EHP PCR Visikit FAPA-07

EHP là bệnh gì?

Bệnh vi bào tử trùng (Microsporidian) do ký sinh trùng Enterocytozoon hepatopenaei (EHP) thuộc họ Enterocytozoonidae gây ra hay còn gọi là bệnh chậm lớn. Bệnh xuất hiện nhiều nước có ngành công nghiệp nuôi tôm phát triển như: Trung Quốc, Thái Lan,  Malaysia, Indonesia, Ấn độ…. Ở Việt Nam, bệnh vi bào tử trùng xuất hiện từ năm 2015. Mặc dù đây không phải là bệnh nguy hiểm nhưng đã gây thiệt hại không nhỏ về kinh tế cho các hộ nuôi. Ngày 08/10/2019 Cục Thú y đã có công văn hướng dẫn phòng, chống bệnh vi bào tử trùng trên tôm nuôi nước lợ.

EHP ký sinh trong gan, tụy tôm và nhân lên bên trong tế bào chất của biểu mô ống gan, tụy. EHP ký sinh nội bào và sử dụng dinh dưỡng, năng lượng dự trữ trong gan, tụy khiến tôm không đủ dinh dưỡng, năng lượng cho sự tăng trưởng và lột xác. Hậu quả là tôm chậm lớn, giảm sức đề kháng dẫn tới nguy cơ tôm bị nhiễm thứ phát các tác nhân gây bệnh khác và làm chết tôm. Ngoài ra, tôm nhiễm EHP có thể tăng tính mẫn cảm với một số bệnh  như: Đốm trắng (WSD), hoại tử gan tụy cấp tính (AHPND),… dẫn đến tỉ lệ chết có thể lên đến 100% trong khoảng thời gian ngắn.

Loài cảm nhiễm

Các loài tôm bị bệnh bao gồm tôm sú (P. monodon), tôm thẻ chân trắng (Litopenaeus vannamei), tôm he (P. japonicus, P. merguiensis) ở tất cả các giai đoạn (giống, thương phẩm).

Triệu chứng

Có kích cỡ không đồng đều sau khoảng 25 ngày thả nuôi. Tăng trưởng của tôm chỉ đạt từ 10 – 40% so với tôm ở các ao không nhiễm bệnh. Ngoài ra, EHP thường được phát hiện nhiều trên các ao tôm nuôi đã nhiễm hội chứng phân trắng (WFS) với tỷ lệ nhiễm lên đến 96% và hội chứng chậm lớn (MSGS) với tỉ lệ nhiễm khoảng 55,5%.

Phòng bệnh

Áp dụng nghiêm ngặt các biện pháp kỹ thuật trong quản lý ao nuôi như quản lý con giống, thức ăn, môi trường nuôi, quy trình nuôi,… Việc thực hiện đầy đủ, liên tục các yêu cầu an toàn sinh học là biện pháp phòng bệnh hiệu quả nhất hiện nay. 

Công dụng của công cụ chẩn đoán nhanh bệnh tôm EHP

Kiểm soát tôm giống, phát hiện sớm bệnh EHP trên tôm giống để đưa ra pháp đồ điều trị

Sàng lọc thức ăn cho tôm bố mẹ

Kiểm soát bệnh của ao nuôi, nguồn nước cần được kiểm tra, lấy mẫu nhằm chẩn đoán bệnh EHP trên tôm định kỳ, thường xuyên. 

Kiểm tra tôm thành phẩm định kỳ theo từng giai đoạn trong khu vực nuôi trồng.

Hiện nay có rất nhiều phương pháp kiểm tra sự có mặt của virus gây bệnh EHP như: các phương pháp phân lập và thử nghiệm sinh hóa truyền thống, các loại kit test nhanh (**),… Các phương pháp này không cần đầu tư các trang thiết bị cao cấp tuy nhiên kết quả cho độ nhạy và độ đặc hiệu không cao chỉ phù hợp cho các hộ nuôi trồng nhỏ lẻ. Đối với một số nhà máy, trung tâm kiểm nghiệm, kết quả kiểm nghiệm yêu cầu có độ tin cậy cao, để tránh hạn chế gây thiệt hại lớn nhất. Phương pháp tối ưu nhất là kiểm tra sự có mặt của EHP bằng phương pháp phân tử (PCR -Realtime PCR) mà Visitech sẽ giới thiệu ở bên dưới.

EHP PCR VISIKIT

Để có thể giải quyết các vấn đề về độ đặc hiệu chúng ta có thể sử dụng phương pháp PCR để kiểm tra sự hiện diện của vi khuẩn gây bệnh  EHP trên mẫu tôm.  EHP PCR VISKIT được sử dụng phổ biến trong phương pháp này mang lại giá trị thử nghiệm đạt độ nhạy và độ đặc hiệu cao trong phát hiện vi khuẩn gây bệnh  EHP.  Bên cạnh các ưu điểm của phương pháp PCR sử dụng bộ kit EHP  PCR VISKIT cũng đòi hỏi các phòng thử nghiệm phải trang bị các phòng thử nghiệm đạt độ an toàn và các thiết bị như máy PCR, máy ly tâm, tủ âm sâu,… và đội ngũ kỹ thuật viên được đào tạo chuyên nghiệp. 

