YHV là bệnh gì?
Bệnh đầu vàng trên tôm YHV (Yellow head virus) xuất hiện trên tôm sú, tôm thẻ chân trắng, tôm rảo và nhiều loại tôm biển khác
Đây là một loại bệnh nguy hiểm do virus hình que có kích thước nhỏ gây ra, nhân của virus có đường kính gần bằng 15mm, chiều dài có thể tới 800mm. Cấu trúc acid nhân là ARN có đặc điểm gần giống họ Rhabdoviridae hoặc nhóm virus dạng sợi của họ Paramyxoviridae.
Virus đầu vàng (YHV) lây nhiễm trên tôm sú (Penaeus monodon) – một trong những loài nuôi trồng thủy sản lớn trên thế giới. Đây là một mầm bệnh có độc lực cao có thể gây chết 100% trong vòng vài ngày kể từ khi có dấu hiệu bệnh đầu tiên trong ao. YHV là một vi rút RNA sợi đơn (+) hình que, được bao bọc (+) với một nucleocaspsid hình xoắn.
Vi rút gây bệnh đầu vàng trên tôm YHV gây ảnh hưởng nghiêm trọng đến năng suât nuôi trồng tôm, có thể gây chết 100% chỉ sau 5-10 ngày nhiễm bệnh. Bên cạnh đó chưa có thuốc đặc trị cho loại bệnh này vì vậy việc kiểm soát và phát hiện sớm tôm bệnh sẽ giúp cho người nuôi trồng, doanh nghiệp giảm thiểu tổn thất.
IMNV là bệnh gì?
Bệnh gây ra do vi rút IMNV (Infectious myonecrosis virus) thuộc họ Totiviridae, đây là một loại vi rút mang vật liệu di truyền là ARN ở tôm.
IMNV gây ra tỷ lệ tử vong đáng kể trong quần thể tôm thẻ chân trắng từ 40– 70% tôm nhiễm bệnh. Mô đích của nhiễm trùng IMNV là cơ vân (cơ xương, và ít gặp hơn ở cơ tim). Tôm bị nhiễm IMNV tập trung vào các khu vực hoại tử trắng ở cơ vân, đặc biệt là ở các phần bụng và đuôi, gây hoại tử cơ vận động xuất hiện một vài vùng cơ bị đục, biến màu.
Bệnh do vi rút gây ra sẽ lây theo chiều ngang (tôm khỏe sang tôm bệnh thông qua môi trường hoặc qua đường tiêu hóa của mô bị nhiễm bệnh thông qua việc ăn thịt tôm bị bệnh và chết) hoặc chiều dọc (từ tôm bố mẹ truyền cho tôm giống).
Với mức độ phổ biến cao, phân bố rộng và khả năng gây thiệt hại kinh tế đáng kể trong ngành nuôi tôm, vì vậy việc nghiên cứu và phát hiện kịp thời vi rút IMNV là rất quan trọng. Đặc biệt trong thời điểm chưa có thuốc đặc hiệu điều trị và nuôi cấy dòng vi rút này rất khó khăn thì việc sàng lọc phát hiện sớm bệnh sẽ giảm thiểu được tối đa thiệt hại kinh tế.
TSV- Taura syndrome virus gây bệnh gì?
Gây bệnh là Picornavirus, thuộc họ Picornaviridae cấu trúc aixt nhân là ARN, virus hình cầu có 20 mặt, đường kính 30-32nm. Hệ thống gen (genome) là một mạch RNA, chiều dài 10,2kb, cấu trúc capsid có 3 phần (55, 40 và 24 kD) và một đoạn polypeptide phụ (58kD). Virus ký sinh tế bào biểu mô và dưới biểu mô đuôi.
Triệu chứng của TSV: Hội chứng Taura còn được gọi là bệnh “đuôi đỏ”. Khi tôm bị bệnh này, cơ thể và các bộ phận khác của tôm có màu đỏ hoặc hồng đen. Tôm lười ăn, bơi lờ đờ trên mặt nước, mép ao nuôi. Gan tụy tôm có màu vàng hơn bình thường kèm theo sưng mang. Tôm thường chết trong thời kỳ lột xác. Hội chứng Taura xuất hiện khi tôm được khoảng 2 tuần tuổi cho đến khi đạt giai đoạn trưởng thành và lột xác. Bệnh có khả năng cấp tính, làm cho tôm bị bệnh, gây mềm vỏ và phá hủy quá trình tiêu hóa của tôm. Hội chứng này có khả năng lây lan nhanh chóng
Lợi ích của việc chẩn đoán nhanh bệnh YHV/ IMNV/ TSV
- Kiểm soát tôm giống, phát hiện sớm bệnh YHV/ IMNV/ TSV trên tôm giống để đưa ra pháp đồ điều trị.
