Ngành thủy sản nói chung và nuôi trồng tôm nói riêng đang là một trong những ngành kinh tế mũi nhọn của Việt Nam. Đây là ngành giữ vai trò phát triển thương mại quan trọng, các sản phẩm thủy sản đến từ Việt Nam đang được đánh giá rất cao trên thị trường thế giới. Chính vì vậy, việc định hướng chiến lược phát triển cho ngành theo từng giai đoạn trước những biến động của thị trường thế giới là điều thực sự cần thiết. Đặc biệt đối với việc phòng trừ dịch bệnh sẽ đóng vai trò rất cấp thiết bởi vì nó sẽ ảnh hưởng trực tiếp đến năng suất và chất lượng của sản phẩm, tác động trực tiếp làm giảm các nguồn khách hàng của chúng ta.
Bệnh DIV1 trên tôm là gì?
Decapod iridescent virus 1 (DIV1) là loại Vi rút có thể lây nhiễm cho tôm ở tất cả các giai đoạn sinh trưởng.
Trong số các loài nhạy cảm với DIV1, tôm thẻ chân trắng là loài tôm được nuôi nhiều nhất, cho năng suất cao nhất do tốc độ tăng trưởng nhanh và khả năng kháng bệnh cao.Tôm thẻ chân trắng mắc virus DIV1 có thể tỷ lệ tử vong lên đến 100%
Virus (DIV1) tấn công vào tế bào máu trong mang, gan tụy và cơ của tôm. Khi tôm bị nhiễm DIV1, tôm chìm xuống đáy ao, mềm vỏ và chuyển màu đỏ nhạt, dạ dày và ruột rỗng, bề mặt và mặt cắt gan tụy nhạt màu.
Theo quan sát ban đầu, tôm bị nhiễm mạnh vào mùa đông. Tác động của bệnh sẽ nghiêm trọng hơn khi tôm bị bội nhiễm với vi khuẩn vibrio, trong ao có tảo bùng phát mạnh hoặc trời mưa kéo dài. Tôm ít bị nhiễm vào mùa hè, mùa thu, nhất là khi nhiệt độ trên 300C.
Khi phát hiện bệnh, tôm bắt đầu chuyển sang màu đỏ, sau đó vỏ của tôm mềm ra và chìm xuống đáy ao. Khoảng hai đến ba ngày sau, tất cả tôm trong ao sẽ nhiễm bệnh và chết.
Vì đây là dịch bệnh mới, nguồn gốc của virus và cách thức lây truyền vẫn chưa rõ ràng, tạm thời không có phương án điều trị nên dịch bệnh có thể lan rộng nếu không có sự quan tâm đúng mức. Do đó cần phải thực hiện nghiêm các hoạt động phòng và tránh dịch bệnh trước và trong mỗi vụ nuôi bên cạnh đó nên có phương pháp sàng lọc bệnh chính xác để giảm thiểu thiệt hại.
Phạm vi áp dụng
Kiểm soát tôm giống
Kiểm soát bệnh của ao nuôi
Kiểm tra các mẫu môi trường trong khu vực nuôi trồng
Hiện nay có rất nhiều phương pháp thử nghiệm sự hiện diện của vi rút DIV1 như: các phương pháp phân lập và thử nghiệm sinh hóa truyền thống, kit test nhanh,… Tuy nhiên hầu hết các phương pháp này đều mang lại các kết quả mang độ chính xác tương đối và thời gian thử nghiệm lâu, không phù hợp với các đơn vị sản xuất lớn.
Để có thể giải quyết các vấn đề trên chúng ta có thể sử dụng phương pháp real-time PCR để kiểm tra sự hiện diện của vi rút DIV1 trên mẫu tôm. Sản phẩm DIV1 Real-time PCR Visikit được sử dụng phổ biến trong phương pháp này mang lại giá trị thử nghiệm đạt độ nhạy và độ đặc hiệu cao trong phát hiện DIV1. Bên cạnh các ưu điểm của phương pháp real-time PCR sử dụng bộ kit DIV1 Real-time PCR Visikit cũng đòi hỏi các phòng thử nghiệm phải trang bị các phòng thử nghiệm đạt độ an toàn và các thiết bị như máy real-time PCR, máy ly tâm, tủ âm sâu,… và đội ngũ kỹ thuật viên được đào tạo chuyên nghiệp.
VISITECH sẽ giúp bạn giải quyết tất cả các vấn đề trên để mang lại hiệu quả công việc và lợi nhuận tốt nhất. Chúng tôi sẽ lựa chọn cho bạn những thiết bị tốt nhất phù hợp với yêu cầu của bạn.
Phương pháp này có thể sử dụng cho các phòng thí nghiệm nhỏ, các công ty, doanh nghiệp yêu cầu kiểm nghiệm, kiểm soát sự hiện diện của vi rút DIV1 trong nuôi trồng tôm.
