PRRSV (Porcine reproductive and respiratory syndrome) gây bệnh gì trên heo?

• PRRSV là hội chứng rối loạn hô hấp và sinh sản ở lợn hay còn gọi là bệnh heo tai xanh. Đây là một bệnh truyền nhiễm nguy hiểm, lây lan nhanh và làm chết nhiều lợn nhiễm bệnh gây thiệt hại lớn cho ngành chăn nuôi lợn. 

• PRRS do một loại Arterivirus (virus PRRS), họ Arteriviridae, thuộc giống Nidovirales. Virus PRRS (PRRSV) là loại virus có vỏ bọc bên ngoài, có cấu trúc hệ gen là ARN sợi đơn dương, có cấu trúc vỏ bọc dạng chuỗi đơn RNA, hình cầu, kích thước 45 – 80 nm và chứa nhân nucleocapsid 25 – 35 nm, trên bề mặt có những gai nhô ra rõ có tính thích ứng nhân lên rất cao với đại thực bào, đặc biệt là đại thực bào hoạt động ở phổi. Virus phát triển, tăng nhanh về số lượng trong đại thực bào, phá hủy và giết chết tế bào đại thực bào, làm suy giảm nghiêm trọng sức đề kháng của lợn bệnh; tạo điều kiện thuận lợi cho các vi khuẩn thứ phát gây bệnh viêm phổi như bệnh dịch tả lợn (Pestis suum), suyễn lợn (Mycoplasma hyopneumoniae), liên cầu khuẩn (Streptococcus suis), tụ cầu khuẩn (Staphylococcus aureus), Tụ huyết trùng (Pasteurella multocida) phát sinh, phát triển và làm cho bệnh ngày càng trầm trọng hơn, lợn bệnh chết chủ yếu do các vi khuẩn kế phát. 

• Hiện nay có 2 kiểu gen PRRS chính được công nhận. Sự tương đồng về gen giữa 2 virus PRRS Bắc Mỹ và châu Âu dao động từ 52 đến 81 %

• Kiêu gen Châu Âu (Nhóm I) có tên gọi là Lelystad 
• Kiểu gen Bắc Mỹ (Nhóm II) có tên gọi là VR2332

Phương thức lây truyền

• Lây truyền trực tiếp: Do bệnh khỏe mạnh tiếp xúc với lợn bị bệnh qua phân, nước tiểu chứa mầm bệnh hoặc qua thụ tinh nhân tạo
• Lây truyền gián tiếp: Qua thức ăn, nước uống chứa mầm bệnh, qua dụng cụ chăn nuôi, bảo hộ lao động…

Triệu chứng lợn nhiễm PRRSV (Bệnh heo tai xanh)

• Đối với lợn nái: Sốt cao, biếng ăn, sẩy thai, lười ăn, da biến màu, tai chuyển thành màu xanh, đẻ non, tỷ lệ thai chết cao…
• Đối với lơn con: sốt cao, khó thở, mắt đổi màu, da đổi màu, ỉa chảy nhiều, run rẩy
• Đối với lợn choai, lợn thịt: sốt cao, biếng ăm, ủ rũ, da chuyển màu
• Đối với lợn đực giống: sốt cao, bỏ ăn, lờ đờ, hôn mê, giảm hưng phấn, mất tính dục, sinh dịch hoàn…

Phương pháp phát hiện PPV

Hiện nay có rất nhiều phương pháp thử nghiệm sự hiện diện của vi rút gây bệnh trên thú y  như: các phương pháp phân lập và thử nghiệm sinh hóa truyền thống, quan sát máu dưới kính hiển vi, kit test nhanh [*],… Tuy nhiên hầu hết các phương pháp này đều mang lại kết quả có độ chính xác tương đối và thời gian thử nghiệm lâu, không phù hợp với các đơn vị sản xuất cần kết quả thử nghiệm có độ tin cậy, chính xác cao. 

Vì vậy, việc sử dụng phương pháp real- time PCR để kiểm tra sự hiện diện của tổ hợp nhiều loại vi rút gây bệnh  trên thú y chỉ thông qua một thí nghiệm sẽ giúp cải thiện được thời gian, độ nhạy và độ đặc hiệu cao.  

PRRSV RT qPCR Visikit

Sản phẩm PRRSV RT qPCR Visikit được sử dụng phổ biến trong phương pháp này mang lại giá trị thử nghiệm đạt độ nhạy và độ đặc hiệu cao trong phát hiện vi rút gây bệnh.  Đối với phương pháp real- time PCR sử dụng bộ kit PRRSV RT qPCR Visikit yêu cầu phải trang bị một số thiết bị phục vụ cho việc phát hiện mầm bệnh như máy real- time PCR, máy ly tâm, tủ bảo quản và một số vật tư tiêu hao thông thường,…cùng đội ngũ kỹ thuật viên được đào tạo về chuyên môn cũng như kỹ năng.

