PHƯƠNG PHÁP LỌC MÀNG PHÁT HIỆN VÀ ĐẾM ENTEROCOCCI THEO TCVN 6189 – 2 : 2009/ ISO 7899 – 2 : 2000

1. Phạm vi áp dụng phương pháp lọc màng phát hiện và đếm Enterococci:
   

Phương pháp lọc màng phát hiện và đếm Enterococci được áp dụng để phát hiện và đếm khuẩn đường ruột trong nước bằng cách lọc qua màng; nhằm để kiểm tra nước uống, nước bể bơi và nước đã tẩy trùng, nước sạch, ngoại trừ nước có một lượng lớn các chất lơ lửng hoặc các loại vi sinh vật gây cản trở. Tiêu chuẩn này đặc biệt phù hợp để kiểm tra một thể tích nước lớn mà chỉ chứa một ít khuẩn đường ruột.

Xem hướng dẫn sử dụng nồi hấp tiệt trùng tại

2. Thiết bị, dụng cụ cần thiết
   

• Bộ lọc vi sinh
• Màng lọc vô khuẩn với kích thước lỗ 0,45 mm.
• Tủ ấm 37^oC
• Tủ ấm 44^oC
• Nồi hấp tiệt trùng.
• Kẹp vô trùng.
• Bếp điện hoặc bếp cách thủy, duy trì được nhiệt độ 100 ^oC.

3. Môi trường nuôi cấy và thuốc thử

• Nước cất loại 1 theo TCVN 4851 (ISO 3696)
• Môi trường Slanetz và Bartley
• Bile Esculin Agar

4. Thực hiện

4.1. Chuẩn bị mẫu

• Bắt đầu kiểm tra ngay sau khi lấy mẫu. Nếu giữ mẫu ở nhiệt độ môi trường xung quanh, thì việc kiểm tra cần phải tiến hành trong vòng 6 h kể từ khi lấy mẫu. Trong một số trường hợp ngoại lệ, có thể cho phép giữ mẫu tới 24 h trước khi kiểm tra nếu mẫu được bảo quản ở 5 ^oC ± 3 ^oC.

4.2. Lọc và nuôi cấy

• Lọc một thể tích nước kiểm tra thích hợp.
• Đặt màng lọc lên môi trường Slanetz và Bartley
• Ủ các đĩa ở 36 ^oC ± 2 ^oC trong 44 h ± 4 h.

4.3. Khẳng định và đếm

• Sau khi ủ, đếm tất cả các khuẩn lạc điển hình có màu nâu đỏ hoặc màu hồng từ trung tâm hoặc toàn bộ
• Nếu có khuẩn lạc điển hình, dùng kẹp vô khuẩn chuyển màng lọc và khuẩn lạc mà không đảo xuống, lên trên đĩa thạch Bile Esculin Agar đã được làm nóng trước ở 44 ^oC.
• Ủ ở 44 ^oC ± 0,5 ^oC trong 2 h.
• Đọc đĩa ngay lập tức.
• Đọc tất cả các khuẩn lạc điển hình có mầu từ nâu đến đen ở môi trường bao quanh

5. Biểu thị kết quả

• Tính toán kết quả theo ISO 8199.

Để được tư vấn chi tiết, giải đáp thắc mắc, hướng dẫn sử dụng và báo giá cụ thể, hãy liên hệ ngay với Visitech – Công ty TNHH Khoa học Kỹ thuật Việt Sinh qua các thông tin bên dưới:

• Email: info@visitech.vn – pkd@visitech.vn
• Hotline: 0919.112.141 – 0916.07.23.23
• Website: http://visitech.vn/
• Địa chỉ: 539 Lũy Bán Bích, P. Phú Thạnh, Q. Tân Phú, TPHCM