Môi trường định danh sinh hóa API 50 CHL Medium

API 50 CHL Medium là môi trường xét nghiệm sinh hóa chuyên dụng từ bioMérieux, được phát triển để sử dụng cùng thanh API 50 CH (REF 50300) nhằm định danh vi khuẩn axit lactic, đặc biệt là Lactobacillus và các chi liên quan.

Sản phẩm tối ưu hóa quá trình nghiên cứu khả năng lên men 50 carbohydrate, từ glucose, lactose đến inulin, thông qua các phản ứng sinh hóa được phát hiện bằng thay đổi màu sắc. Với tính chuẩn hóa và độ chính xác cao, API 50 CHL Medium là lựa chọn hàng đầu cho các phòng thí nghiệm cần xác định nhanh vi khuẩn trong thực phẩm lên men, y tế, hoặc nghiên cứu vi sinh.

Tổng hợp thông tin sản phẩm

• Tên sản phẩm: API 50 CHL Medium

• Mã sản phẩm: REF 50410

• Nhà sản xuất: bioMérieux SA

• Ứng dụng chính: Kết hợp với thanh API 50 CH để định danh Lactobacillus và vi khuẩn axit lactic.

• Thành phần bộ kit: Ống API 50 CHL Medium (thường 5 mL, số lượng tùy theo đóng gói).

• Vật tư cần thêm: Thanh API 50 CH (REF 50300), API Suspension Medium (2 mL và 5 mL), dầu khoáng (Ref. 70100), dung dịch McFarland (Ref. 70900), DENSIMAT (Ref. 99234), pipet, tăm bông.

• Phần mềm phân tích: Phần mềm định danh bioMérieux.

• Điều kiện bảo quản: 2–8°C.

Đặc trưng của API 50 CHL Medium

API 50 CHL Medium được thiết kế chuyên biệt cho vi khuẩn axit lactic, đặc biệt là Lactobacillus, với thành phần dinh dưỡng tối ưu hỗ trợ lên men kỵ khí. Môi trường chứa các chỉ thị pH nhạy, cho phép phát hiện sự tạo axit qua thay đổi màu sắc (vàng = dương tính, đen ở giếng esculin = dương tính). Khi kết hợp với thanh API 50 CH, sản phẩm nghiên cứu 50 carbohydrate, từ đơn giản (glucose) đến phức tạp (raffinose), tạo hồ sơ sinh hóa chi tiết.

Quy trình chuẩn hóa trong 48 giờ, kết hợp phần mềm định danh, mang lại độ chính xác cao và thao tác đơn giản, phù hợp cho cả kỹ thuật viên mới và chuyên gia (bioMérieux, 2002).

Đối tượng ứng dụng

API 50 CHL Medium là công cụ thiết yếu trong nhiều lĩnh vực vi sinh.

Trong ngành thực phẩm, môi trường này hỗ trợ kiểm soát chất lượng sản phẩm lên men như sữa chua, phô mai, và dưa muối, bằng cách định danh Lactobacillus – vi khuẩn chủ đạo trong quá trình lên men.

Trong y tế, sản phẩm giúp phát hiện Lactobacillus gây nhiễm trùng cơ hội (như ở bệnh nhân suy giảm miễn dịch) hoặc đánh giá hệ vi sinh đường ruột.

Trong nghiên cứu, API 50 CHL Medium được sử dụng để phân loại vi khuẩn axit lactic từ môi trường tự nhiên (đất, thực vật) hoặc phân tích vai trò của Lactobacillus trong công nghệ sinh học.

Tính dễ sử dụng và kết quả đáng tin cậy khiến sản phẩm phù hợp cho các phòng thí nghiệm ở mọi quy mô.

Phân tích vi khuẩn mục tiêu

API 50 CHL Medium nhắm đến Lactobacillus và các vi khuẩn axit lactic liên quan, thuộc nhóm Gram dương, kỵ khí tùy tiện hoặc bắt buộc, không sinh bào tử, catalase âm.

Lactobacillus

Lactobacillus là vi khuẩn hình que hoặc cầu, sống trong thực phẩm lên men (sữa chua, phô mai), hệ tiêu hóa người, hoặc môi trường thực vật. Chúng phát triển tốt trên môi trường MRS ở 30–37°C, tạo axit lactic qua lên men carbohydrate. API 50 CHL Medium phát hiện khả năng lên men glucose, lactose, saccharose, mannitol, và esculin (giếng 25). L. paracasei và L. casei là các loài quan trọng trong thực phẩm, nhưng L. rhamnosus có thể gây nhiễm trùng ở bệnh nhân ghép tạng.

Một ví dụ, mẫu sữa chua từ nhà máy Vinamilk cho khuẩn lạc trắng trên MRS agar, lên men GLU, LAC, SAC, esculin dương (giếng 25 đen), định danh L. paracasei qua phần mềm bioMérieux.

Vi khuẩn axit lactic liên quan

Các chi như Leuconostoc, Pediococcus, và Lactococcus cũng được định danh bằng API 50 CHL Medium. Chúng có đặc điểm sinh hóa tương tự Lactobacillus, với khả năng lên men đa dạng.