Visitech sẽ giúp bạn giải quyết tất cả các vấn đề trên để mang lại hiệu quả công việc và lợi nhuận tốt nhất. Chúng tôi sẽ lựa chọn cho bạn một giải pháp tốt nhất phù hợp với yêu cầu của bạn. 

Điều kiện lưu trữ

-20⁰C

Tên sản phẩm

PRRSV RT qPCR Visikit

Mã sản phẩm

ANIFR- 06

Nhà sản xuất

Visitech- Việt Nam

Hạn sử dụng 

12 tháng kể từ ngày sản xuất

Thành phần bộ kit

Hướng dẫn sử dụng

Chuẩn bị mẫu

✓ Mẫu máu/ huyết thanh: Lấy 5- 10 mL máu, để tách huyết thanh trộn đều rồi ly tâm 8000 g trong 1 phút sau đó bảo quản lạnh để đem đi tách RNA.

✓ Mẫu swab dịch miệng: Dùng gạc hoặc tăm bông vô trùng ngoáy lấy dịch miệng đựng trong ống vô trùng, bổ sung 3- 5 mL dung dịch bảo quản PBS, bảo quản lạnh để tách chiết RNA.

✓ Mẫu mô, phổi, hạch: dùng panh, kéo lấy 1- 2 g, cắt nhỏ rồi nghiền nát trong dung dịch PBS pH = 7,2. Ly tâm lấy dịch nổi và xử lí với kháng sinh Penicillin (200UI/ mL) và Streptomycin (200UI/ mL).

✓ Mẫu môi trường:

o Khu vực lấy mẫu: Nền, chuồng trại, máng thức ăn, dụng cụ thiết bị chăn nuôi

o Lấy mẫu: Dùng tăm bông vô trùng chà xát bề mặt môi trường xung quanh theo chiều zizac, sau đó cho tăm bông cho vào tube chứa sẵn 500 μL dung dịch đệm.

Lưu ý:

o Việc phát hiện virus PRRS được thực hiện tốt nhất ở lợn bị ảnh hưởng trong giai đoạn đầu củam nhiễm PRRS: lợn con yếu, lờ đờ, lợn cai sữa yếu, bỏ ăn, lợn nái/ lợn nái vừa sinh có dấu hiệu sốt, bỏ ăn, có dấu hiệu lâm sàng.

o Mẫu sau khi lấy nên vận chuyển trong điều kiện lạnh và bảo quản ở tủ đông cho đến khi tiến hành xét nghiệm.

Tách chiết RNA

✓ Bộ Fluid Viral Extraction Visikit (FEKA- 50) được khuyến cáo sử dụng cho tách chiết RNA virus từ mẫu swab dịch hầu họng và mẫu môi trường; và bộ kit  Serum Viral Extraction Visikit (SEKA- 01) được khuyến cáo sử dụng cho tách chiết RNA virus từ mẫu huyết thanh. Đối với mẫu mô phổi/ hạch nên tách chiết với bộ kit Genomic DNA Extraction Visikit. Qui trình thực hiện xem theo HDSD của các bộ kit kể trên.

Thực hiện phản ứng Realtime RT- PCR

✓ Lấy đúng số lượng ống PRRSDV rPCR Mix cần thiết, rã đông bằng cách để ở nhiệt độ phòng, sau đó spindown để toàn bộ chất lỏng di chuyển xuống đáy.

✓ Hút 5 μL RNA mẫu, chứng âm tách chiết, chứng dương cho vào các tube PRRSV rPCR mix đã chuẩn bị ở trên.

Chú ý:

– Mỗi lần chạy nên có ít nhất 1 chứng âm tách chiết, 1 chứng dương và 1 chứng âm PCR.

– Chuẩn bị phản ứng theo thứ tự sau: Chứng âm, chứng âm tách chiết, mẫu và chứng dương.

✓ Đóng nắp PCR và spindown để chất lỏng di chuyển xuống đáy trước khi đặt vào máy. Chọn kênh màu FAM cho PRRSV- Type II (NA), TexaRed cho PRRSV- Type II- China (HP) và kênh màu HEX cho chứng nội.

Cài đặt chương trình nhiệt như bên dưới:

✓ Mẫu âm tính với PRRSV type II (NA) và Type II- China (HP): chỉ có đường biểu diễn huỳnh quang HEX của chứng nội vượt lên khỏi ngưỡng tín hiệuPhân tích kết quả

✓ Không xuất hiện tín hiệu nào, kể cả màu HEX: Phản ứng real- time RT- PCR bị ức chế, do đó không thể kết luận được là mẫu âm tính hay dương tính. Tiến hành pha loãng mẫu 10 lần hoặc tách lại RNA.

