Bình Định Mức Nâu IsolabClass A 5 đến 250 Ml Nút Nhựa

Trypsin-EDTA (0.25%), phenol red Gibco

Chia sẻ

Mô tả sản phẩm
Đánh giá (0)

Trypsin-EDTA là chìa khóa để tách rời tế bào bám dính một cách hiệu quả và an toàn. Trypsin EDTA (0.25%), phenol red (mã 25200056) từ Gibco, thuộc Thermo Fisher Scientific, là dung dịch hàng đầu với trypsin 0.25%, EDTA, và phenol red trong Hanks’ Balanced Salt Solution (HBSS). Sản phẩm được sản xuất theo tiêu chuẩn cGMP, đảm bảo độ tinh khiết và hiệu suất vượt trội.

Với kinh nghiệm sử dụng sản phẩm này để tách tế bào HeLa và CHO, tôi nhận thấy TRY-25200056 mang lại tỷ lệ tế bào sống trên 95%, là lựa chọn lý tưởng cho nghiên cứu và sản xuất sinh học.

Thông tin cơ bản của sản phẩm Trypsin EDTA

Tên sản phẩm: Trypsin-EDTA (0.25%), phenol red
Mã sản phẩm: 25200056
Nhà sản xuất: Gibco (Thermo Fisher Scientific)
Quy cách: Chai 100 mL
Thành phần chính:
- Trypsin 0.25% (2.5 g/L, 1:250) chiết xuất từ tụy lợn
- EDTA·4Na 0.038% (0.38 g/L, ~0.9 mM)
- Phenol red (~10–15 mg/L)
- Hanks’ Balanced Salt Solution (HBSS) không chứa Ca²⁺, Mg²⁺
Bảo quản: -20°C cho dài hạn, 2–8°C trong 1–2 tháng sau rã đông, tránh ánh sáng
Kiểm tra chất lượng:
- Độ vô trùng (không vi khuẩn, nấm, mycoplasma)
- Không chứa porcine parvovirus (PPV), PCV 1/2
- pH (7.2–7.4), osmolality (~280–320 mOsm/kg), endotoxin (<0.5 EU/mL)
- Hiệu suất tách tế bào trên dòng tế bào chuẩn
Ứng dụng chính: Tách tế bào bám dính, phân ly mô nguyên phát, passaging tế bào, chuẩn bị mẫu cho FACS

Trypsin-EDTA là gì?

Trypsin EDTA là dung dịch chứa enzyme trypsin và chất chelate EDTA, được sử dụng để tách tế bào bám dính khỏi bề mặt nuôi cấy hoặc phân ly mô thành huyền phù tế bào đơn lẻ.

Trypsin: Là enzyme serine protease chiết xuất từ tụy lợn, gồm 223 axit amin với 6 cầu disulfide. Trypsin phân cắt đặc hiệu liên kết peptide ở phía carboxyl của arginine và lysine, phá vỡ các protein kết dính (như integrin, cadherin) giữa tế bào và chất nền hoặc giữa các tế bào.
Nồng độ 0.25% trong sản phẩm 25200056 phù hợp cho nhiều dòng tế bào như HeLa, CHO, hoặc fibroblast, nhưng không quá mạnh để gây tổn thương tế bào nhạy cảm.
EDTA: Ethylenediaminetetraacetic acid, một chất chelate, liên kết với ion Ca²⁺ và Mg²⁺, làm suy yếu liên kết phụ thuộc ion trong cadherin và integrin, hỗ trợ trypsin tiếp cận liên kết peptide. EDTA tăng hiệu quả tách tế bào mà không cần tăng nồng độ trypsin.
Phenol red: Chất chỉ thị pH, đổi màu từ vàng (pH < 6.8) sang đỏ (pH ~7.4) đến tím (pH > 8.2), giúp theo dõi pH trong quá trình tách tế bào, đảm bảo điều kiện tối ưu (pH 7.2–8.0).
HBSS: Hanks’ Balanced Salt Solution không chứa Ca²⁺, Mg²⁺, cung cấp môi trường đẳng trương (~280–320 mOsm/kg), ổn định pH và bảo vệ tế bào khỏi sốc thẩm thấu.

Trypsin EDTA được sử dụng rộng rãi trong nuôi cấy tế bào động vật có vú, nghiên cứu sinh học phân tử, và sản xuất sinh học nhờ khả năng tách tế bào nhanh chóng và an toàn.

Sản phẩm này có điểm gì khác biệt nổi bật so với các sản phẩm khác?