- Sàng lọc thức ăn cho tôm bố mẹ
- Kiểm soát bệnh của ao nuôi, nguồn nước cần được kiểm tra, lấy mẫu nhằm chẩn đoán bệnh YHV/ IMNV/ TSV trên tôm định kỳ, thường xuyên.
- Kiểm tra tôm thành phẩm định kỳ theo từng giai đoạn trong khu vực nuôi trồng.
- Hiện nay có rất nhiều phương pháp kiểm tra sự có mặt của virus gây bệnh YHV/ IMNV/ TSV như: các phương pháp phân lập và thử nghiệm sinh hóa truyền thống, các loại kit test nhanh [link],… Các phương pháp này không cần đầu tư các trang thiết bị cao cấp tuy nhiên kết quả cho độ nhạy và độ đặc hiệu không cao chỉ phù hợp cho các hộ nuôi trồng nhỏ lẻ.
- Đối với một số nhà máy, trung tâm kiểm nghiệm, kết quả kiểm nghiệm yêu cầu có độ tin cậy cao, để tránh hạn chế gây thiệt hại lớn nhất. Phương pháp tối ưu nhất là kiểm tra sự có mặt của YHV/ IMNV/ TSV bằng phương pháp phân tử (PCR -Realtime PCR) mà Visitech sẽ giới thiệu ở bên dưới. Phương pháp này phát hiện YHV/ IMNV/ TSV trong cùng một ống phản ứng.
YHV/ IMNV/ TSV Onestep RT-PCR Visikit
Để có thể giải quyết các vấn đề về độ đặc hiệu chúng ta có thể sử dụng phương pháp PCR để kiểm tra sự hiện diện của virus gây bệnh YHV/ IMNV/ TSV trên mẫu tôm. YHV/ IMNV/ TSV Onestep RT-PCR Visikit được sử dụng phổ biến trong phương pháp này mang lại giá trị thử nghiệm đạt độ nhạy và độ đặc hiệu cao trong phát hiện virus gây YHV/ IMNV/ TSV. Bên cạnh các ưu điểm của phương pháp PCR sử dụng bộ kit YHV/ IMNV/ TSV Onestep RT-PCR Visikit cũng đòi hỏi các phòng thử nghiệm phải trang bị các phòng thử nghiệm đạt độ an toàn và các thiết bị như máy PCR, máy ly tâm, tủ âm sâu,… và đội ngũ kỹ thuật viên được đào tạo chuyên nghiệp.
Visitech sẽ giúp bạn giải quyết tất cả các vấn đề trên để mang lại hiệu quả công việc và lợi nhuận tốt nhất. Chúng tôi sẽ lựa chọn cho bạn những thiết bị tốt nhất phù hợp với yêu cầu của bạn.
Phương pháp này có thể sử dụng cho các phòng thí nghiệm nhỏ, các công ty, doanh nghiệp yêu cầu kiểm nghiệm, kiểm soát sự hiện diện của virus gây bệnh YHV/ IMNV/ TSV Onestep RT- PCR Visikit trong nuôi trồng tôm.
Điều kiện lưu trữ
-200C
Tên sản phẩm
YHV/ IMNV/ TSV Onestep RT- PCR Visikit
Mã sản phẩm
FAPA-16
Nhà sản xuất
Visitech – Việt Nam
Hạn sử dụng
12 tháng kể từ ngày sản xuất
Thành phần bộ kit
| Thành phần | Quy cách |
| 50 test | |
| YTI RT- PCR mix | 64×20µL |
| Chứng dương YTI | 1×100 µL |
| Chứng âm | 1x1mL |
Hướng dẫn sử dụng
Quy trình tách chiết DNA/RNA Hướng dẫn sử dụng
Quy trình tách thủ công: sẽ được áp dụng cho các phòng kiểm nghiệm nhỏ và số lượng mẫu tương đối ít. Các bạn có thể sử dụng các phương pháp thu hồi DNA bằng các hóa chất như Phenol, Chloroform, Isopropanol,…hoặc sử dụng bộ tách chiết thô (Crude DNA Extraction ViSiKit) (**) hoặc bộ tách chiết bằng phương pháp cột Silica (Highpure Viral Extraction ViSiKit) (**)
Quy trình tách chiết tự động: Được áp dụng phù hợp cho các phòng kiểm nghiệm độc lập, công ty thực phẩm, doanh nghiệp sản xuất có số lượng mẫu lớn, đòi hỏi thời gian kiểm nghiệm nhanh. Visitech hiện đang cung cấp các loại hóa chất tự động trên đa dạng nhiều loại máy khác nhau như máy tách chiết DNA/ RNA tự động Gene Pure Plus (NPA-32) (**)của hãng Bioer, máy tách chiết tự động của hãng Thermo Kingfisher, máy tách chiết tự động của hãng TANbead… Đối với mỗi dòng máy tách chiết tự động sẽ có những đặc điểm khác nhau như số lượng mẫu tách cho mỗi lượt, thời gian thực hiện, các vật tư tiêu hao dành riêng cho từng máy,.. Từ đó chúng tôi sẽ chọn Kit phù hợp cho nhu cầu của từng đơn vị. Ví dụ đối với máy NPA-32 của hãng Bioer chúng tôi có Kit tách chiết: Maga Genomic DNA/RNA Extraction VISIKIT (MGEKA-32.R.B) (**)
Để biết thêm chi tiết cho các thiết bị liên quan đến tách chiết DNA/RNA tự động các bạn có thể liên hệ Visitech qua số hotline hoặc email (**)
Thực hiện phản ứng PCR
- Lấy số lượng cần thiết ống YTI RT-PCR mix. Rã đông ống ở nhiệt độ phòng (15–25°C), sau đó spindown để toàn bộ chất lỏng di chuyển xuống đáy.
