IMNV onestep RT-PCR Visikit FAPA-11

Danh mục: Thương Hiệu:

Chia sẻ

IMNV là bệnh gì?

Bệnh gây ra do vi rút  IMNV (Infectious myonecrosis virus) thuộc họ Totiviridae , đây là một loại vi rút mang vật liệu di truyền là ARN ở tôm.

IMNV gây ra tỷ lệ tử vong đáng kể trong quần thể tôm thẻ chân trắng từ 40– 70% tôm nhiễm bệnh. Mô đích của nhiễm trùng IMNV là cơ vân (cơ xương, và ít gặp hơn ở cơ tim). Tôm bị nhiễm IMNV tập trung vào các khu vực hoại tử trắng ở cơ vân, đặc biệt là ở các phần bụng và đuôi,  gây hoại tử cơ vận động xuất hiện một vài vùng cơ bị đục, biến màu. 

Bệnh do vi rút gây ra sẽ lây theo chiều ngang (tôm khỏe sang tôm bệnh thông qua môi trường hoặc qua đường tiêu hóa của mô bị nhiễm bệnh thông qua việc ăn thịt tôm bị bệnh và chết) hoặc chiều dọc (từ tôm bố mẹ truyền cho tôm giống).

Với mức độ phổ biến cao, phân bố rộng và khả năng gây thiệt hại kinh tế đáng kể trong ngành nuôi tôm, vì vậy việc nghiên cứu và phát hiện kịp thời vi rút IMNV là rất quan trọng. Đặc biệt trong thời điểm chưa có thuốc đặc hiệu điều trị và nuôi cấy dòng vi rút này rất khó khăn thì việc sàng lọc phát hiện sớm bệnh sẽ giảm thiểu được tối đa thiệt hại kinh tế.

Loài cảm nhiễm

 Virus IMNV lây nhiễm trên tôm thẻ trắng (Penaeus vannamei) và tôm sú (P. monodon), tôm sú nâu (Penaeus esculentus), tôm bạc thẻ (P. merguiensis).

Phương thức lây truyền

IMNV lây truyền theo cả chiều ngang và chiều dọc. 

IMNV truyền qua đường tiêu hóa của mô bị nhiễm bệnh thông qua việc ăn thịt tôm bị bệnh và chết. 

IMNV đã được phát hiện trong trứng và buồng trứng của tôm mẹ bị nhiễm bệnh điều này cho thấy có sự lây truyền từ mẹ sang con 

Công dụng của công cụ chẩn đoán nhanh bệnh  IMNV

Kiểm soát tôm giống, phát hiện sớm bệnh IMNV trên tôm giống để đưa ra pháp đồ điều trị

Sàng lọc thức ăn cho tôm bố mẹ

Kiểm soát bệnh của ao nuôi, nguồn nước cần được kiểm tra, lấy mẫu nhằm chẩn đoán bệnh IMNV trên tôm định kỳ, thường xuyên. 

Kiểm tra tôm thành phẩm định kỳ theo từng giai đoạn trong khu vực nuôi trồng.

Hiện nay có rất nhiều phương pháp kiểm tra sự có mặt của virus gây bệnh IMNV như: các phương pháp phân lập và thử nghiệm sinh hóa truyền thống, các loại kit test nhanh (**),… Các phương pháp này không cần đầu tư các trang thiết bị cao cấp tuy nhiên kết quả cho độ nhạy và độ đặc hiệu không cao chỉ phù hợp cho các hộ nuôi trồng nhỏ lẻ. Đối với một số nhà máy, trung tâm kiểm nghiệm, kết quả kiểm nghiệm yêu cầu có độ tin cậy cao, để tránh hạn chế gây thiệt hại lớn nhất. Phương pháp tối ưu nhất là kiểm tra sự có mặt của IHHNV bằng phương pháp phân tử (PCR -Realtime PCR) mà Visitech sẽ giới thiệu ở bên dưới.