Visitech sẽ giúp bạn giải quyết tất cả các vấn đề trên để mang lại hiệu quả công việc và lợi nhuận tốt nhất. Chúng tôi sẽ lựa chọn cho bạn những thiết bị tốt nhất phù hợp với yêu cầu của bạn. 

Phương pháp này có thể sử dụng cho các phòng thí nghiệm nhỏ, các công ty, doanh nghiệp yêu cầu kiểm nghiệm, kiểm soát sự hiện diện của vi khuẩn gây bệnh  EHP  trong nuôi trồng tôm. 

Điều kiện lưu trữ

 -20⁰C

Tên sản phẩm

EHP PCR VISIKIT

Mã sản phẩm

FAPA-07

Nhà sản xuất

Visitech- Việt Nam

Hạn sử dụng

12 tháng kể từ ngày sản xuất

Thành phần bộ kit

Hướng dẫn sử dụng

Quy trình tách chiết DNA Quy trình tách chiết DNA

Quy trình tách thủ công: sẽ được áp dụng cho các phòng kiểm nghiệm nhỏ và số lượng mẫu tương đối ít. Các bạn có thể sử dụng các phương pháp thu hồi DNA bằng các hóa chất như Phenol, Chloroform, Isopropanol,…hoặc sử dụng bộ tách chiết thô (Crude DNA Extraction ViSiKit)(**) hoặc bộ tách chiết bằng phương pháp cột Silica (Highpure Viral Extraction ViSiKit) (**)

Quy trình tách chiết tự động: Được áp dụng phù hợp cho các phòng kiểm nghiệm độc lập, công ty thực phẩm, doanh nghiệp sản xuất có số lượng mẫu lớn, đòi hỏi thời gian kiểm nghiệm nhanh. Visitech hiện đang cung cấp các loại hóa chất tự động trên đa dạng nhiều loại máy khác nhau như máy tách chiết DNA/ RNA tự động Gene Pure Plus (NPA-32) (**) của hãng Bioer, máy tách chiết tự động của hãng Thermo Kingfisher, máy tách chiết tự động của hãng TANbead… Đối với mỗi dòng máy tách chiết tự động sẽ có những đặc điểm khác nhau như số lượng mẫu tách cho mỗi lượt, thời gian thực hiện, các vật tư tiêu hao dành riêng cho từng máy,.. Từ đó chúng tôi sẽ chọn Kit phù hợp cho nhu cầu của từng đơn vị. Ví dụ đối với máy NPA-32 của hãng  Bioer chúng tôi có Kit tách chiết: Maga Genomic DNA/RNA Extraction VISIKIT (MGEKA-32.R.B)(**)

Để biết thêm chi tiết cho các thiết bị liên quan đến tách chiết DNA/RNA tự động các bạn có thể liên hệ Visitech qua số hotline hoặc email(**)

Thực hiện phản ứng PCR

Đầu tiên bạn kiểm tra số lượng mẫu, lấy số lượng cần thiết ống EHP PCR mix sau đó rã đông ống ở nhiệt độ phòng (15–25°C), spindown để toàn bộ chất lỏng di chuyển xuống đáy.

Bạn hãy mở nắp lần lượt và hút 5 µL mẫu cho vào các tube EHP PCR mix đã chuẩn bị ở trên  theo thứ tự: Chứng âm, chứng âm tách chiết, DNA mẫu và cuối cùng là mẫu  đối chứng dương  sau đó đóng nắp tube để hạn chế việc nhiễm chéo tốt nhất.

Mỗi lần chạy nên có ít nhất một chứng âm tách chiết,một  chứng dương và một chứng âm PCR để có thể kiểm soát kết quả test.

Sau khi bạn thực hiện các bước trên bạn hãy kiểm tra lại nắp PCR và spindown để chất lỏng di chuyển xuống đáy trước khi đặt vào máy. 

Cài đặt chương trình nhiệt như bên dưới:

Điện di

 Bộ kit điện di Agarose Electrophoresis (AE-01) được khuyến cáo sử dụng cho điện di sản phẩm PCR. Quy trình thực hiện xem hướng dẫn của bộ Agarose Electrophoresis (AE-01)(**)

• Sau khi điện di hoàn tất, kết quả điện di được đọc trên bàn đèn UV hoặc máy đọc gel sử dụng đèn UV
• Thang DNA 100bp sử dụng gồm 10 vạch từ 100 đến 1000 bp
• Kết quả dự kiến như sau:

+ Mẫu dương tính với EHP: hiện băng với kích thước 177 bp (ngay dưới vạch 200bp của Thang 100 bp)

+ Chứng nội: hiện băng với kích thước 102 bp

Chú ý: Một số trường hợp xuất hiện vạch mờ phía dưới vạch 100 bp là do mồi thừa sau phản ứng.

