có chuyên môn cao và giàu kinh nghiệm, luôn nghiên cứu, trau dồi để chọn lọc và đưa ra sản phẩm tốt nhất đến tay người sử dụng.
Đặc biệt, công ty chúng tôi có hàng DEMO để chạy thử nghiệm nhằm chứng minh chất lượng đối với những khách hàng có nhu cầu. Kỹ sư chúng tôi sẽ trực tiếp hướng dẫn và training cho tới khi thành thạo.
Thông tin liên hệ Visitech
Trên đây là những thông tin chi tiết về Kit PCR phát hiện ASFV của Visitech mà chúng tôi biên soạn. Hy vọng những chia sẻ trên sẽ mang đến cho Quý Khách hàng những thông tin bổ ích.
Visitech chúng tôi tự tin và tự hào với đội ngũ nhân viên có nhiều năm kinh nghiệm về lĩnh vực sinh học phân tử, đặc biệt là các xét nghiệm liên quan đến phát hiện virus, vi khuẩn trong thực phẩm, thủy sản, thú y…Chúng tôi luôn trên tinh thần sẵn sàng được tư vấn chi tiết, giải đáp thắc mắc và hỗ trợ mọi ý kiến của Qúy khách hàng. Hãy liên hệ ngay với chúng tôi theo địa chỉ bên dưới:
- Email: info@visitech.vn
- Hotline: 0919112141
- Zalo: 0919112141
- Website: https://visitech.vn/
- Map: Công ty TNHH Khoa Học Kỹ Thuật Việt Sinh
- Kênh Youtube: Visitech
- Fanpage: Visitech
- Địa chỉ: 730/1/2/7C Hương Lộ 2, Phường Bình Trị Đông A, Quận Bình Tân, Tp.HCM
Đánh giá
Chưa có đánh giá nào.