IMNV OneStep RT- PCR Visikit

Để có thể giải quyết các vấn đề về độ đặc hiệu chúng ta có thể sử dụng phương pháp PCR để kiểm tra sự hiện diện của virus gây bệnh IMNV trên mẫu tôm. IMNV RT- PCR Visikit được sử dụng phổ biến trong phương pháp này mang lại giá trị thử nghiệm đạt độ nhạy và độ đặc hiệu cao trong phát hiện virus gây bệnh IMNV.  Bên cạnh các ưu điểm của phương pháp PCR sử dụng bộ kit IMNV RT- PCR Visikit cũng đòi hỏi các phòng thử nghiệm phải trang bị các phòng thử nghiệm đạt độ an toàn và các thiết bị như máy PCR, máy ly tâm, tủ âm sâu,… và đội ngũ kỹ thuật viên được đào tạo chuyên nghiệp. 

Visitech sẽ giúp bạn giải quyết tất cả các vấn đề trên để mang lại hiệu quả công việc và lợi nhuận tốt nhất. Chúng tôi sẽ lựa chọn cho bạn những thiết bị tốt nhất phù hợp với yêu cầu của bạn. 

Phương pháp này có thể sử dụng cho các phòng thí nghiệm nhỏ, các công ty, doanh nghiệp yêu cầu kiểm nghiệm, kiểm soát sự hiện diện của virus gây bệnh IMNV trong nuôi trồng tôm. 

Điều kiện lưu trữ

  -200C

Tên sản phẩm

IMNV OneStep RT-PCR Visikit

Mã sản phẩm

FAPA-11

Nhà sản xuất

Visitech- Việt Nam

Hạn sử dụng

12 tháng kể từ ngày sản xuất

Thành phần bộ kit

Thành phần Quy cách
50 test
IMNV PCR mix 64×20µL
Chứng dương IMNV 1×100 µL
Chứng âm 1x1mL

Hướng dẫn sử dụng

Quy trình tách chiết DNA/RNA 

Quy trình tách thủ công: sẽ được áp dụng cho các phòng kiểm nghiệm nhỏ và số lượng mẫu tương đối ít. Các bạn có thể sử dụng các phương pháp thu hồi DNA bằng các hóa chất như Phenol, Chloroform, Isopropanol,…hoặc sử dụng bộ tách chiết thô (Crude DNA Extraction ViSiKit) (**) hoặc bộ tách chiết bằng phương pháp cột Silica (Highpure Viral Extraction ViSiKit) (**)

Quy trình tách chiết tự động: Được áp dụng phù hợp cho các phòng kiểm nghiệm độc lập, công ty thực phẩm, doanh nghiệp sản xuất có số lượng mẫu lớn, đòi hỏi thời gian kiểm nghiệm nhanh. Visitech hiện đang cung cấp các loại hóa chất tự động trên đa dạng nhiều loại máy khác nhau như máy tách chiết DNA/ RNA tự động Gene Pure Plus (NPA-32) (**)của hãng Bioer, máy tách chiết tự động của hãng Thermo Kingfisher, máy tách chiết tự động của hãng TANbead… Đối với mỗi dòng máy tách chiết tự động sẽ có những đặc điểm khác nhau như số lượng mẫu tách cho mỗi lượt, thời gian thực hiện, các vật tư tiêu hao dành riêng cho từng máy,.. Từ đó chúng tôi sẽ chọn Kit phù hợp cho nhu cầu của từng đơn vị. Ví dụ đối với máy NPA-32 của hãng  Bioer chúng tôi có Kit tách chiết: Maga Genomic DNA/RNA Extraction VISIKIT (MGEKA-32.R.B) (**)

Để biết thêm chi tiết cho các thiết bị liên quan đến tách chiết DNA/RNA tự động các bạn có thể liên hệ Visitech qua số hotline hoặc email (**)

