ASFV gây bệnh gì?

Bệnh dịch tả lợn châu Phi (ASF) là một bệnh truyền nhiễm rất cao ở lợn do vi rút bệnh dịch tả lợn châu Phi (African swine fever virus, viết tắt ASFV) gây ra. ASFV là vi rút duy nhất được biết đến với bộ gen DNA sợi kép.

Bệnh có thể lây lan nhanh và xảy ra ở mọi loài lợn, mọi lứa tuổi của lợn và tỉ lệ chết gần như 100% với lợn nhiễm bệnh. Một số chủng phân lập có thể gây ra cái chết của động vật nhanh, trong vòng một tuần sau khi bị nhiễm bệnh.

Bệnh gây xuất huyết, Virus gây bệnh dịch tả lợn có trong máu, cơ quan, dịch bài tiết từ lợn nhiễm bệnh dịch tả Châu Phi.

Virus dịch tả lợn có sức đề kháng cao, có khả năng chịu được nhiệt độ thấp, trong thịt lợn sống hoặc ở nhiệt độ không cao virus có thể tồn tại được 3-6 tháng, virus bị chết ở 70 độ C. Chính vì sức đề kháng của virus này cao nên khả năng lây lan trên phạm vi rộng và kéo dài dịch tả lợn .

Bệnh lây nhiễm từ qua đường hô hấp và đường tiêu hóa, Thông qua việc tiếp xúc trực tiếp hoặc gián tiếp với các vật nhiễm virus như: lợn nhiễm bệnh, chuồng trại, phương tiện vận chuyển, dụng cụ, đồ dùng, quần áo nhiễm virus và thức ăn chứa thịt lợn nhiễm bệnh.

Với mức độ phổ biến cao, phân bố rộng và khả năng gây thiệt hại kinh tế đáng kể trong ngành chăn nuôi, vì vậy việc nghiên cứu và phát hiện kịp thời vi rút ASFV  là rất quan trọng. Đặc biệt trong thời điểm chưa có thuốc đặc hiệu điều trị và nuôi cấy dòng vi rút này rất khó khăn thì việc sàng lọc phát hiện sớm bệnh sẽ giảm thiểu được tối đa thiệt hại kinh tế. 

Phương pháp phát hiện ASFV

Hiện nay có rất nhiều phương pháp thử nghiệm sự hiện diện của vi rút gây bệnh trên thú y  như: các phương pháp phân lập và thử nghiệm sinh hóa truyền thống, quan sát máu dưới kính hiển vi, kit test nhanh [*],… Tuy nhiên hầu hết các phương pháp này đều mang lại kết quả có độ chính xác tương đối và thời gian thử nghiệm lâu, không phù hợp với các đơn vị sản xuất cần kết quả thử nghiệm có độ tin cậy, chính xác cao. 

Vì vậy, việc sử dụng phương pháp real-time PCR để kiểm tra sự hiện diện của tổ hợp nhiều loại vi rút gây bệnh  trên thú y chỉ thông qua một thí nghiệm sẽ giúp cải thiện được thời gian, độ nhạy và độ đặc hiệu cao.  

ASFV qPCR Visikit

Sản phẩm ASFV qPCR Visikit được sử dụng phổ biến trong phương pháp này mang lại giá trị thử nghiệm đạt độ nhạy và độ đặc hiệu cao trong phát hiện vi rút gây bệnh ASFV.  Đối với phương pháp real-time PCR sử dụng bộ kit ASFV qPCR Visikit yêu cầu phải trang bị một số thiết bị phục vụ cho việc phát hiện mầm bệnh như máy real-time PCR, máy ly tâm, tủ bảo quản và một số vật tư tiêu hao thông thường,…cùng đội ngũ kỹ thuật viên được đào tạo về chuyên môn cũng như kỹ năng.

Visitech sẽ giúp bạn giải quyết tất cả các vấn đề trên để mang lại hiệu quả công việc và lợi nhuận tốt nhất. Chúng tôi sẽ lựa chọn cho bạn một giải pháp tốt nhất phù hợp với yêu cầu của bạn. 