✓ Mẫu dương tính với PRRSV Type II (NA): đường biểu diễn huỳnh quang FAM, HEX cùng vượt lên khỏi ngưỡng tín hiệu. Trong 1 số trường hợp mẫu dương tính mạnh với trình tự mục tiêu, đường biểu diễn huỳnh quang HEX có thể nằm dưới ngưỡng tín hiệu.

✓ Mẫu dương tính với PRRSV Type II Độc lực cao (HP) hoặc nhiễm đồng thời cả hai PRRSV type II và type II độc lực cao: đường biểu diễn huỳnh quang Fam, TexaRed, HEX cùng vượt lên khỏi ngưỡng tín hiệu. Trong 1 số trường hợp mẫu dương tính mạnh với trình tự mục tiêu, đường biểu diễn huỳnh quang HEX có thể nằm dưới ngưỡng tín hiệu.

Bảng tóm tắt phân tích kết quả:

Xử lý sự cố

Đối với bất kì sự cố nào khi sử dụng sản phẩm của Visitech chúng tôi sẽ hỗ trợ bạn giải quyết một cách chuyên nghiệp nhất. Dưới đây là một số lỗi thường gặp và cách khắc phục:

Visitech – Nhà sản xuất Kit PCR chất lượng cao

Ngoài việc phát hiện PRRSV trên gia súc, Visitech chúng tôi còn cung cấp thêm các kit qPCR phát hiện các loài virus, vi khuẩn gây bệnh trên thú y theo link danh mục sau: 

https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/kit-test/kit-pcr/

Khi truy cập vào link này, chúng ta sẽ thấy thêm rất nhiều loại Kit cũng thường xuyên được sử dụng. Ví dụ như: Kit qPCR CDV [*] để phát hiện bệnh trong nhóm thú y. Hay Kit ASFV gây bệnh trên heo [*] hay Kit qPCR PED [*] để phát hiện JEV gây bệnh trên heo  và còn rất nhiều Kit khác…

Đặc biệt, ngoài việc cung cấp hóa chất cho phát hiện bệnh, Visitech cũng đem đến cho Qúy khách hàng một giải pháp tổng thể và đầy đủ về các trang thiết bị, vật tư tiêu hao cho một phòng thử nghiệm PCR, realtime PCR đạt chuẩn. Mời Qúy khách hàng tham khảo Link bên dưới: https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/sinh-hoc-phan-tu/ 

Tại sao nên chọn Visikit

Visitech tự hào là đơn vị tư nhân với nhiều năm kinh nghiệm trong nhiều lĩnh vực khác nhau, trong đó lĩnh vực sinh học phân tử là một trong những thế mạnh của chúng tôi. 

Chúng tôi cam kết đưa đến tay khách hàng sản phẩm đạt chất lượng theo tiêu chuẩn ISO 13485 năm 2016, là tiêu chuẩn ISO về hệ thống quản lý an toàn cho sản phẩm.

Bên cạnh đó, Visitech có đội ngũ R & D có chuyên môn cao và giàu kinh nghiệm, luôn nghiên cứu, trau dồi để chọn lọc và đưa ra sản phẩm tốt nhất đến tay người sử dụng. 

Đặc biệt, công ty chúng tôi có hàng DEMO để chạy thử nghiệm nhằm chứng minh chất lượng đối với những khách hàng có nhu cầu. Kỹ sư chúng tôi sẽ trực tiếp hướng dẫn và training cho tới khi thành thạo.

Thông tin liên hệ Visitech 

Trên đây là những thông tin chi tiết về Kit PCR phát hiện PPV của Visitech mà chúng tôi biên soạn. Hy vọng những chia sẻ trên sẽ mang đến cho Quý Khách hàng những thông tin bổ ích. 

Visitech chúng tôi tự tin và tự hào với đội ngũ nhân viên có nhiều năm kinh nghiệm về lĩnh vực sinh học phân tử, đặc biệt là các xét nghiệm liên quan đến phát hiện virus, vi khuẩn trong thực phẩm, thủy sản, thú y…Chúng tôi luôn trên tinh thần sẵn sàng được tư vấn chi tiết, giải đáp thắc mắc và hỗ trợ mọi ý kiến của Qúy khách hàng. Hãy liên hệ ngay với chúng tôi theo địa chỉ bên dưới:

• Email: info@visitech.vn
• Hotline: 0919112141
• Zalo: 0919112141
• Website: https://visitech.vn/
• Map: Công ty TNHH Khoa Học Kỹ Thuật Việt Sinh 
• Kênh Youtube: Visitech
• Fanpage: Visitech