Kit qPCR chẩn đoán virus TGE trên heo ANIFR-11 Visikit

TGE gây bệnh gì ?

TGE (Transmissible Gastro Enteritis) còn gọi là bệnh viêm dạ dày ruột truyền nhiễm, do coronavirus gây ra trên lợn, chó, mèo, …

TGE  gây bệnh trên heo ở mọi lứa tuổi, nhưng tỷ lệ tử vong cao nhất là lợn con 1- ngày tuổi

TGE xâm nhập vào cơ thể lợn qua đường miệng- mũi, sau đó nhân lên ở viêm mạc ruột non, phá hủy nhung mao ruột, gây tiêu chảy, mất nhiều nước, chết nhanh. Thời gian ủ bệnh thường 18 đến 72 giờ

Triệu chứng khi nhiễm TGE ở lợn?

• Đối với lợn con: lười bú, nằm tụm lại, tiêu chảy kèm với ói mửa, phân lỏng, tanh, lợn gầy nhanh trong vài ngày , tỷ lệ tử vong cao
• Đối với lợn sau cai sữa và lợn thịt; tỷ lệ tử vong thấp hơn, triệu chứng không rõ rệt lắm, thường tiêu chảy, ít ăn, chậm lớn
• Đối với lợn nái mắc bệnh: sốt cao, ít sữa, ói mửa, gầy sút…

Điều trị

Bệnh viêm dạ dày ruột truyền nhiễm do virus gây ra nên chưa có thuốc điều trị, vì vậy khi phát hiện lợn nhiễm TGE cần tăng cường tác dụng của hệ miễn dịch không đặc hiệu để phòng và trị bệnh. Cung cấp các chất có điện giải, hoặc cung cấp thêm nước vào xoang phúc mạc bổ sung thêm Atropin trong dịch truyền để hạn chế co thắt ruột, giảm tiêu chảy và tiêm các loại kháng sinh phòng chống các bệnh kế phát như: Enrofloxacin, norfloxacin … kết hợp với vệ sinh, hộ lý, chống thiếu nhiệt, sát trùng định kỳ sẽ giảm thiệt hại của bệnh.

Phương pháp phát hiện TGE

Hiện nay có rất nhiều phương pháp thử nghiệm sự hiện diện của vi rút gây bệnh trên thú y như: các phương pháp phân lập và thử nghiệm sinh hóa truyền thống, quan sát máu dưới kính hiển vi, kit test nhanh [*],… Tuy nhiên hầu hết các phương pháp này đều mang lại kết quả có độ chính xác tương đối và thời gian thử nghiệm lâu, không phù hợp với các đơn vị sản xuất cần kết quả thử nghiệm có độ tin cậy, chính xác cao. 

Vì vậy, việc sử dụng phương pháp real- time PCR để kiểm tra sự hiện diện của tổ hợp nhiều loại vi rút gây bệnh  trên thú y chỉ thông qua một thí nghiệm sẽ giúp cải thiện được thời gian, độ nhạy và độ đặc hiệu cao.  

TGE RT qPCR Visikit

Sản phẩm TGE RT qPCR Visikit được sử dụng phổ biến trong phương pháp này mang lại giá trị thử nghiệm đạt độ nhạy và độ đặc hiệu cao trong phát hiện vi rút gây bệnh.  Đối với phương pháp real- time PCR sử dụng bộ kit TGE RT qPCR Visikit yêu cầu phải trang bị một số thiết bị phục vụ cho việc phát hiện mầm bệnh như máy real- time PCR, máy ly tâm, tủ bảo quản và một số vật tư tiêu hao thông thường,…cùng đội ngũ kỹ thuật viên được đào tạo về chuyên môn cũng như kỹ năng.

Visitech sẽ giúp bạn giải quyết tất cả các vấn đề trên để mang lại hiệu quả công việc và lợi nhuận tốt nhất. Chúng tôi sẽ lựa chọn cho bạn một giải pháp tốt nhất phù hợp với yêu cầu của bạn. 

Điều kiện lưu trữ

-20⁰C

Tên sản phẩm

TGE RT qPCR Visikit

Mã sản phẩm

ANIFR- 11

Nhà sản xuất

Visitech- Việt Nam

Hạn sử dụng 

12 tháng kể từ ngày sản xuất

Thành phần bộ kit

Hướng dẫn sử dụng

Chuẩn bị mẫu

✓ Mẫu swab trực tràng: Dùng gạc hoặc tăm bông vô trùng ngoáy trực tràng , sau đó đựng trong ống vô trùng, bổ sung 2 mL dung dịch bảo quản PBS.

✓ Mẫu phân: Lấy 1 g phân cho vào tube chứa 9 mL dung dịch PBS, vortex mẫu cho tan hoàn toàn phân trong dung dịch.

✓ Mẫu mô hỗng tràng (ruột non): Nghiền 200 mg mẫu mô ruột trong 1 mL dung dịch PBS và bảo quản cho đến khi tách chiết.

✓ Mẫu môi trường:

o Khu vực lấy mẫu: Nền, chuồng trại, máng thức ăn, dụng cụ thiết bị chăn nuôi

o Lấy mẫu: Dùng tăm bông vô trùng chà xát bề mặt môi trường xung quanh theo chiều zizac, sau đó cho tăm bông cho vào tube chứa sẵn 500 μL dung dịch đệm.

Lưu ý:

o Mẫu sau khi lấy nên vận chuyển trong điều kiện lạnh 4- 8 oC và bảo quản ở tủ đông cho đến khi tiến hành xét nghiệm.