Điều kiện lưu trữ

 -20⁰C

Tên sản phẩm

ASFV qPCR Visitech

Mã sản phẩm

ANIMR- 01

Nhà sản xuất

Visitech- Việt Nam

Hạn sử dụng 

12 tháng kể từ ngày sản xuất

Thành phần bộ kit

Hướng dẫn sử dụng

Cách xử lý mẫu

• Đối với mẫu bệnh phẩm từ lách, hạch amydal, hạch bạch huyết, thận từ lợn: nghiền thành huyễn dịch 10% với dung dịch nước sinh lý hoặc PBS vô trùng. Sau đó ly tâm 1500 rpm trong 10 phút. Thu dịch nổi có thể dùng để chẩn đoán phát hiện vi rút dịch tả lợn Châu phi bằng phản ứng qPCR.
• Mẫu máu toàn phần: máu được thu trong ống chuyên dụng chứa chất chống đông máu (không sử dụng ống chứa heparin vì sẽ gây ức chế phản ứng).
• Huyết thanh: Lấy 3 mL máu cho vào tube (không chứa chất chống đông EDTA và heparin). Sau đó, tiến hành phân tách huyết thanh bằng cách ly tâm ở 3000 rpm trong 15 phút. Huyết thanh sau đó được chuyển vào tube polypropylene vô trùng.

Quy trình tách chiết DNA 

• Các bạn có thể sử dụng các phương pháp thu hồi DNA/ RNA bằng các hóa chất như Phenol, Chloroform, Isopropanol,… Tuy nhiên các phương pháp này sẽ không đảm bảo chát lượng vật liệu di truyền trong mẫu bệnh phẩm; việc tồn dư các hóa chất trong mẫu có thể gây ức chế phản ứng PCR.  

• Ngoài ra nếu số lượng mẫu nhiều, khuyến cáo sử dụng máy tách chiết tự động [*] đi kèm với hóa chất sử dụng cho máy Genomic DNA extraction Visikit

• Nếu số lượng mẫu ít khuyến cáo sử dụng bộ  tách chiết bằng tay theo phương pháp cột Silica: Bộ kit Blood DNA extraction Visikit [*] sử dụng cho tách chiết DNA virus từ mẫu máu toàn phần; và bộ kit Serum viral extraction Visikit [*] sử dụng cho tách chiết DNA virus từ mẫu huyết thanh. 

Thực hiện phản ứng PCR

• Đầu tiên bạn kiểm tra số lượng mẫu, lấy số lượng cần thiết ống ASFV qPCR mix sau đó rã đông ống ở nhiệt độ phòng (15–25°C), spindown để toàn bộ chất lỏng di chuyển xuống đáy.
• Bạn hãy mở nắp lần lượt và hút 5 µL mẫu cho vào các tube ASFV qPCR mix đã chuẩn bị ở trên  theo thứ tự: Chứng âm, chứng âm tách chiết, DNA mẫu và cuối cùng là mẫu  đối chứng dương  sau đó đóng nắp tube để hạn chế việc nhiễm chéo tốt nhất.
• Mỗi lần chạy nên có ít nhất một chứng âm tách chiết,một  chứng dương và một chứng âm PCR để có thể kiểm soát kết quả test.
• Sau khi bạn thực hiện các bước trên bạn hãy kiểm tra lại nắp PCR và spindown để chất lỏng di chuyển xuống đáy trước khi đặt vào máy. Chọn kênh màu FAM cho ASFV và kênh màu HEX cho chứng nội..
• Cài đặt chương trình nhiệt như bên dưới:

Phân tích kết quả

• Mẫu âm tính với ASFV: đường biểu diễn huỳnh quang FAM không vượt lên khỏi ngưỡng tín hiệu; chỉ có đường biểu diễn huỳnh quang HEX của chứng nội vượt lên khỏi ngưỡng tín hiệu
• Mẫu dương tính với ASFV: đường biểu diễn huỳnh quang FAM vượt lên khỏi ngưỡng tín hiệu. Trong 1 số trường hợp mẫu dương tính mạnh với trình tự mục tiêu, đường biểu diễn huỳnh quang HEX có thể nằm dưới ngưỡng tín hiệu.
• Không xuất hiện tín hiệu nào, kể cả màu HEX: Phản ứng qPCR bị ức chế, do đó không thể kết luận được là mẫu âm tính hay dương tính. Tiến hành pha loãng mẫu 10 lần hoặc tách lại DNA.