Trong chứng dương đã bao gồm sẵn DNA tôm và EHP

Xử lý sự cố

Đối với bất kì sự cố nào khi sử dụng sản phẩm của VISITECH chúng tôi sẽ hỗ trợ bạn giải quyết một cách chuyên nghiệp nhất. Dưới đây là một số lỗi thường gặp và cách khắc phục:

Tại sao nên chọn Visikit

Visitech tự hào là đơn vị tư nhân với nhiều năm kinh nghiệm trong nhiều lĩnh vực khác nhau, trong đó lĩnh vực sinh học phân tử là một trong những thế mạnh của chúng tôi. 

Chúng tôi cam kết đưa đến tay khách hàng sản phẩm đạt chất lượng theo tiêu chuẩn ISO 13485 năm 2016, là tiêu chuẩn ISO về hệ thống quản lý an toàn cho sản phẩm.

Bên cạnh đó, Visitech có đội ngũ R & D có chuyên môn cao và giàu kinh nghiệm, luôn nghiên cứu, trau dồi để chọn lọc và đưa ra sản phẩm tốt nhất đến tay người sử dụng. 

Đặc biệt, công ty chúng tôi có hàng DEMO để chạy thử nghiệm nhằm chứng minh chất lượng đối với những khách hàng có nhu cầu. Kỹ sư chúng tôi sẽ trực tiếp hướng dẫn và training cho tới khi thành thạo.

Visitech – Nhà sản xuất Kit PCR chất lượng cao

Ngoài việc phát hiện bệnh EHP trên tôm, Visitech chúng tôi còn cung cấp thêm các kit PCR phát hiện các loài vi sinh gây bệnh thủy sản khác theo link danh mục sau: 

https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/kit-test/kit-pcr/

Khi truy cập vào link này, chúng ta sẽ thấy thêm nhiều loại Kit dùng để phát hiện bệnh trên thủy sản như: Kit PCR MBV để phát hiện Monodon Baculovirus ở trên tôm. Khi bị bệnh này Tôm sẽ có biểu hiện lơ mơ, biếng ăn, có màu sẫm và có nhiều vết như bị bám bẩn trên bề mặt vỏ tôm; Kit PCR  WSSV để phát hiện bệnh đốm trắng trên tôm. Khi bị nhiễm virus này gây gây ra các đốm trắng nhỏ xuất hiện trên bề mặt bên trong của lớp biểu bì, vỏ và phần phụ(**); Kit PCR YHV (Yellow head virus)  để phát hiện YHV gây bệnh đầu vàng trên tôm và còn rất nhiều Kit phát hiện bệnh trên thủy sản khác. Các bạn có thể truy cập link bên dưới:

https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/kit-test/kit-pcr/

Bên cạnh đó, Visitech chúng tôi cũng đã có danh mục sản phẩm Kit Realtime PCR phát hiện bệnh trên thủy sản gây bệnh tương tự Kit PCR. Tuy nhiên, Realtime PCR là kỹ thuật được cải tiến từ PCR. Nó khắc phục được những khuyết điểm mà PCR chưa làm được. Thông tin chi tiết xin truy cập Link:  

https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/kit-test/kit-real-time-pcr/  

Đặc biệt, ngoài việc cung cấp hóa chất cho phát hiện bệnh, Visitech cũng đem đến cho Qúy khách hàng một giải pháp tổng thể và đầy đủ về các trang thiết bị, vật tư tiêu hao cho một phòng thử nghiệm PCR, realtime PCR đạt chuẩn. Mời Qúy khách hàng tham khảo Link bên dưới: https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/sinh-hoc-phan-tu/ 

Thông tin liên hệ Visitech 

Trên đây là những thông tin chi tiết về Kit PCR phát hiện EHP của Visitech mà chúng tôi biên soạn. Hy vọng những chia sẻ trên sẽ mang đến cho Quý Khách hàng những thông tin bổ ích. 

Visitech chúng tôi tự tin và tự hào với đội ngũ nhân viên có nhiều năm kinh nghiệm về lĩnh vực sinh học phân tử, đặc biệt là các xét nghiệm liên quan đến phát hiện virus, vi khuẩn trong thực phẩm, thủy sản, thú y…Chúng tôi luôn trên tinh thần sẵn sàng được tư vấn chi tiết, giải đáp thắc mắc và hỗ trợ mọi ý kiến của Qúy khách hàng. Hãy liên hệ ngay với chúng tôi theo địa chỉ bên dưới:

• Email: info@visitech.vn
• Hotline: 0919112141
• Zalo: 0919112141
• Website: https://visitech.vn/
• Map: Công ty TNHH Khoa Học Kỹ Thuật Việt Sinh 
• Kênh Youtube: Visitech
• Fanpage: Visitech
• Địa chỉ: 730/1/2/7C Hương Lộ 2, Phường Bình Trị Đông A, Quận Bình Tân, Tp.HCM