WSSV là bệnh gì?
Virút gây hội chứng đốm trắng WSSV (White Spot Syndrome Virus) là một loại vi rút gây bệnh cho tôm có độc lực mạnh và khả năng phát tán mầm bệnh nhanh chóng. Virus hội chứng đốm trắng (WSSV) là một loại virus sợi đôi DNA thuộc họ Nimaviridae ảnh hưởng đến tất cả loại tôm. Loại vi rút này dẫn đến tỷ lệ chết cao ở các trang trại nuôi tôm trên toàn thế giới và rất dễ lây lan.
EMS gây bệnh gì?
Bệnh tôm chết sớm (Early Mortality Syndrome – EMS) cũng còn gọi là chứng hoại tử gan – tụy cấp (Acute Hepatopancreatic Necrosis Syndrome – AHPNS) là bệnh thiệt hại nghiêm trọng cho tôm nuôi tại Việt Nam (cả tôm thẻ chân trắng lẩn tôm sú) dù là nuôi thâm canh hoặc bán thâm canh. Được cho là do vi khuẩn Vibrio parahaemolyticus cư trú trong đường tiêu hóa của tôm gây ra, nhưng theo một cơ chế khá phức tạp. Bệnh gây thiệt hại lớn với tỉ lệ chết tương đối cao.
EHP gây bệnh gì?
Bệnh EHP trên tôm do ký sinh trùng Enterocytozoon hepatopenaei (EHP) gây ra. Ký sinh trùng này ký sinh trong ống gan tụy của tôm và làm tôm không hấp thụ chất dinh dưỡng dẫn đến tôm chậm lớn. Các nhà nghiên cứu cũng phát hiện ra rằng EHP không phải là mầm bệnh lạ mà là một loài đặc hữu của Australia. Sau đó, người ta phát hiện rằng EHP cũng có thể lây nhiễm vào tôm thẻ chân trắng Penaeus vannamei.
Bệnh vi bào tử trùng EHP không gây chết tôm hàng loạt, biểu hiện của bệnh cũng không quá rõ ràng nên không được người nuôi quá chú ý. Bệnh khiến tôm chậm lớn nên sản lượng khi thu hoạch sẽ bị giảm rất nhiều dẫn đến thiệt hại về kinh tế không nhỏ cho bà con.
Trên đây đều là những bệnh gây thiệt hại lớn cho người nuôi trồng, vì vậy việc chẩn đoán nhanh các nguyên nhân gây bệnh sẽ giảm thiểu được mức thiệt hại lớn nhất.
Công dụng của công cụ chẩn đoán nhanh bệnh WSSV, EMS, EHP và Vibrio parahemolyticus
+ Kiểm soát tôm giống, phát hiện sớm bệnh WSSV, EMS, EHP và Vibrio parahemolyticus trên tôm giống để đưa ra pháp đồ điều trị
+ Sàng lọc thức ăn cho tôm bố mẹ
+ Kiểm soát bệnh của ao nuôi, nguồn nước cần được kiểm tra, lấy mẫu nhằm chẩn đoán bệnh WSSV, EMS, EHP và Vibrio parahemolyticus trên tôm định kỳ, thường xuyên.
+ Kiểm tra tôm thành phẩm định kỳ theo từng giai đoạn trong khu vực nuôi trồng.
+ Hiện nay có rất nhiều phương pháp kiểm tra sự có mặt của virus gây bệnh trên tôm như: các phương pháp phân lập và thử nghiệm sinh hóa truyền thống, các loại kit test nhanh (**),… Các phương pháp này không cần đầu tư các trang thiết bị cao cấp tuy nhiên kết quả cho độ nhạy và độ đặc hiệu không cao chỉ phù hợp cho các hộ nuôi trồng nhỏ lẻ. Đối với một số nhà máy, trung tâm kiểm nghiệm, kết quả kiểm nghiệm yêu cầu có độ tin cậy cao, để tránh hạn chế gây thiệt hại lớn nhất. Phương pháp tối ưu nhất là kiểm tra sự có mặt của HPV bằng phương pháp phân tử (PCR -Realtime PCR) mà Visitech sẽ giới thiệu ở bên dưới. :
WEEV PCR VISIKIT
Để có thể giải quyết các vấn đề về độ đặc hiệu chúng ta có thể sử dụng phương pháp PCR để kiểm tra sự hiện diện của các loài gây WSSV, EMS, EHP và Vibrio parahemolyticus trên mẫu tôm. WEEV PCR Visikit là bộ Kit được sử dụng phổ biến. Trong phương pháp này mang lại giá trị thử nghiệm đạt độ nhạy và độ đặc hiệu cao trong phát hiện các loài gây bệnh WSSV, EMS, EHP và Vibrio parahemolyticus. Bên cạnh các ưu điểm của phương pháp PCR sử dụng bộ kit WEEV PCR VISKIT cũng đòi hỏi các phòng thử nghiệm phải trang bị các phòng thử nghiệm đạt độ an toàn và các thiết bị như máy PCR, máy ly tâm, tủ âm sâu,… và đội ngũ kỹ thuật viên được đào tạo chuyên nghiệp.