- Hút 5 µL RNA mẫu, chứng âm tách chiết, chứng dương cho vào các tube YTI RT-PCR mix đã chuẩn bị ở trên.
- Chú ý:
- Mỗi lần chạy nên có ít nhất 1 chứng âm tách chiết, 1 chứng dương và 1 chứng âm PCR.
- Chuẩn bị phản ứng theo thứ tự sau: Chứng âm, chứng âm tách chiết, mẫu và chứng dương.
- Đóng nắp PCR và spindown để chất lỏng di chuyển xuống đáy trước khi đặt vào máy.
Cài đặt chương trình nhiệt cho PCR:
| 1 chu kỳ | 45oC | 15 phút |
| 1 chu kỳ | 95oC | 3 phút |
| 45 chu kỳ | 95oC | 10 giây |
| 60oC | 10 giây | |
| 72oC | 20 giây | |
| 1 chu kỳ | 72oC | 3 phút |
Điện di
Bộ kit điện di Agarose Electrophoresis (AE-01) được khuyến cáo sử dụng cho điện di sản phẩm PCR. Quy trình thực hiện xem hướng dẫn của bộ Agarose Electrophoresis (AE-01). (**)
Phân tích kết quả
Sau khi điện di hoàn tất, kết quả điện di được đọc trên bàn đèn UV hoặc máy đọc gel sử dụng đèn UV
Thang DNA 100bp sử dụng gồm 10 vạch từ 100 đến 1000 bp
Kết quả dự kiến như sau:
+ Mẫu dương tính với YHV: xuất hiện băng kích thước 495bp (khoảng vạch 500bp), nằm trên cùng
+ Mẫu dương tính với IMNV: xuất hiện băng với kích thước 328bp (giữa vạch 300 và 400)
+ Mẫu dương tính với TSV: xuất hiện băng với kích thước 217bp (khoảng vạch 200bp)
+ Chứng nội: xuất hiện băng với kích thước 102bp
Chú ý: Vạch mờ phía dưới vạch 100bp là vạch mồi còn thừa lại sau phản ứng Trong chứng dương bao gồm sẵn DNA tôm, YHV, IMNV và TSV
| STT | YHV (495 bp) | IMNV (328 bp) | TSV (217 bp) | IC (102 bp) | Kết luận |
| 1 | + | + | + | -/+ | Mẫu dương tính với cả TSV/IMNV/YHV |
| 2 | + | – | – | + | Mẫu dương tính YHV |
| 3 | – | + | – | + | Mẫu dương tính IMNV |
| 4 | – | – | + | + | Mẫu dương tính TSV |
| 5 | – | – | – | + | Mẫu âm tính |
| 6 | – | – | – | – | Không thể kết luận |
Đối với bất kì sự cố nào khi sử dụng sản phẩm của VISITECH chúng tôi sẽ hỗ trợ bạn giải quyết một cách chuyên nghiệp nhất. Dưới đây là một số lỗi thường gặp và cách khắc phục:Xử lý sự cố
| Sự cố | Nguyên nhân | Khắc phục |
| Không xuất hiện vạch nào ở tất cả các giếng, kể cả chứng dương | . Cài đặt sai chương trình PCR
|
1. Kiểm tra lại chương trình chạy PCR
2. Kiểm tra lại hoạt động của thiết bị PCR 3. Kiểm tra lại điều kiện bảo quản và hạn sử dụng của kit |
| Chứng dương bình thường mẫu xét nghiệm không cho vạch DNA, kể cả vạch của đối chứng nội |
|
|
| Xuất hiện vạch DNA trong chứng âm, chứng âm tách chiết | 1. Micro pipet bị nhiễm DNA mục tiêu hoặc sản phẩm PCR
2. Hóa chất PCR bị nhiễm DNA mục tiêu hoặc sản phẩm PCR 3. Môi trường làm việc bị nhiễm DNA mục tiêu hoặc sản phẩm PCR |
|
Visitech – Nhà sản xuất Kit PCR chất lượng cao
Ngoài việc phát hiện cùng lúc bệnh YHV/ IMNV/ TSV trên tôm , Visitech chúng tôi còn cung cấp thêm các kit PCR phát hiện các loài vi sinh gây bệnh thủy sản khác theo link danh mục sau:
https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/kit-test/kit-pcr/