Thực hiện phản ứng PCR

  • Đầu tiên bạn kiểm tra số lượng mẫu, lấy số lượng cần thiết ống IMNV RT-PCR mix sau đó rã đông ống ở nhiệt độ phòng (15–25°C), spindown để toàn bộ chất lỏng di chuyển xuống đáy.
  • Bạn hãy mở nắp lần lượt và hút 5 µL mẫu cho vào các tube IMNV RT-PCR mix đã chuẩn bị ở trên  theo thứ tự: Chứng âm, chứng âm tách chiết, DNA mẫu và cuối cùng là mẫu  đối chứng dương  sau đó đóng nắp tube để hạn chế việc nhiễm chéo tốt nhất.
  • Mỗi lần chạy nên có ít nhất một chứng âm tách chiết,một  chứng dương và một chứng âm PCR để có thể kiểm soát kết quả test.
  • Sau khi bạn thực hiện các bước trên bạn hãy kiểm tra lại nắp PCR và spindown để chất lỏng di chuyển xuống đáy trước khi đặt vào máy. 
  • Cài đặt chương trình nhiệt như bên dưới:
1 chu kỳ 45oC 15 phút
1 chu kỳ 95oC 3 phút
45 chu kỳ 95oC 10 giây
60oC 10 giây
72oC 20 giây
1 chu kỳ 72oC 3 phút


Phân tích kết quả

Điện di

Bộ kit điện di Agarose Electrophoresis (AE-01) được khuyến cáo sử dụng cho điện di sản phẩm PCR. Quy trình thực hiện xem hướng dẫn của bộ Agarose Electrophoresis (AE-01). (**)

Bảng tóm tắt phân tích kết quả

    • Sau khi điện di hoàn tất, kết quả điện di được đọc trên bàn đèn UV hoặc máy đọc gel sử dụng đèn UV
    • Thang DNA 100bp sử dụng gồm 10 vạch từ 100 đến 1000 bp
    • Kết quả dự kiến như sau:
    • + Mẫu dương tính với IMNV: hiện băng với kích thước 328 bp (ngay trên vạch 300bp của Thang 100 bp)
    • + Chứng nội: hiện băng với kích thước 102 bp
    • Chú ý: Một số trường hợp xuất hiện vạch mờ phía dưới vạch 100 bp là do mồi thừa sau phản ứng.
  • Trong chứng dương đã bao gồm sẵn DNA tôm và IMNV
STT IMNV (328 bp) IC (102 bp) Kết luận
1 + -/+ Mẫu dương tính IMNV
2 – + Mẫu âm tính IMNV
3 – – Không thể kết luận


Xử lý sự cố

Đối với bất kì sự cố nào khi sử dụng sản phẩm của Visitech chúng tôi sẽ hỗ trợ bạn giải quyết một cách chuyên nghiệp nhất. Dưới đây là một số lỗi thường gặp và cách khắc phục:

Sự cố Nguyên nhân Khắc phục
Không xuất hiện vạch nào ở tất cả các giếng, kể cả chứng dương . Cài đặt sai chương trình PCR

  1. Thiết bị PCR gặp sự cố
  2. Hóa chất của kit không được bảo quản theo đúng chỉ định
1. Kiểm tra lại chương trình chạy PCR

2. Kiểm tra lại hoạt động của thiết bị PCR

3. Kiểm tra lại điều kiện bảo quản và hạn sử dụng của kit

Chứng dương bình thường mẫu xét nghiệm không cho vạch DNA, kể cả vạch của đối chứng nội
  1. Hàm lượng DNA thu được quá cao
  2. Có chất ức chế trong mẫu
  1. Pha loãng 10 lần dịch DNA và thực hiện lại phản ứng PCR
  2. Bổ sung một lượng nhỏ chứng dương mục tiêu vào mẫu tách chiết. Nếu kết quả vẫn âm tính thì kết luận có chất ức chế trong mẫu. Tiến hành tách chiết lại hoặc xử lý như cách 1
Xuất hiện vạch DNA trong chứng âm, chứng âm tách chiết 1. Micro pipet bị nhiễm DNA mục tiêu hoặc sản phẩm PCR

2. Hóa chất PCR bị nhiễm DNA mục tiêu hoặc sản phẩm PCR

3. Môi trường làm việc bị nhiễm DNA mục tiêu hoặc sản phẩm PCR

  1. Vệ sinh hoặc thay micropipet mới; sử dụng filter tip
  2. Sử dụng hóa chất PCR khác
  3. Yêu cầu bộ phận kỹ thuật đến vệ sinh môi trường làm việc.