Ví dụ, Leuconostoc mesenteroides trong dưa muối tạo axit lactic và dextran, được xác định qua lên men glucose, fructose, và mannose. Mẫu dưa muối từ chợ Đà Nẵng cho khuẩn lạc nhỏ, GLU, FRU dương, định danh Leuconostoc mesenteroides (bioMérieux, 2002).

Quy trình sử dụng API 50 CHL Medium

Lựa chọn và chuẩn bị khuẩn lạc

Phân lập vi khuẩn trên môi trường MRS agar, ủ ở 30°C hoặc 37°C (tùy loài) trong 24 giờ, điều kiện kỵ khí. Kiểm tra khuẩn lạc thuần khiết, xác nhận Gram dương, catalase âm, không sinh bào tử, phát triển tốt trên MRS. Nếu sử dụng chủng đông khô, nuôi trong MRS broth trước khi chuyển sang MRS agar.

Pha chế huyền phù vi khuẩn

Thu toàn bộ khuẩn lạc bằng tăm bông vô trùng, nhũ hóa trong 2 mL API Suspension Medium để tạo huyền phù đặc (S). Lấy một phần huyền phù S, pha vào 5 mL API Suspension Medium để đạt độ đục 2 McFarland (đo bằng DENSIMAT), ghi lại số giọt (n) của huyền phù S đã sử dụng. Mở ống API 50 CHL Medium, thêm 2n giọt huyền phù S, trộn đều. Huyền phù này phải được sử dụng ngay để đảm bảo vi khuẩn ở trạng thái tối ưu.

Cấy mẫu vào thanh API 50 CH

Chuẩn bị hộp ủ với 5 mL nước cất để tạo độ ẩm, đặt thanh API 50 CH (5 đoạn 0–49) vào khay, ghi mã mẫu. Pipet huyền phù từ ống API 50 CHL Medium vào 50 giếng của thanh API 50 CH, chỉ đổ vào phần giếng, tránh tạo bọt. Thêm dầu khoáng vào mỗi giếng để tạo điều kiện kỵ khí, đảm bảo bề mặt lồi. Đóng nắp, ủ ở 29°C ± 2°C hoặc 36°C ± 2°C trong 48 giờ ± 6 giờ, điều kiện kỵ khí.

Đọc và phân tích kết quả

Sau 48 giờ, đọc màu các giếng: vàng = dương tính (lên men), đen ở giếng 25 (esculin) = dương tính; màu đỏ = âm tính. Ghi kết quả (+, -, ?) trên bảng kết quả, tạo hồ sơ sinh hóa. Nhập hồ sơ vào phần mềm định danh bioMérieux để xác định loài. Nếu kết quả không rõ ràng (ví dụ, L. paracasei/L. casei), thực hiện xét nghiệm bổ sung như phân tích hình thái hoặc lên men đặc hiệu.

Sử dụng môi trường MRS agar để đảm bảo vi khuẩn phát triển tốt, tránh môi trường không phù hợp gây âm tính giả. Độ đục huyền phù phải đạt chính xác 2 McFarland, vì sai lệch làm giảm tín hiệu lên men. Thêm dầu khoáng cẩn thận để duy trì điều kiện kỵ khí, tránh làm tràn giếng. Bảo quản API 50 CHL Medium và thanh API 50 CH ở 2–8°C, kiểm tra thanh không bị hư hỏng (giếng bóp méo, túi chống ẩm rách). Kiểm tra chất lượng bằng Lactobacillus paracasei ATCC BAA-52 để xác nhận hiệu suất. Xử lý phế thải thí nghiệm theo quy định địa phương để đảm bảo an toàn sinh học

API 50 CHL Medium là giải pháp tối ưu để định danh Lactobacillus và vi khuẩn axit lactic, với khả năng nghiên cứu 50 carbohydrate trong 48 giờ. Sản phẩm nổi bật nhờ tính chuyên biệt, quy trình chuẩn hóa, và kết quả chính xác, đáp ứng nhu cầu của phòng thí nghiệm thực phẩm , y tế , và nghiên cứu.  Với sự hỗ trợ của phần mềm bioMérieux, API 50 CHL Medium là công cụ không thể thiếu cho các chuyên gia vi sinh, đảm bảo hiệu quả và độ tin cậy trong phân tích.

Để tìm hiểu và trao đổi thêm về các thông tin liên quan đến các sản phẩm liên quan đến các loại kit định danh vi khuẩn khác các bạn có thể liên hệ chúng tôi thông qua:

• Email: info@visitech.vn – pkd@visitech.vn
• Hotline: 0919.112.141 – 0916.07.23.23
• Website: https://visitech.vn/
• Địa chỉ: 539 Lũy Bán Bích, P. Phú Thạnh, Q. Tân Phú, Tp.HCM
• Chỉ đường: Công ty TNHH Khoa Học Kỹ Thuật Việt Sinh