Visitech sẽ giúp bạn giải quyết tất cả các vấn đề trên để mang lại hiệu quả công việc và lợi nhuận tốt nhất. Chúng tôi sẽ lựa chọn cho bạn những thiết bị tốt nhất phù hợp với yêu cầu của bạn.
Phương pháp này có thể sử dụng cho các phòng thí nghiệm nhỏ, các công ty, doanh nghiệp yêu cầu kiểm nghiệm, kiểm soát sự hiện diện của vi khuẩn gây bệnh WSSV, EMS, EHP và Vibrio parahemolyticus trong nuôi trồng tôm.
Điều kiện lưu trữ
-200C
Tên sản phẩm
WEEV PCR VISIKIT
Mã sản phẩm
FAPA- 14
Nhà sản xuất
Visitech- Việt Nam
Hạn sử dụng
12 tháng kể từ ngày sản xuất
Thành phần bộ kit
Thành phần | Quy cách |
50 test | |
WEEV PCR mix | 64×20µL |
Chứng dương WEEV | 1×100 µL |
Chứng âm | 1x1mL |
Hướng dẫn sử dụng
Quy trình tách chiết DNA/RNA
+ Quy trình tách thủ công: sẽ được áp dụng cho các phòng kiểm nghiệm nhỏ và số lượng mẫu tương đối ít. Các bạn có thể sử dụng các phương pháp thu hồi DNA bằng các hóa chất như Phenol, Chloroform, Isopropanol,…hoặc sử dụng bộ tách chiết thô (Crude DNA Extraction ViSiKit)(**) hoặc bộ tách chiết bằng phương pháp cột Silica (Highpure Viral Extraction ViSiKit) (**)
+ Quy trình tách tự động phù hợp cho các phòng kiểm nghiệm độc lập, công ty, doanh nghiệp sản xuất có số lượng mẫu lớn, yêu cầu thời gian kiểm nghiệm nhanh. Bộ Highpure viral extraction ViSiKit 50(HEKA-01) được khuyến cáo sử dụng cho tách chiết DNA/RNA vi rút từ mẫu tôm kết hợp với các loại máy tách chiết hạt từ như: Máy tách chiết DNA/ RNA tự động Gene Pure Plus (NPA-32) Bioer,… Đối với mỗi dòng máy tách chiết tự động sẽ có những đặc điểm khác nhau như số lượng mẫu tách cho mỗi lượt, thời gian thực hiện, các vật tư tiêu hao khác,.. Để biết thêm chi tiết cho các thiết bị liên quan đến tách chiết DNA/RNA tự động bạn có thể liên hệ VISITECH qua số hotline hoặc trang web […]
Thực hiện phản ứng PCR
- Đầu tiên bạn kiểm tra số lượng mẫu, lấy số lượng cần thiết ống WEEV PCR mix sau đó rã đông ống ở nhiệt độ phòng (15–25°C), spindown để toàn bộ chất lỏng di chuyển xuống đáy.
- Bạn hãy mở nắp lần lượt và hút 5 µL mẫu cho vào các tube WEEV PCR mix đã chuẩn bị ở trên theo thứ tự: Chứng âm, chứng âm tách chiết, DNA mẫu và cuối cùng là mẫu đối chứng dương sau đó đóng nắp tube để hạn chế việc nhiễm chéo tốt nhất.
- Mỗi lần chạy nên có ít nhất một chứng âm tách chiết,một chứng dương và một chứng âm PCR để có thể kiểm soát kết quả test.