Visitech – Nhà sản xuất Kit PCR chất lượng cao

Ngoài việc phát hiện bệnh IMNV trên tôm , Visitech chúng tôi còn cung cấp thêm các kit PCR phát hiện các loài vi sinh gây bệnh thủy sản khác theo link danh mục sau: 

https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/kit-test/kit-pcr/

Khi truy cập vào link này, chúng ta sẽ thấy thêm nhiều loại Kit dùng để phát hiện bệnh trên thủy sản như: Kit PCR MBV để phát hiện Monodon Baculovirus ở trên tôm. Khi bị bệnh này Tôm sẽ có biểu hiện lơ mơ, biếng ăn, có màu sẫm và có nhiều vết như bị bám bẩn trên bề mặt vỏ tôm; Kit PCR  WSSV để phát hiện bệnh đốm trắng trên tôm. Khi bị nhiễm virus này gây gây ra các đốm trắng nhỏ xuất hiện trên bề mặt bên trong của lớp biểu bì, vỏ và phần phụ (**); Kit PCR YHV (Yellow head virus)  để phát hiện YHV gây bệnh đầu vàng trên tôm và còn rất nhiều Kit phát hiện bệnh trên thủy sản khác. Các bạn có thể truy cập link bên dưới:

https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/kit-test/kit-pcr/?filter=dau-nhua-a   

Bên cạnh đó, Visitech chúng tôi cũng đã có danh mục sản phẩm Kit Realtime PCR phát hiện bệnh trên thủy sản gây bệnh tương tự Kit PCR. Tuy nhiên, Realtime PCR là kỹ thuật được cải tiến từ PCR. Nó khắc phục được những khuyết điểm mà PCR chưa làm được. Thông tin chi tiết xin truy cập Link:  

https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/kit-test/kit-real-time-pcr/  

Đặc biệt, ngoài việc cung cấp hóa chất cho phát hiện bệnh, Visitech cũng đem đến cho Qúy khách hàng một giải pháp tổng thể và đầy đủ về các trang thiết bị, vật tư tiêu hao cho một phòng thử nghiệm PCR, realtime PCR đạt chuẩn. Mời Qúy khách hàng tham khảo Link bên dưới: https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/sinh-hoc-phan-tu/ 

Tại sao nên chọn Visikit

Visitech tự hào là đơn vị tư nhân với nhiều năm kinh nghiệm trong nhiều lĩnh vực khác nhau, trong đó lĩnh vực sinh học phân tử là một trong những thế mạnh của chúng tôi. 

Chúng tôi cam kết đưa đến tay khách hàng sản phẩm đạt chất lượng theo tiêu chuẩn ISO 13485 năm 2016, là tiêu chuẩn ISO về hệ thống quản lý an toàn cho sản phẩm.

Bên cạnh đó, Visitech có đội ngũ R & D có chuyên môn cao và giàu kinh nghiệm, luôn nghiên cứu, trau dồi để chọn lọc và đưa ra sản phẩm tốt nhất đến tay người sử dụng. 

Đặc biệt, công ty chúng tôi có hàng DEMO để chạy thử nghiệm nhằm chứng minh chất lượng đối với những khách hàng có nhu cầu. Kỹ sư chúng tôi sẽ trực tiếp hướng dẫn và training cho tới khi thành thạo.

Thông tin liên hệ Visitech 

Trên đây là những thông tin chi tiết về Kit PCR phát hiện IMNV của Visitech mà chúng tôi biên soạn. Hy vọng những chia sẻ trên sẽ mang đến cho Quý Khách hàng những thông tin bổ ích. 

Visitech chúng tôi tự tin và tự hào với đội ngũ nhân viên có nhiều năm kinh nghiệm về lĩnh vực sinh học phân tử, đặc biệt là các xét nghiệm liên quan đến phát hiện virus, vi khuẩn trong thực phẩm, thủy sản, thú y…Chúng tôi luôn trên tinh thần sẵn sàng được tư vấn chi tiết, giải đáp thắc mắc và hỗ trợ mọi ý kiến của Qúy khách hàng. Hãy liên hệ ngay với chúng tôi theo địa chỉ bên dưới:

Đánh giá

Chưa có đánh giá nào.

Hãy là người đầu tiên nhận xét “IMNV onestep RT-PCR Visikit FAPA-11”

Chưa có thông tin
Chưa có thông tin
Chưa có thông tin
Hotline: 0919.112.141
Zalo
Gọi điện ngay