Lượt xem:
1.391
Sơ lược về thử nghiệm Voges Proskauer (VP)
- Thử nghiệm Voges Prokauer lấy tên Voges-Proskauer là tên đôi, đặt theo tên của hai nhà vi sinh làm việc vào đầu thế kỷ 20. Đầu tiên họ quan sát phản ứng màu đỏ được tạo ra bởi môi trường nuôi cấy thích hợp sau khi xử lý bằng kali hydroxit. Sau đó người ta phát hiện ra rằng hoạt tính trong môi trường được hình thành bởi sự trao đổi chất của vi khuẩn là acetyl methyl carbinol, một sản phẩm của dẫn xuất butylenes glycol.
- Pyruvic acid, hợp chất then chốt trong quá trình lên men glucose, được tiếp tục chuyển hóa thông qua các con đường trao đổi chất khác nhau, tùy thuộc vào hệ thống enzyme của các vi khuẩn khác nhau. Một trong những dẫn xuất được sinh ra là acetion (acetyl methyl carbinol), một sản phẩm cuối cùng phản ứng trung hòa.
- Các sinh vật như các thành viên của nhóm Klebsiella-Enterobacter-Hafnia-Serratia sinh acetoin như là sản phẩm cuối cùng của quá trình chuyển hóa glucose và tạo thành một lượng nhỏ axit hỗn hợp. Với sự hiện diện của oxy trong khí quyển và 40% kali hydroxit, acetoin được chuyển thành diacetyl, và alpha-naphthol đóng vai trò chất xúc tác để tạo ra một phức hợp màu đỏ.
MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY VI SINH VẬT – PHÂN LOẠI VÀ SỬ DỤNG (Phần 2)
Môi trường và thuốc thử cần cho thử nghiệm Voges Prokauer
1. Môi trường:
Sử dụng môi trường MR – VP Broth
2. Thuốc thử:
a, Alpha-naphthol, chất tạo màu 5%
- Alpha Naphthol-5g
- Cồn tuyệt đối – 100 mL
b, Kali Hydrooxide, 40%, chất oxy hóa
- Kali hydroxit 40g
- Nước cất đến: 100 mL
Kiểm soát chất lượng
Các kiểm soát dương tính và âm tính nên được thực hiện sau khi chuẩn bị từng lô môi trường và từng lô thuốc thử. Các kiểm soát được đề xuất bao gồm:
- Kiểm soát dương tính: Enterobacter aerogenes
- Kiểm soát âm tính: Escherichia coli
Quy trình thử nghiệm Voges Proskauer
- Cấy mẫu thuần vào ống MR – VP broth của sinh vật thử nghiệm.
- Ủ trong 24 giờ ở 35 oC
- Sau khi ủ, hút 1 ml dung dịch vào ống nghiệm sạch
- Thêm 0.6 mL alpha naphthol 5%, tiếp theo là 0,2 mL KOH 40%. (Lưu ý: Điều cần thiết là các thuốc thử được thêm vào theo thứ tự này.)
- Lắc nhẹ ống để môi trường tiếp xúc với oxy trong khí quyển và để ống yên trong 10 đến 15 phút.
Kết quả và diễn giải
Một thử nghiệm Voges Prokauer dương tính được biểu thị bằng sự phát triển của một màu đỏ sau 15 phút hoặc lâu hơn sau khi bổ sung các thuốc thử cho thấy sự có mặt của diacetyl, sản phẩm oxy hóa của acetoin. Thử nghiệm không nên đọc sau khi quá 1 giờ vì phản ứng Voges-Proskauer âm tính có thể tạo ra một màu đồng giống như vậy, có khả năng dẫn đến một kết quả dương tính giả.
Để được tư vấn chi tiết về Thử nghiệm Voges Prokauer, quý anh chị vui lòng gửi thông tin về địa chỉ mail: info@visitech.vn hoặc liên hệ trực tiếp qua hotline của Công ty TNHH Khoa Học Kỹ Thuật Việt Sinh.