- Sau khi bạn thực hiện các bước trên bạn hãy kiểm tra lại nắp PCR và spindown để chất lỏng di chuyển xuống đáy trước khi đặt vào máy.
- Cài đặt chương trình nhiệt như bên dưới:
1 chu kỳ | 95oC | 3 phút |
45 chu kỳ | 95oC | 10 giây |
60oC | 20 giây | |
72oC | 40 giây | |
1 chu kỳ | 72oC | 3 phút |
Điện di
Bộ kit điện di PCR/ Gel DNA Purification ViSiKit 50 (PUKA-01) được khuyến cáo sử dụng cho điện di sản phẩm PCR sử dụng chung với bộ FAPA-13 WSSV/MBV PCR Visikit. Quy trình thực hiện xem hướng dẫn của bộ PCR/ Gel DNA Purification ViSiKit 50 (PUKA-01).
Bảng tóm tắt phân tích kết quả
- Sau khi điện di hoàn tất, kết quả điện di được đọc trên bàn đèn UV hoặc máy đọc gel sử dụng đèn UV
- Thang DNA 100bp sử dụng gồm 10 vạch từ 100 đến 1000 bp
- Kết quả dự kiến như sau:
Mẫu dương tính với WSSV: xuất hiện băng kích thước 526bp (giữa vạch 500bp và 600 bp)
+ Mẫu dướng tính với Vibrio parahemolyticus: xuất hiện băng với kích thước 438 bp (giữa vạch 400bp và 600 bp)
+ Mẫu dương tính với EMS: xuất hiện băng với kích thước 316bp (giữa vạch 200bp và 300bp)
+ Mẫu dương tính với EHP: xuất hiện băng với kích thước 177bp (gần ngay dưới 200bp)
+ Chứng nội: xuất hiện băng với kích thước 102bp
Chú ý: Vạch mờ phía dưới vạch 100bp là vạch mồi còn thừa lại sau phản ứng
Trong chứng dương bao gồm sẵn DNA tôm, WSSV, EMS, EHP và Vibrio parahemolyticus
STT | WSSV (526bp) | V.parahemolyticus (438bp) | EMS (316b) | EHP (177bp) | IC (102 bp) | Kết luận |
1 | + | + | + | + | -/+ | Mẫu dương tính với cả WSSV/EMS/EHP, V.parahemolyticus |
2 | + | – | – | – | + | Mẫu dương tính WSSV |
3 | – | + | – | – | + | Mẫu dương tính với V.parahemolyticus |
4 | – | – | + | – | + | Mẫu dương tính EMS |
5 | – | – | – | + | + | Mẫu dương tính EHP |
6 | – | – | – | – | + | Mẫu âm tính |
– | – | – | – | – | Không thể kết luận |
Xử lý sự cố
Đối với bất kì sự cố nào khi sử dụng sản phẩm của VISITECH chúng tôi sẽ hỗ trợ bạn giải quyết một cách chuyên nghiệp nhất. Dưới đây là một số lỗi thường gặp và cách khắc phục:
Sự cố | Nguyên nhân | Khắc phục |
Không xuất hiện vạch nào ở tất cả các giếng, kể cả chứng dương | . Cài đặt sai chương trình PCR
|
1. Kiểm tra lại chương trình chạy PCR
2. Kiểm tra lại hoạt động của thiết bị PCR 3. Kiểm tra lại điều kiện bảo quản và hạn sử dụng của kit |
Chứng dương bình thường mẫu xét nghiệm không cho vạch DNA, kể cả vạch của đối chứng nội |
|
|
Xuất hiện vạch DNA trong chứng âm, chứng âm tách chiết | 1. Micro pipet bị nhiễm DNA mục tiêu hoặc sản phẩm PCR
2. Hóa chất PCR bị nhiễm DNA mục tiêu hoặc sản phẩm PCR 3. Môi trường làm việc bị nhiễm DNA mục tiêu hoặc sản phẩm PCR |
|
Tại sao nên chọn Visikit
Visitech tự hào là đơn vị tư nhân với nhiều năm kinh nghiệm trong nhiều lĩnh vực khác nhau, trong đó lĩnh vực sinh học phân tử là một trong những thế mạnh của chúng tôi.
