Kit tách chiết DNA từ dịch phết cổ tử cung và âm đạo- HPV Extraction Kit

Mô tả
Đánh giá (0)

Giới thiệu

Bộ HPV DNA Extraction ViSiKit là công cụ lý tưởng để tách chiết và tinh sạch DNA từ mẫu tế bào nuôi cấy, vi khuẩn, huyễn dịch (huyền phù), mẫu quét bề mặt, mẫu dịch phết (y tế)… bằng phương pháp cột silica. Phương pháp ly trích dựa trên công nghệ màng cột silica với buffer ly giải tối ưu tạo nên 1 quy trình đơn giản, nhanh chóng, sản phẩm tách chiết có độ tinh sạch cao.

Quy trình tách chiết và tất cả các buffer đều được tối ưu hoá để đảm bảo hiệu suất cao cũng như độ tinh khiết của DNA. Sản phẩm sau khi tách chiết được tạo ra để sử dụng cho các ứng dụng tiếp theo như: Real-time PCR, giải trình tự, Southern blot, SNP.

Giới hạn sử dụng sản phẩm

Những hóa chất đi kèm chỉ được sử dụng một lần.
Sản phẩm có thể không có tác dụng với những vật liệu mẫu khác, do đó sản phẩm không được bảo hành trong trường hợp này.

Thông tin an toàn

Khi làm việc với hóa chất, luôn mang áo choàng, găng tay dùng một lần và nên đổi găng tay sau mỗi bước để hạn chế nhiễm chéo.
Tránh tiếp xúc với da

Bộ HPV DNA Extraction VisiKit cung cấp một giải pháp nhanh chóng và hiệu quả để tách chiết đồng thời DNA/RNA chất lượng cao cho nguồn mẫu nghi nhiễm HPV. Số lượng DNA/RNA tinh sạch được từ bộ HPV DNA Extraction VisiKit phụ thuộc vào loại mẫu, vị trí lấy mẫu, hàm lượng virus có trong mẫu, nguồn mẫu, quá trình vận chuyển/ bảo quản mẫu và tuổi của bệnh phẩm.

Hướng dẫn sử dụng

Thành phần và quy cách sản phẩm

Thành phần	Quy cách		Công dụng
Thành phần	50 test HPVEKA-01	100 test HPVEKA-02	Công dụng
CL Buffer	15 mL	30 mL	Ly giải màng tế bào Thúc đẩy quá trình gắn acid nucleic vào silic.
WB1 Buffer *	18 mL	36 mL	Loại bỏ các phân tử tạp chất Hỗ trợ gắn DNA lên màng
WB2 Buffer *	9 mL	18 mL
EB Buffer	20 mL	40 mL
Proteinase K	1.2 mL	2 x 1.2 mL	Biến tính protein, ADN và các đại phân tử khác Bất hoạt nuclease
TE1X/ PBS Buffer	40 mL	80 mL	Dung môi rửa giải
Ethanol	60 mL	120 mL	Tăng cường gắn các nucleotide lên màng Silica Hỗ trợ loại muối sau khi liên kết DNA/RNA lên màng
Cột silica	50 cái	100 cái	Giá thể gắn nucleic acid
Tube 1.5 mL	100 cái	200 cái	Chứa dung dịch thu hồi

Hạn sử dụng

12 tháng kể từ ngày sản xuất.

Lưu ý trước khi sử dụng

(*) Thêm ethanol vào WB1 buffer, WB2 buffer vào lần đầu tiên sử dụng theo hướng dẫn trên nhãn chai.

Các thiết bị cần cho quá trình ly trích

Micropippet
Máy ly tâm
Máy vortex
Bồn ủ nhiệt
Côn/ Tip

Quy trình thực hiện

Những điểm quan trọng trước khi bắt đầu quy trình

Kiểm tra thành phần cũng như đóng gói của sản phẩm đảm bảo không có bất kỳ hư hỏng bề ngoài, đủ số lượng và chất lượng.
Hãy thông báo cho chúng tôi ngay lập tức nếu có kỳ vấn đề xảy ra sau khi kiểm tra lô hàng.
Không sử dụng các thành phần đã hư hỏng, nếu không sẽ dẫn đến giảm hiệu quả của bộ thuốc thử.
Luôn thay đầu côn/ tip giữa các lần hút. Nên sử dụng đầu côn/ tip có lọc để tránh nhiễm chéo.
Tất cả các bước ly tâm được thực hiện ở nhiệt độ phòng.
Khi thao tác với hóa chất, phải mang đồ bảo hộ, găng tay và kính bảo vệ.
Bỏ găng ngay nếu bị nhiễm.
Không nên hòa các thành phân của bộ thuốc thử với nhau nếu không cùng lô sản phẩm
Tránh để các thuốc thử bị nhiễm.
Thao tác các mẫu dưới điều kiện thông khí phòng thí nghiệm cho đến khi mẫu được ly giải hoàn toàn để tránh nguy cơ nhiễm.
Chỉ những nhân viên được đào tạo về Sinh học phân tử mới được sử dụng bộ thuốc thử.