Sản phẩm DIV1 Real-time PCR VISKIT
Điều kiện lưu trữ
-200C
Tên sản phẩm
DIV1 Real-time PCR VISKIT
Mã sản phẩm
FARA-10
Nhà sản xuất
Visitech – Việt Nam
Hạn sử dụng
12 tháng kể từ ngày sản xuất
Thành phần bộ kit
| Thành phần | Quy cách |
| 50 test | |
DIV1 qPCR mix bao gồm:
|
64×20µL |
| Chứng dương DIV1 | 1×100 µL |
| Chứng âm |
1x1mL |
Hướng dẫn sử dụng bộ kit Real time PCR xác định bệnh DIV1 trên tôm
Quy trình tách chiết DNA/ RNA
Quy trình tách thủ công
Thường được áp dụng cho các phòng kiểm nghiệm nhỏ và số lượng mẫu tương đối ít. Các bạn có thể sử dụng các phương pháp thu hồi DNA bằng các hóa chất như Phenol, Chloroform, Isopropanol,…hoặc sử dụng các bộ tách chiết cột silica từ mẫu tôm như Highpure Viral Extraction Visikit (HEKA-01).
Quy trình tách tự động
Phù hợp cho các phòng kiểm nghiệm độc lập, công ty, doanh nghiệp sản xuất có số lượng mẫu lớn, yêu cầu thời gian kiểm nghiệm nhanh. Bộ Maga Genomic DNA/RNA Extraction VISIKIT (MGEKA-32.R.B) được khuyến cáo sử dụng cho tách chiết DNA/RNA vi rút từ mẫu tôm kết hợp với các loại máy tách chiết hạt từ như: Máy tách chiết DNA/ RNA tự động Gene Pure Plus (NPA-32) Bioer,… Đối với mỗi dòng máy tách chiết tự động sẽ có những đặc điểm khác nhau như số lượng mẫu tách cho mỗi lượt, thời gian thực hiện, các vật tư tiêu hao khác.
Visitech hiện đang cung cấp các loại hóa chất tự động trên đa dạng nhiều loại máy khác nhau như máy tách chiết DNA/ RNA tự động Gene Pure Plus (NPA-32) [**] của hãng Bioer, máy tách chiết tự động của hãng Thermo Kingfisher, máy tách chiết tự động của hãng TANbead… Đối với mỗi dòng máy tách chiết tự động sẽ có những đặc điểm khác nhau như số lượng mẫu tách cho mỗi lượt, thời gian thực hiện, các vật tư tiêu hao dành riêng cho từng máy. Để biết thêm chi tiết cho các thiết bị liên quan đến tách chiết DNA/RNA tự động các bạn có thể liên hệ Visitech qua số hotline hoặc email [**]
Thực hiện phản ứng PCR
-
- Đầu tiên bạn kiểm tra số lượng mẫu, lấy số lượng cần thiết ống DIV1 qPCR mix sau đó rã đông ống ở nhiệt độ phòng (15–25°C), spindown để toàn bộ chất lỏng di chuyển xuống đáy.
- Bạn hãy mở nắp lần lượt và hút 5 µL mẫu cho vào các tube DIV1 qPCR mix đã chuẩn bị ở trên theo thứ tự: Chứng âm, chứng âm tách chiết, DNA/ RNA mẫu và cuối cùng là mẫu đối chứng dương sau đó đóng nắp tube để hạn chế việc nhiễm chéo tốt nhất.
- Mỗi lần chạy nên có ít nhất một chứng âm tách chiết,một chứng dương và một chứng âm PCR để có thể kiểm soát kết quả test.
- Sau khi bạn thực hiện các bước trên bạn hãy kiểm tra lại nắp PCR và spindown để chất lỏng di chuyển xuống đáy trước khi đặt vào máy. Chọn kênh màu FAM cho DIV1 và kênh màu HEX cho chứng nội.
- Cài đặt chương trình nhiệt như bên dưới:
| 1 chu kỳ | 95oC | 3 phút |
| 45 chu kỳ | 95oC | 10 giây |
| 60oC | 30 giây (chọn đọc tín hiệu ở bước này) |
Phân tích kết quả
-
- Mẫu âm tính với DIV1: chỉ có đường biểu diễn huỳnh quang HEX của chứng nội vượt lên khỏi ngưỡng tín hiệu
- Không xuất hiện tín hiệu nào, kể cả màu HEX: Phản ứng qPCR bị ức chế, do đó không thể kết luận được là mẫu âm tính hay dương tính. Tiến hành pha loãng mẫu 10 lần hoặc tách lại DNA.
- Mẫu dương tính với DIV1: đường biểu diễn huỳnh quang FAM, HEX cùng vượt lên khỏi ngưỡng tín hiệu. Trong 1 số trường hợp mẫu dương tính mạnh với trình tự mục tiêu, đường biểu diễn huỳnh quang HEX có thể nằm dưới ngưỡng tín hiệu.