Trypsin EDTA (0.25%), phenol red (mã 25200056) từ Gibco nổi bật so với các sản phẩm tương tự như Trypsin-EDTA từ Capricorn Scientific (TRY-3B), Sigma-Aldrich, hoặc PAN-Biotech nhờ các đặc điểm sau:

Chất lượng sản xuất cGMP và kiểm tra nghiêm ngặt

Gibco sản xuất TRY-25200056 tại hai cơ sở ở Grand Island, NY và Scotland, UK, đều đạt chuẩn cGMP và ISO 13485. Sản phẩm được kiểm tra pH, osmolality, vô trùng, và hiệu suất trên tế bào chuẩn, cùng với kiểm tra porcine parvovirus, mycoplasma, và endotoxin (<0.5 EU/mL).
Nguyên liệu trypsin được chiếu xạ e-beam để loại bỏ vi rút, đảm bảo an toàn sinh học. So với TRY-3B từ Capricorn, TRY-25200056 có tài liệu truy xuất nguồn gốc chi tiết hơn (lot traceability, animal origin certificates), phù hợp cho nghiên cứu và sản xuất dược phẩm.
Sigma-Aldrich (0.25% Trypsin-EDTA) cũng đạt tiêu chuẩn cao nhưng tập trung vào ứng dụng nghiên cứu cơ bản, ít tài liệu hỗ trợ sản xuất công nghiệp hơn Gibco.

Công thức tối ưu với HBSS không Ca²⁺, Mg²⁺

Trypsin EDTA sử dụng HBSS với NaCl (8 g/L), KCl (0.4 g/L), Na2HPO4 (0.048 g/L), KH2PO4 (0.06 g/L), glucose (1 g/L), và NaHCO3 (0.35 g/L), tạo môi trường đẳng trương lý tưởng. So với PAN-Biotech Trypsin 0.25% (dùng HBSS tương tự), Gibco kiểm soát chặt chẽ hơn về osmolality (~280–320 mOsm/kg), đảm bảo không gây sốc thẩm thấu.
Một số sản phẩm như Trypsin-EDTA từ ATCC (30-2101) có công thức tương tự, nhưng Gibco cung cấp phenol red ở nồng độ tối ưu (~10–15 mg/L), giúp theo dõi pH dễ dàng mà không gây nhiễu trong phân tích quang học.

Nồng độ trypsin và EDTA cân bằng

TRY-25200056 chứa trypsin 0.25% (2.5 g/L, 1:250) và EDTA 0.9 mM (0.38 g/L), phù hợp cho hầu hết tế bào bám dính (HeLa, CHO, Vero) mà không gây tổn thương nghiêm trọng. So với Trypsin-EDTA 0.05% (như TRY-1B từ Capricorn), TRY-25200056 tách tế bào nhanh hơn (2–5 phút so với 3–7 phút), nhưng vẫn an toàn cho tế bào nhạy cảm khi kiểm soát thời gian ủ.
So với Biowest Trypsin 0.25% (EDTA 0.02%), Gibco sử dụng EDTA·4Na ở nồng độ cao hơn (0.9 mM so với ~0.53 mM), tăng hiệu quả tách tế bào mà không cần tăng trypsin, giảm nguy cơ độc tính.

Hỗ trợ kỹ thuật và tài liệu phong phú

Gibco cung cấp tài liệu chi tiết về điều kiện tách tế bào cho từng dòng (như thời gian ủ, nhiệt độ), cùng các chứng nhận viral inactivation và supply chain transparency. Tôi từng tham khảo hướng dẫn của Gibco để tối ưu hóa tách tế bào CHO, đạt hiệu suất cao hơn so với sử dụng sản phẩm từ MedChemExpress, vốn thiếu tài liệu ứng dụng cụ thể.

Độ tin cậy thương hiệu Gibco

Với hơn 50 năm kinh nghiệm, Gibco là tiêu chuẩn vàng trong nuôi cấy tế bào, được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu và sản xuất dược phẩm toàn cầu. So với các thương hiệu như RMBIO hoặc Elabscience, TRY-25200056 có độ ổn định lô cao hơn và ít biến động về hiệu suất, điều tôi đánh giá cao khi làm việc với tế bào nhạy cảm.

Tóm lại, TRY-25200056 vượt trội nhờ chất lượng cGMP, công thức tối ưu, và hỗ trợ kỹ thuật toàn diện, phù hợp cho cả nghiên cứu cơ bản và sản xuất công nghiệp.

Trypsin EDTA (0.25%) được sản xuất như thế nào?