Quy trình thực hiện chi tiết

1a. Tế bào, vi khuẩn nuôi cấy: Ly tâm dịch nuôi cấy ở tốc độ 13.000 rpm trong 5 phút, đổ bỏ môi trường nuôi cấy và huyền phù trong 200 μL PBS Buffer. Thêm 20 μL Proteinase K và chuyển sang bước 2.

1b. Mẫu huyễn dịch (huyền phù): Huyễn dịch nên được chuẩn bị trong PBS Buffer. Sau đó, sử dụng 200 μL huyễn dịch cho vào tube 1.5 ml. Thêm 20 μL Proteinase K và chuyển sang bước 2.

1c. Mẫu quét bề mặt: Mẫu sau khi quét bề mặt được đồng nhất trong PBS Buffer. Sau đó, sử dụng 200 μL cho vào tube 1.5 ml. Thêm 20 μL Proteinase K và chuyển sang bước 2.

1d. Mẫu dịch phết: Tùy thuộc loại mẫu sẽ có cách bảo quản và xử lý khác nhau. Mẫu sau khi xử lý, sử dụng 200 μL cho vào tube 1.5 ml. Thêm 20 μL Proteinase K và chuyển sang bước 2.

Chú ý: Đối với trường hợp sử dụng chứng nội (IC) để kiểm soát quá trình tách chiết thì IC được cho vào cùng với mẫu ở bước này.

2. Thêm 200 μL CL buffer, vortex đều và ủ 72oC trong 10 phút..

3. Thêm 200 μL Ethanol (96-100%), trộn đều và chuyển hỗn hợp sang cột silica đặt sẵn trong tube 2 mL. Ly tâm ở tốc độ 13,000 rpm trong 1 phút. Giữ lại cột và loại bỏ phần chất lỏng bên dưới.

4. Đặt lại cột vào tube 2 mL cũ. Thêm 500 μL WB1 buffer và ly tâm ở tốc độ 13,000 rpm trong 1 phút. Giữ lại cột và loại bỏ phần chất lỏng bên dưới.

5. Đặt lại cột vào tube 2 mL cũ. Thêm 500 μL WB2 buffer và ly tâm ở tốc độ 13,000 rpm trong 1 phút. Giữ lại cột và loại bỏ phần chất lỏng bên dưới.

6. Đặt lại cột vào tube 2 mL cũ. Làm khô cột bằng cách ly tâm ở tốc độ 13,000 rpm trong 1 phút.

7. Chuyển cột sang tube 1.5 mL mới. Thêm 50 μL EB buffer và ủ một phút ở nhiệt độ phòng. Ly tâm ở tốc độ 13,000 rpm trong 1 phút, thu phần dịch chứa DNA bên dưới.

8. DNA được sử dụng ngay hoặc bảo quản ở -20⁰C.

Những vấn đề gặp phải khi tách chiết ADN hoặc ARN bằng kit và cách khắc phục

Hiệu suất tách chiết thấp: có thể do các nguyên nhân sau:

Do giai đoạn ly giải: mẫu chưa được ly giải hoàn toàn
Điều kiện cho quá trình gắn không đúng, chất lượng ethanol không đảm bảo, nồng độ thấp ảnh hưởng hiệu quả gắn.
Nếu đệm rửa không chính xác cũng giảm hiệu quả gắn ADN hoặc ARN vào cột dẫn tới hiệu suất tách chiết thấp.

Độ tinh sạch thấp:

ADN tách chiết bị nhiễm protein (tỷ lệ 260/280 thấp) có thể do lượng mẫu sử dụng quá nhiều và protein không được ly giải và không được loại bỏ hoàn toàn.
ADN có tỉ lệ 260/230 thấp có thể do muối từ quá trình gắn hoặc đệm rửa vẫn còn sót lại chưa được loại bỏ hoàn toàn, vấn đề này sẽ ảnh hưởng rất lớn đến các quy trình tiếp theo như PCR.

Đứt gãy DNA/ RNA

ADN bị đứt gãy quá nhiều, có thể là do bạn đã sử dụng bước ly giải quá mạnh.

Tắc màng Silica

Quá trình ly giải và đồng nhất không đủ và/ hoặc quá nhiều vật liệu mẫu ban đầu, bạn nên tăng thời gian ly giải, tăng lực ly tâm /hoặc thời gian ly tâm, giảm lượng mẫu ban đầu.