Chúng tôi cam kết đưa đến tay khách hàng sản phẩm đạt chất lượng theo tiêu chuẩn ISO 13485 năm 2016, là tiêu chuẩn ISO về hệ thống quản lý an toàn cho sản phẩm.
Bên cạnh đó, Visitech có đội ngũ R & D có chuyên môn cao và giàu kinh nghiệm, luôn nghiên cứu, trau dồi để chọn lọc và đưa ra sản phẩm tốt nhất đến tay người sử dụng.
Đặc biệt, công ty chúng tôi có hàng DEMO để chạy thử nghiệm nhằm chứng minh chất lượng đối với những khách hàng có nhu cầu. Kỹ sư chúng tôi sẽ trực tiếp hướng dẫn và training cho tới khi thành thạo.
Visitech – Nhà sản xuất Kit PCR chất lượng cao
Ngoài việc phát hiện bệnh trên tôm, Visitech chúng tôi còn cung cấp thêm các kit PCR phát hiện các loài vi sinh gây bệnh thủy sản khác theo link danh mục sau:
https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/kit-test/kit-pcr/
Khi truy cập vào link này, chúng ta sẽ thấy thêm nhiều loại Kit dùng để phát hiện bệnh trên thủy sản như: Kit PCR MBV để phát hiện Monodon Baculovirus ở trên tôm. Khi bị bệnh này Tôm sẽ có biểu hiện lơ mơ, biếng ăn, có màu sẫm và có nhiều vết như bị bám bẩn trên bề mặt vỏ tôm; Kit PCR WSSV để phát hiện bệnh đốm trắng trên tôm. Khi bị nhiễm virus này gây gây ra các đốm trắng nhỏ xuất hiện trên bề mặt bên trong của lớp biểu bì, vỏ và phần phụ(**); Kit PCR YHV (Yellow head virus) để phát hiện YHV gây bệnh đầu vàng trên tôm và còn rất nhiều Kit phát hiện bệnh trên thủy sản khác. Các bạn có thể truy cập link bên dưới:
https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/kit-test/kit-pcr/
Bên cạnh đó, Visitech chúng tôi cũng đã có danh mục sản phẩm Kit Realtime PCR phát hiện bệnh trên thủy sản gây bệnh tương tự Kit PCR. Tuy nhiên, Realtime PCR là kỹ thuật được cải tiến từ PCR. Nó khắc phục được những khuyết điểm mà PCR chưa làm được. Thông tin chi tiết xin truy cập Link:
https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/kit-test/kit-real-time-pcr/
Đặc biệt, ngoài việc cung cấp hóa chất cho phát hiện bệnh, Visitech cũng đem đến cho Qúy khách hàng một giải pháp tổng thể và đầy đủ về các trang thiết bị, vật tư tiêu hao cho một phòng thử nghiệm PCR, realtime PCR đạt chuẩn. Mời Qúy khách hàng tham khảo Link bên dưới: https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/sinh-hoc-phan-tu/
Thông tin liên hệ Visitech
Trên đây là những thông tin chi tiết về Kit PCR phát hiện đồng thời WSSV/EHP/EMS/ V.parahemolyticus của Visitech mà chúng tôi biên soạn. Hy vọng những chia sẻ trên sẽ mang đến cho Quý Khách hàng những thông tin bổ ích.
Visitech chúng tôi tự tin và tự hào với đội ngũ nhân viên có nhiều năm kinh nghiệm về lĩnh vực sinh học phân tử, đặc biệt là các xét nghiệm liên quan đến phát hiện virus, vi khuẩn trong thực phẩm, thủy sản, thú y…Chúng tôi luôn trên tinh thần sẵn sàng được tư vấn chi tiết, giải đáp thắc mắc và hỗ trợ mọi ý kiến của Qúy khách hàng. Hãy liên hệ ngay với chúng tôi theo địa chỉ bên dưới:
- Email: info@visitech.vn
- Hotline: 0919112141
- Zalo: 0919112141
- Website: https://visitech.vn/
- Map: Công ty TNHH Khoa Học Kỹ Thuật Việt Sinh
- Kênh Youtube: Visitech
- Fanpage: Visitech
- Địa chỉ: 730/1/2/7C Hương Lộ 2, Phường Bình Trị Đông A, Quận Bình Tân, Tp.HCM
Đánh giá
Chưa có đánh giá nào.