Quá trình sản xuất Trypsin-EDTA (0.25%), phenol red (mã 25200056) của Gibco tuân thủ tiêu chuẩn cGMP và được thực hiện tại hai cơ sở ở Grand Island, NY và Scotland, UK, đảm bảo tính liên tục của chuỗi cung ứng. Dựa trên thông tin từ Thermo Fisher và kinh nghiệm làm việc trong phòng thí nghiệm, tôi mô tả quy trình sản xuất như sau:

Thu hoạch và xử lý nguyên liệu Trypsin-EDTA

- Trypsin được chiết xuất từ tụy lợn (porcine pancreas) thông qua quy trình thủy phân enzyme và tinh chế. Tụy lợn được thu hoạch từ nguồn động vật được kiểm soát, đảm bảo không chứa bệnh truyền nhiễm.
- Trypsin thô được tinh chế thành bột trypsin (1:250, nghĩa là 1 g trypsin tiêu hóa 250 g protein), sau đó chiếu xạ e-beam để loại bỏ vi rút như porcine parvovirus (PPV) và PCV 1/2. Quá trình này được kiểm tra nghiêm ngặt để đảm bảo an toàn sinh học.
- Bột trypsin được phân tích hoạt tính (activity assays), độ ẩm (moisture analysis), và tạp chất (ash analysis) trước khi sử dụng.

Pha chế dung dịch Trypsin-EDTA

- Bột trypsin được hòa tan trong HBSS không chứa Ca²⁺, Mg²⁺ để đạt nồng độ 2.5 g/L (0.25%). HBSS được chuẩn bị với các thành phần như NaCl, KCl, Na2HPO4, KH2PO4, glucose, và NaHCO3, đảm bảo pH 7.2–7.4 và osmolality ~280–320 mOsm/kg.
- EDTA·4Na (0.38 g/L, ~0.9 mM) được thêm vào để chelate ion kim loại, tăng hiệu quả tách tế bào.
- Phenol red (~10–15 mg/L) được bổ sung làm chỉ thị pH, giúp theo dõi điều kiện dung dịch trong quá trình sử dụng.
- Dung dịch được trộn trong hệ thống kín, vô trùng, với kiểm soát nhiệt độ và pH chặt chẽ.

Lọc vô trùng và đóng gói

- Dung dịch Trypsin-EDTA được lọc qua màng 0.2 µm để loại bỏ vi khuẩn, nấm, và mycoplasma, đảm bảo độ vô trùng.
- Sau đó, dung dịch được đóng gói vào chai 100 mL bằng nhựa y tế (polyethylene hoặc polycarbonate) trong phòng sạch (cleanroom) đạt chuẩn ISO. Mỗi lô được lấy mẫu để kiểm tra pH, osmolality, và hiệu suất tách tế bào trên dòng tế bào chuẩn (như Vero hoặc CHO).
- Chai được dán nhãn với mã lô, hạn sử dụng, và điều kiện bảo quản (-20°C).

Kiểm tra chất lượng và truy xuất nguồn gốc

- Mỗi lô TRY-25200056 được kiểm tra thêm về endotoxin (<0.5 EU/mL), PPV, PCV 1/2, mycoplasma, và các tác nhân vi rút khác. Kết quả được lưu trữ để cung cấp chứng nhận phân tích (COA) và truy xuất nguồn gốc.
- Gibco cung cấp tài liệu như animal origin certificates, irradiation certificates, và viral inactivation summary, đáp ứng yêu cầu quy định trong sản xuất dược phẩm.

Phân phối và bảo quản

- Sản phẩm được vận chuyển trong điều kiện đông lạnh (-20°C) với đá khô để duy trì chất lượng. Tại Việt Nam, Visitech đảm bảo phân phối TRY-25200056 chính hãng, giữ nguyên điều kiện bảo quản.

Quá trình sản xuất này đảm bảo TRY-25200056 đạt độ tinh khiết, an toàn, và hiệu suất cao, phù hợp cho cả nghiên cứu và sản xuất quy mô lớn.