Lưu trữ DNA/ RNA

DNA/RNA virus sau khi tách chiết sẵn sàng để sử dụng hoặc có thể được lưu trữ ở -80°C để sử dụng cho cho nhiều ứng dụng tiếp theo như:

PCR & Real-time PCR
Tổng hợp cDNA
Ứng dụng mircoarray

Với quy trình thực hiện nhanh, đa phần chỉ đơn giản là các bước li tâm ngắn, bộ tách chiết mang lại hiệu suất thu DNA/ RNA cao, sẵn sàng phục vụ cho các bước nghiên cứu tiếp theo. Tuy nhiên, bộ kit này chúng tôi sản xuất chuyên cho xét nghiệm các mẫu nhằm phát hiện virus HPV. Nếu nhu cầu của bạn kiểm nghiệm trên nhiều tác nhân khác nhau Visitech giới thiệu bạn bộ tách chiết bằng phương pháp thô Crude DNA Extraction ViSiKit (**), Bộ kit này có thể sử dụng trên đa dạng các loại mẫu khác nhau, đòi hỏi trang bị thêm các thiết bị phụ trợ như máy li tâm tốc độ cao (**) và máy ủ nhiệt (**) để phục vụ cho quá trình tách chiết được tốt nhất.

Visitech – Nhà sản xuất Kit tách chiết chất lượng cao

Ngoài bộ tách chiết Fluid Viral Extraction Visikt thì chúng tôi còn có thêm các bộ tách chiết cột cho các loại mẫu khác như mẫu thực phẩm, mẫu vi khuẩn, mẫu máu… Tuy nhiên phương pháp này sẽ phù hợp với các đơn vị có số lượng mẫu nhỏ, đối với một số nhà máy, trung tâm kiểm nghiệm lớn thì cần trang bị thêm hệ thống tách chiết tự động (**) để đảm bảo công suất hoạt động cho đơn vị.

Ngoài việc cung cấp hóa chất tách chiết, Visitech cũng cung cấp kèm theo các hóa chất phát hiện bệnh bằng phương pháp PCR- Realtime PCR đem đến cho Qúy khách hàng một giải pháp tổng thể cho việc phát hiện bệnh trên nhiều đối tượng khác nhau.

Đặc biệt, Visitech cũng cung cấp đầy đủ các trang thiết bị, vật tư tiêu hao cho một phòng thử nghiệm PCR, realtime PCR đạt chuẩn. Mời Qúy khách hàng tham khảo Link bên dưới: https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/sinh-hoc-phan-tu/

Tại sao nên chọn Visikit

Visitech tự hào là đơn vị tư nhân với nhiều năm kinh nghiệm trong nhiều lĩnh vực khác nhau, trong đó lĩnh vực sinh học phân tử là một trong những thế mạnh của chúng tôi. Chúng tôi cam kết đưa đến tay khách hàng sản phẩm đạt chất lượng nhất theo tiêu chuẩn ISO 13485:2016. Bên cạnh đó, Visitech có đội ngũ R&D có chuyên môn cao và giàu kinh nghiệm, luôn nghiên cứu, trau dồi để chọn lọc và đưa ra sản phẩm tốt nhất đến tay người sử dụng.

Đặc biệt, công ty chúng tôi luôn sẵn sàng để hỗ trợ quý đối tác thử nghiệm sản phẩm trước khi kí hợp đồng nhằm chứng minh chất lượng đối với những khách hàng có nhu cầu. Kỹ sư chúng tôi sẽ trực tiếp hướng dẫn bạn thử nghiệm cho tới khi thành thạo đạt yêu cầu.

Thông tin liên hệ Visitech

Trên đây là những thông tin chi tiết về Kit tách chiết bằng phương pháp cột silica HPV DNA Extraction Visikit (**) của của Visitech mà chúng tôi biên soạn. Hy vọng những chia sẻ trên sẽ mang đến cho Quý Khách hàng những thông tin bổ ích.

Visitech chúng tôi tự tin và tự hào với đội ngũ nhân viên có nhiều năm kinh nghiệm về lĩnh vực sinh học phân tử, đặc biệt là các xét nghiệm liên quan đến phát hiện virus, vi khuẩn trong thực phẩm, thủy sản, thú y…Chúng tôi luôn trên tinh thần sẵn sàng được tư vấn chi tiết, giải đáp thắc mắc và hỗ trợ mọi ý kiến của Qúy khách hàng. Hãy liên hệ ngay với chúng tôi theo địa chỉ bên dưới:

Email: info@visitech.vn
Hotline: 0919112141
Zalo: 0919112141
Website: https://visitech.vn/
Map: Công ty TNHH Khoa Học Kỹ Thuật Việt Sinh
Kênh Youtube: Visitech
Fanpage: Visitech
Địa chỉ: 730/1/2/7C Hương Lộ 2, Phường Bình Trị Đông A, Quận Bình Tân, Tp.HCM