Bảng tóm tắt phân tích kết quả
| STT | DIV1 (FAM) | IC (HEX) | Kết luận |
| 1 | – | + | Mẫu âm tính với DIV1 |
| 2 | + | -/+ | Mẫu dương tính với DIV1 |
| 3 | – | – | Không thể kết luận |
Xử lý sự cố
Đối với bất kì sự cố nào khi sử dụng sản phẩm của Visitech chúng tôi sẽ hỗ trợ bạn giải quyết một cách chuyên nghiệp nhất. Dưới đây là một số lỗi thường gặp và cách khắc phục:
| Sự cố | Nguyên nhân | Khắc phục |
| Không xuất hiện tín hiệu nào ở tất cả các giếng, kể cả chứng dương |
|
|
| Chứng dương bình thường mẫu xét nghiệm không cho tín hiệu vượt ngưỡng nào, kể cả màu HEX |
|
|
| Tín hiệu FAM, HEX vượt ngưỡng trong chứng âm, chứng âm tách chiết |
|
|
Danh mục Visikit cho xác định bệnh trong mẫu thủy sản
Bên cạnh đó Visitech còn cung cấp thêm các kit thử nghiệm định danh một số loài vi khuẩn, vi rút gây bệnh khác trong nuôi trồng thủy hải sản bạn có thể tham khảo tại Danh mục các kit test bệnh thủy sản bằng phương pháp real-time PCR
Bên cạnh bộ kít phát hiện bệnh DIV1 chúng tôi còn cung cấp một số bộ kit phát hiện các bệnh khác như bệnh đốm trắng, hội chứng gan tụy cấp tính , bệnh hoại tử cơ quan tạo máu và cơ quan lập biểu mô,..
Đặc biệt, ngoài việc cung cấp hóa chất cho phát hiện định danh loài Visitech cũng đem đến cho Qúy khách hàng một giải pháp tổng thể và đầy đủ về các trang thiết bị, vật tư tiêu hao cho một phòng thử nghiệm PCR, realtime PCR đạt chuẩn. Chúng tôi sẽ hỗ trợ bạn thiết kế tối ưu một phòng thí nghiệm đạt chuẩn với chất lượng và giá cả cạnh tranh nhất. Mời Qúy khách hàng tham khảo trong Danh mục sản phẩm liên quan lĩnh vực sinh học phân tử
Tại sao nên chọn Visikit
Visitech tự hào là đơn vị tư nhân với nhiều năm kinh nghiệm trong nhiều lĩnh vực khác nhau, trong đó lĩnh vực sinh học phân tử hiện nay đang là mũi nhọn phát triển của chúng tôi.
Chúng tôi cam kết đưa đến tay khách hàng sản phẩm đạt chất lượng theo tiêu chuẩn ISO 13485:2016, là tiêu chuẩn ISO về hệ thống quản lý chất lượng cho sản phẩm đảm bảo sản phẩm đến tay bạn là luôn có chất lượng đảm bảo nhất.
Bên cạnh đó, Visitech có đội ngũ R&D có chuyên môn cao và giàu kinh nghiệm, luôn nghiên cứu, trau dồi để chọn lọc và đưa ra sản phẩm tốt nhất đến tay người sử dụng.
Đặc biệt chúng tôi luôn hỗ trợ các khách hàng mới thử nghiệm các sản phẩm của chúng tôi trước khi bạn quyết định mua và sử dụng các sản phẩm của chúng tôi cho doanh nghiệp của mình. Bằng cách này bạn sẽ có cách nhìn trực quan nhất, có thể so sánh với các dòng sản phẩm khác mà bạn đang sử dụng hoặc phân vân lựa chọn. Chúng tôi sẽ hỗ trợ bạn về kỹ thuật một cách tốt nhất, chia sẻ cùng bạn các khó khăn khi thực hiện các thao tác thí nghiệm để bạn có kết quả kiểm tra chính xác và kịp thời nhất.
Thông tin liên hệ Visitech
Trên đây là những thông tin chi tiết về Kit real time PCR phát hiện bệnh DIV1 trên tôm do Visitech nghiên cứu và sản xuất. Hy vọng những chia sẻ trên sẽ mang đến cho Quý Khách hàng những thông tin bổ ích.
Visitech chúng tôi tự tin và tự hào với đội ngũ nhân viên có nhiều năm kinh nghiệm về lĩnh vực sinh học phân tử, đặc biệt là các xét nghiệm liên quan đến phát hiện virus, vi khuẩn, định danh trong thực phẩm, thủy sản, thú y…Chúng tôi luôn trên tinh thần sẵn sàng được tư vấn chi tiết, giải đáp thắc mắc và hỗ trợ mọi ý kiến của Qúy khách hàng. Hãy liên hệ ngay với chúng tôi theo địa chỉ bên dưới:
- Email: info@visitech.vn
- Hotline: 0919112141
- Zalo: 0919112141
- Website: https://visitech.vn/
- Map: Công ty TNHH Khoa Học Kỹ Thuật Việt Sinh
- Kênh Youtube: Visitech
- Fanpage: Visitech
Nhut –
Tốt