Hướng dẫn sử dụng Kit ELISA Kiểm Tra Ofloxacin trong Thủy Sản

Các bước cần chuẩn bị trước khi thực hiện thao tác với Bộ Kit ELISA:

Trong Hướng dẫn sử dụng Kit ELISA Kiểm Tra Ofloxacin trong Thủy Sản, cần pha loãng nồng độ các dung dịch để xử lý mẫu và thực hiện thao tác với Kit.

Xem thêm:

Độ nhạy: 1 ppb (ng/mL)

Chuẩn bị dung dịch:

• 1: Dung dịch HCl 0.1M: pha loãng 860µl HCl (36.5%) vào nước cất cho đủ 100ml.
• 2: Dung dịch Acetonitrile – Dichloromethane: Trộn theo tỷ lệ (V) 1 :4.
• 3: Dung dịch PB 0.02M (pH 7.2): Hòa tan 5.16g Na2HPO4.12H2O và 0.87g NaH2PO4.2H2O vào nước cất cho đủ 1l.
• 4: Dung dịch Acetonitrile – Dichloromethane – HCl 0.1M: Trộn 80ml Acetonitrile với 20ml Dichloromethane, sau đó thêm 5ml dung dịch HCl 0.1M.
• 5: Pha loãng dung dịch Concentrated redissolving 2x với nước cất theo tỷ lệ (V) 1:1.

Xử lý mẫu:

1. Cân 2 ± 0.05g mẫu đã được đồng nhất vào ống ly tâm 50ml.
2. Thêm 8mL dung dịch (Acetonitrile – Dichloromethane), vortex trong 5 phút, ly tâm 4000vòng/ 10phút ở 15^o
3. Hút 4ml dịch nổi sang ống mới, thổi khô bằng khí Nitơ hoặc không khí ở 56^o
4. Hòa tan phần cặn trong 1ml dung dịch Redissolving pha loaãng, thêm 1ml N-hexane, trộn trong 30s; ly tâm 4000 vòng/ 5 phút ở 15^o
5. Loại bỏ lớp N-hexane phía trên, lấy 50 µl phần dịch lỏng phía dưới để phân tích.

Hướng dẫn sử dụng Kit ELISA Kiểm Tra Ofloxacin – Thao tác với Kit Elisa:

Lấy Bộ Kit đặt ở nhiệt độ 20 – 25^oC trước khi sử dụng ít nhất 30phút. Lấy phần sử dụng và bảo quản phần còn lại ở nhiệt độ 2 – 8^oC.

1. Thêm mẫu: Hút 50µl Standard hoặc mẫu vào mỗi giếng, sau đó thêm 50µl Enzyme conjugate vào. Thêm 50µl antibody working solution vào mỗi giếng. Lắc nhẹ trong 5s để trộn và phủ kín bằng màng che. Ủ trong 45phút ở 25^o
2. Rửa: Loại bỏ dung dịch trong mỗi giếng. Lập tức thêm 250 µl wash buffer vào mỗi giếng và rửa. Lặp lại 5 lần, mỗi lần 15-30s. Lật ngược khay giếng đổ bỏ dịch rửa và úp vào khăn giấy sạch (chú ý tránh tạo bọt trong giếng, nếu có bọt sử dụng đầu tip để sạch để loại bỏ).
3. Tạo màu: Thêm 50 µl dung dịch Substrate A vào mỗi giếng, sau đó cho thêm vào 50 µl dung dịch Substrate B. Lắc nhẹ để  trộn đều. Ủ trong 15 phút ở 25^oC trong điều kiện tối.
4. Ngừng phản ứng: Thêm 50 µl dung dịch Stop vào mỗi giếng, lắc nhẹ để trộn hoàn toàn.
5. Đo OD: Bước sóng 450 (Bước sóng kép 450/630nm). Nên thực hiện bước này sau khi ngưng phản ứng trong 5phút.

Trên đây là Hướng dẫn sử dụng Kit ELISA Kiểm Tra Ofloxacin trong Thủy Sản. Để biết thêm thông tin về bộ Kit ELISA Kiểm Tra Dư lượng Kháng sinh, quý anh chị và các bạn vui lòng gửi về địa chỉ mail: info@visitech.vn hoặc liên hệ qua hot line của Công ty TNHH Khoa Học Kỹ Thuật Việt Sinh.