Khi truy cập vào link này, chúng ta sẽ thấy thêm nhiều loại Kit dùng để phát hiện bệnh trên thủy sản như: Kit PCR MBV để phát hiện Monodon Baculovirus ở trên tôm. Khi bị bệnh này Tôm sẽ có biểu hiện lơ mơ, biếng ăn, có màu sẫm và có nhiều vết như bị bám bẩn trên bề mặt vỏ tôm; Kit PCR WSSV để phát hiện bệnh đốm trắng trên tôm. Khi bị nhiễm virus này gây gây ra các đốm trắng nhỏ xuất hiện trên bề mặt bên trong của lớp biểu bì, vỏ và phần phụ (**); Kit PCR YHV (Yellow head virus) để phát hiện YHV gây bệnh đầu vàng trên tôm và còn rất nhiều Kit phát hiện bệnh trên thủy sản khác. Các bạn có thể truy cập link bên dưới:
https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/kit-test/kit-pcr/?filter=dau-nhua-a
Bên cạnh đó, Visitech chúng tôi cũng đã có danh mục sản phẩm Kit Realtime PCR phát hiện bệnh trên thủy sản gây bệnh tương tự Kit PCR. Tuy nhiên, Realtime PCR là kỹ thuật được cải tiến từ PCR. Nó khắc phục được những khuyết điểm mà PCR chưa làm được. Thông tin chi tiết xin truy cập Link:
https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/kit-test/kit-real-time-pcr/
Đặc biệt, ngoài việc cung cấp hóa chất cho phát hiện bệnh, Visitech cũng đem đến cho Qúy khách hàng một giải pháp tổng thể và đầy đủ về các trang thiết bị, vật tư tiêu hao cho một phòng thử nghiệm PCR, realtime PCR đạt chuẩn. Mời Qúy khách hàng tham khảo Link bên dưới: https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/sinh-hoc-phan-tu/
Tại sao nên chọn Visikit
Visitech tự hào là đơn vị tư nhân với nhiều năm kinh nghiệm trong nhiều lĩnh vực khác nhau, trong đó lĩnh vực sinh học phân tử là một trong những thế mạnh của chúng tôi.
Chúng tôi cam kết đưa đến tay khách hàng sản phẩm đạt chất lượng theo tiêu chuẩn ISO 13485 năm 2016, là tiêu chuẩn ISO về hệ thống quản lý an toàn cho sản phẩm.
Bên cạnh đó, Visitech có đội ngũ R & D có chuyên môn cao và giàu kinh nghiệm, luôn nghiên cứu, trau dồi để chọn lọc và đưa ra sản phẩm tốt nhất đến tay người sử dụng.
Đặc biệt, công ty chúng tôi có hàng DEMO để chạy thử nghiệm nhằm chứng minh chất lượng đối với những khách hàng có nhu cầu. Kỹ sư chúng tôi sẽ trực tiếp hướng dẫn và training cho tới khi thành thạo.
Thông tin liên hệ Visitech
Trên đây là những thông tin chi tiết về Kit PCR phát hiện YHV/ IMNV/ TSV của Visitech mà chúng tôi biên soạn. Hy vọng những chia sẻ trên sẽ mang đến cho Quý Khách hàng những thông tin bổ ích.
Visitech chúng tôi tự tin và tự hào với đội ngũ nhân viên có nhiều năm kinh nghiệm về lĩnh vực sinh học phân tử, đặc biệt là các xét nghiệm liên quan đến phát hiện virus, vi khuẩn trong thực phẩm, thủy sản, thú y…Chúng tôi luôn trên tinh thần sẵn sàng được tư vấn chi tiết, giải đáp thắc mắc và hỗ trợ mọi ý kiến của Qúy khách hàng. Hãy liên hệ ngay với chúng tôi theo địa chỉ bên dưới:
- Email: info@visitech.vn
- Hotline: 0919112141
- Zalo: 0919112141
- Website: https://visitech.vn/
- Map: Công ty TNHH Khoa Học Kỹ Thuật Việt Sinh
- Kênh Youtube: Visitech
- Fanpage: Visitech
- Địa chỉ: 730/1/2/7C Hương Lộ 2, Phường Bình Trị Đông A, Quận Bình Tân, Tp.HCM
Đánh giá
Chưa có đánh giá nào.