Bảng tóm tắt phân tích kết quả

Xử lý sự cố: đối với bất kì sự cố nào khi sử dụng sản phẩm của VISITECH chúng tôi sẽ hỗ trợ bạn giải quyết một cách chuyên nghiệp nhất. Dưới đây là một số lỗi thường gặp và cách khắc phục:

Visitech – Nhà sản xuất Kit PCR chất lượng cao

Ngoài việc phát hiện AFSV trên heo, Visitech chúng tôi còn cung cấp thêm các kit qPCR phát hiện các loài virus, vi khuẩn gây bệnh trên thú y  theo link danh mục sau: 

https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/kit-test/kit-pcr/

Khi truy cập vào link này, chúng ta sẽ thấy thêm rất nhiều loại Kit cũng thường xuyên được sử dụng. Ví dụ như: Kit qPCR CDV [*] để phát hiện bệnh trong nhóm thú y. Hay Kit Babesia gây bệnh lê dạng trùng cho chó [*] hay Kit qPCR FMDV [*] để phát hiện FMDV gây bệnh cho đọng vật ở nhóm thú y và còn rất nhiều Kit khác…

Đặc biệt, ngoài việc cung cấp hóa chất cho phát hiện bệnh, Visitech cũng đem đến cho Qúy khách hàng một giải pháp tổng thể và đầy đủ về các trang thiết bị, vật tư tiêu hao cho một phòng thử nghiệm PCR, realtime PCR đạt chuẩn. Mời Qúy khách hàng tham khảo Link bên dưới: https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/sinh-hoc-phan-tu/ 

Tại sao nên chọn Visikit

Visitech tự hào là đơn vị tư nhân với nhiều năm kinh nghiệm trong nhiều lĩnh vực khác nhau, trong đó lĩnh vực sinh học phân tử là một trong những thế mạnh của chúng tôi. 

Chúng tôi cam kết đưa đến tay khách hàng sản phẩm đạt chất lượng theo tiêu chuẩn ISO 13485 năm 2016, là tiêu chuẩn ISO về hệ thống quản lý an toàn cho sản phẩm.

Bên cạnh đó, Visitech có đội ngũ R & D có chuyên môn cao và giàu kinh nghiệm, luôn nghiên cứu, trau dồi để chọn lọc và đưa ra sản phẩm tốt nhất đến tay người sử dụng. 

Đặc biệt, công ty chúng tôi có hàng DEMO để chạy thử nghiệm nhằm chứng minh chất lượng đối với những khách hàng có nhu cầu. Kỹ sư chúng tôi sẽ trực tiếp hướng dẫn và training cho tới khi thành thạo.

Thông tin liên hệ Visitech 

Trên đây là những thông tin chi tiết về Kit PCR phát hiện ASFV của Visitech mà chúng tôi biên soạn. Hy vọng những chia sẻ trên sẽ mang đến cho Quý Khách hàng những thông tin bổ ích. 

Visitech chúng tôi tự tin và tự hào với đội ngũ nhân viên có nhiều năm kinh nghiệm về lĩnh vực sinh học phân tử, đặc biệt là các xét nghiệm liên quan đến phát hiện virus, vi khuẩn trong thực phẩm, thủy sản, thú y…Chúng tôi luôn trên tinh thần sẵn sàng được tư vấn chi tiết, giải đáp thắc mắc và hỗ trợ mọi ý kiến của Qúy khách hàng. Hãy liên hệ ngay với chúng tôi theo địa chỉ bên dưới:

• Email: info@visitech.vn
• Hotline: 0919112141
• Zalo: 0919112141
• Website: https://visitech.vn/
• Map: Công ty TNHH Khoa Học Kỹ Thuật Việt Sinh 
• Kênh Youtube: Visitech
• Fanpage: Visitech
• Địa chỉ: 730/1/2/7C Hương Lộ 2, Phường Bình Trị Đông A, Quận Bình Tân, Tp.HCM