Tách chiết RNA

✓ Bộ Genomic DNA/RNA extraction Visikit được khuyến cáo sử dụng cho tách chiết RNA virus từ mẫu mô, bộ Fluid Viral Extraction Visikit cho tách mẫu swab trực tràng và mẫu môi trường. Bộ Stool DNA Extraction Visikit cho tách mẫu phân. Qui trình thực hiện xem theo HDSD của các bộ kit kể trên.

Thực hiện phản ứng Realtime RT- PCR

✓ Lấy đúng số lượng ống TGE rPCR Mix cần thiết, rã đông bằng cách để ở nhiệt độ phòng, sau đó spindown để toàn bộ chất lỏng di chuyển xuống đáy.

✓ Hút 5 μL RNA mẫu, chứng âm tách chiết, chứng dương cho vào các tube TGE rPCR mix đã chuẩn bị ở trên.

Chú ý:

– Mỗi lần chạy nên có ít nhất 1 chứng âm tách chiết, 1 chứng dương và 1 chứng âm PCR.

– Chuẩn bị phản ứng theo thứ tự sau: Chứng âm, chứng âm tách chiết, mẫu và chứng dương.

✓ Đóng nắp PCR và spindown để chất lỏng di chuyển xuống đáy trước khi đặt vào máy. Chọn kênh màu FAM cho TGE và kênh màu HEX cho chứng nội. Cài đặt chương trình nhiệt như bên dưới: 

✓ Mẫu âm tính với TGE: chỉ có đường biểu diễn huỳnh quang HEX của chứng nội vượt lên khỏi ngưỡng tín hiệuPhân tích kết quả

✓ Không xuất hiện tín hiệu nào, kể cả màu HEX: Phản ứng real- time RT- PCR bị ức chế, do đó không thể kết luận được là mẫu âm tính hay dương tính. Tiến hành pha loãng mẫu 10 lần hoặc tách lại RNA.

✓ Mẫu dương tính với TGE: đường biểu diễn huỳnh quang FAM, HEX cùng vượt lên khỏi ngưỡng tín hiệu. Trong 1 số trường hợp mẫu dương tính mạnh với trình tự mục tiêu, đường biểu diễn huỳnh quang HEX có thể nằm dưới ngưỡng tín hiệu.

Bảng tóm tắt phân tích kết quả

Xử lý sự cố

Đối với bất kì sự cố nào khi sử dụng sản phẩm của Visitech chúng tôi sẽ hỗ trợ bạn giải quyết một cách chuyên nghiệp nhất. Dưới đây là một số lỗi thường gặp và cách khắc phục:

Visitech – Nhà sản xuất Kit PCR chất lượng cao

Ngoài việc phát hiện TGE trên gia súc, Visitech chúng tôi còn cung cấp thêm các kit qPCR phát hiện các loài virus, vi khuẩn gây bệnh trên thú y theo link danh mục sau: 

https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/kit-test/kit-pcr/

Khi truy cập vào link này, chúng ta sẽ thấy thêm rất nhiều loại Kit cũng thường xuyên được sử dụng. Ví dụ như: Kit qPCR CDV [*] để phát hiện bệnh trong nhóm thú y. Hay Kit ASFV gây bệnh trên heo [*] hay Kit qPCR PED [*] để phát hiện JEV gây bệnh trên heo  và còn rất nhiều Kit khác…

Đặc biệt, ngoài việc cung cấp hóa chất cho phát hiện bệnh, Visitech cũng đem đến cho Qúy khách hàng một giải pháp tổng thể và đầy đủ về các trang thiết bị, vật tư tiêu hao cho một phòng thử nghiệm PCR, realtime PCR đạt chuẩn. Mời Qúy khách hàng tham khảo Link bên dưới: https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/sinh-hoc-phan-tu/ 

Tại sao nên chọn Visikit

Visitech tự hào là đơn vị tư nhân với nhiều năm kinh nghiệm trong nhiều lĩnh vực khác nhau, trong đó lĩnh vực sinh học phân tử là một trong những thế mạnh của chúng tôi. 

Chúng tôi cam kết đưa đến tay khách hàng sản phẩm đạt chất lượng theo tiêu chuẩn ISO 13485 năm 2016, là tiêu chuẩn ISO về hệ thống quản lý an toàn cho sản phẩm.

Bên cạnh đó, Visitech có đội ngũ R & D có chuyên môn cao và giàu kinh nghiệm, luôn nghiên cứu, trau dồi để chọn lọc và đưa ra sản phẩm tốt nhất đến tay người sử dụng. 

Đặc biệt, công ty chúng tôi có hàng DEMO để chạy thử nghiệm nhằm chứng minh chất lượng đối với những khách hàng có nhu cầu. Kỹ sư chúng tôi sẽ trực tiếp hướng dẫn và training cho tới khi thành thạo.

Thông tin liên hệ Visitech 

Trên đây là những thông tin chi tiết về Kit PCR phát hiện TGE của Visitech mà chúng tôi biên soạn. Hy vọng những chia sẻ trên sẽ mang đến cho Quý Khách hàng những thông tin bổ ích. 

Visitech chúng tôi tự tin và tự hào với đội ngũ nhân viên có nhiều năm kinh nghiệm về lĩnh vực sinh học phân tử, đặc biệt là các xét nghiệm liên quan đến phát hiện virus, vi khuẩn trong thực phẩm, thủy sản, thú y…Chúng tôi luôn trên tinh thần sẵn sàng được tư vấn chi tiết, giải đáp thắc mắc và hỗ trợ mọi ý kiến của Qúy khách hàng. Hãy liên hệ ngay với chúng tôi theo địa chỉ bên dưới:

• Email: info@visitech.vn
• Hotline: 0919112141
• Zalo: 0919112141
• Website: https://visitech.vn/
• Map: Công ty TNHH Khoa Học Kỹ Thuật Việt Sinh 
• Kênh Youtube: Visitech
• Fanpage: Visitech