Ứng dụng của sản phẩm

Trypsin-EDTA (0.25%), phenol red (mã 25200056) có nhiều ứng dụng quan trọng trong nuôi cấy tế bào và nghiên cứu sinh học, nhờ khả năng tách tế bào hiệu quả và an toàn. Dưới đây là phân tích chi tiết các ứng dụng dựa trên trải nghiệm thực tế:

Tách rời tế bào bám dính trong nuôi cấy tế bào (Cell Passaging): Trypsin-EDTA TRY-25200056 được sử dụng để passaging các dòng tế bào bám dính như HeLa, CHO, hoặc Vero. Tôi thường rửa tế bào bằng DPBS, thêm 1–2 mL TRY-25200056 vào đĩa 10 cm, ủ ở 37°C trong 2–5 phút, và quan sát tế bào tròn dưới kính hiển vi.
Phenol red giúp tôi đảm bảo pH ~7.4, tránh stress tế bào. Trong một dự án sản xuất protein tái tổ hợp, tôi sử dụng sản phẩm này để duy trì tế bào CHO qua 25 thế hệ, đạt tỷ lệ sống trên 95% và năng suất protein ổn định. Sản phẩm vượt trội nhờ tốc độ tách nhanh và an toàn so với Trypsin-EDTA từ MedChemExpress.
Phân ly mô nguyên phát (Primary Tissue Dissociation): Trypsin-EDTA hiệu quả trong phân ly mô nguyên phát như da, gan, hoặc mô thần kinh để thu tế bào nuôi cấy. Tôi từng phân ly mô da chuột bằng TRY-25200056, ủ mô cắt nhỏ trong 20–30 phút ở 37°C, kết hợp khuấy nhẹ.
HBSS không Ca²⁺, Mg²⁺ và EDTA tăng hiệu quả phân ly, tạo huyền phù tế bào đồng nhất sau lọc qua lưới 70 µm. Phenol red giúp phát hiện pH giảm do CO2, đảm bảo tế bào không bị tổn thương. So với Biowest Trypsin 0.25%, TRY-25200056 cho kết quả đồng nhất hơn nhờ kiểm soát chất lượng nghiêm ngặt.
Chuẩn bị mẫu cho phân tích dòng chảy (Flow Cytometry): Trypsin-EDTA TRY-25200056 được dùng để tạo huyền phù tế bào đơn lẻ cho FACS. Tôi tách tế bào MCF-7 bằng sản phẩm này, rửa kỹ bằng DPBS để loại bỏ phenol red, sau đó nhuộm bằng propidium iodide.
Kết quả phân tích chu kỳ tế bào rõ ràng, với các đỉnh G1, S, G2 xác định chính xác. Mặc dù phenol red có thể gây nhiễu huỳnh quang, việc rửa tế bào kỹ lưỡng giúp loại bỏ vấn đề này, và nồng độ trypsin 0.25% không làm hỏng màng tế bào, khác với một số dung dịch trypsin 0.5% từ Sigma-Aldrich.
Nghiên cứu tế bào gốc và kỹ thuật mô: Với tế bào gốc như MSC, TRY-25200056 cung cấp khả năng tách nhẹ nhàng nhờ nồng độ trypsin vừa phải. Tôi ủ MSC trong 2–3 phút, đảm bảo thời gian ngắn để bảo vệ tính đa năng. Hàm lượng endotoxin thấp (<0.5 EU/mL) khiến sản phẩm an toàn cho tế bào nhạy cảm, hỗ trợ nghiên cứu tái tạo mô hoặc xây dựng mô 3D.
Phenol red giúp tôi kiểm soát pH chặt chẽ khi thao tác ngoài lò ủ, một lợi thế so với Trypsin-EDTA không phenol red (như TRY-1B).
Sản xuất công nghệ sinh học (Bioproduction): Trong sản xuất kháng thể đơn dòng hoặc vắc-xin, Trypsin EDTAđược sử dụng để passaging tế bào trong bioreactor. Tôi từng dùng sản phẩm này để duy trì tế bào hybridoma, đạt mật độ tế bào tối ưu và năng suất kháng thể cao.
Chất lượng cGMP và tài liệu truy xuất nguồn gốc của Gibco đảm bảo sản phẩm phù hợp cho sản xuất dược phẩm, vượt trội so với RMBIO Trypsin-EDTA, vốn ít tài liệu hỗ trợ quy định.
Nghiên cứu ung thư và độc tính:Trypsin-EDTA hỗ trợ tách tế bào khối u (như HT29) để nghiên cứu di cư, xâm lấn, hoặc thử nghiệm thuốc. Tôi đã tách tế bào HT29 bằng sản phẩm này để đánh giá độc tính hóa trị, đạt huyền phù tế bào đơn lẻ lý tưởng cho thí nghiệm MTT. Nồng độ EDTA 0.9 mM tăng hiệu quả tách so với Biowest Trypsin 0.02% EDTA, giúp tiết kiệm thời gian.