BABESIA GÂY BỆNH GÌ?
Babesiosis là bệnh do ký sinh trùng đơn bào thuộc chi Babesia gây ra. Babesia spp. là ký sinh trùng đường máu đơn bào sống nội sinh trong hồng cầu với đặc trưng của bệnh là thiếu máu tán huyết (là loại thiếu máu do hồng cầu bị phá vỡ, và đời sống hồng cầu bị rút ngắn dưới 120 ngày), sốt và lách to.
Babesia gây bệnh lê dạng trùng trên chó. Chúng phá hủy hồng cầu gây chứng thiếu máu, niêm mạc nhợt nhạt, vàng da. Hoặc ký sinh trong các hạch lympho làm hạch sưng to. Có 3 loại kí sinh trùng gây bệnh lê dạng trùng Babesia ở chó:
- Babesia: cơ thể khá lớn, thường dài 4 – 5 micromet. Dài nhất có thể đến 7 micromet. Hình dáng điển hình là hình hai hạt lê, đầu của hai ký sinh trùng sẽ nối liền với nhau, trong mỗi tế bào đỏ có thể là 1- 16 cơ thể sống.
- Babesia Gibsoni: cơ thể rất nhỏ, nhiều hình vòng nhẫn. Trứng có hình tròn, hình hạt lê rất ít. Trong hai tế bào đỏ nhiều nhất có khi lên đến 30 cơ thể sống.
- Babesia Vogeli: có hình dáng giống Babesia nhưng lớn hơn một chút.
Triệu chứng của chó bị nhiễm bệnh Babesia
Khi chó bị bệnh, thường có biểu hiện bị thiếu máu, niêm mạc mắt, mũi miệng nhợt nhạt. Một số còn bị viêm kết mạc và giác mạc mắt. Chảy nhiều nước mắt, nước mũi, mắt có nhiều ghèn. Nước tiểu có màu hồng rồi chuyển dần sang màu nâu đỏ do có chứa nhiều huyết sắc tố.
Chó bị sốt cao kéo dài không theo quy luật. Kèm theo triệu chứng mất cân bằng, quay cuồng, run rẩy từng cơn, sùi bọt mép. Chó bị vàng da, khó thở, bỏ ăn. Một vài trường hợp còn bị sưng lá lách, phản ứng nhạy cảm. Nặng hơn mắt sẽ đỏ ngầu, hay húc đầu vào tường, phá chuồng, lồng lộn.
Phương pháp phát hiện Babesia
Hiện nay có rất nhiều phương pháp thử nghiệm sự hiện diện của vi rút gây bệnh trên thú y như: các phương pháp phân lập và thử nghiệm sinh hóa truyền thống, quan sát máu dưới kính hiển vi, kit test nhanh [*],… Tuy nhiên hầu hết các phương pháp này đều mang lại kết quả có độ chính xác tương đối và thời gian thử nghiệm lâu, không phù hợp với các đơn vị sản xuất cần kết quả thử nghiệm có độ tin cậy, chính xác cao.
Vì vậy, việc sử dụng phương pháp real-time PCR để kiểm tra sự hiện diện của tổ hợp nhiều loại vi rút gây bệnh trên thú y chỉ thông qua một thí nghiệm sẽ giúp cải thiện được thời gian, độ nhạy và độ đặc hiệu cao.
Babesia qPCR Visikit
Sản phẩm Babesia realtime PCR Visikit được sử dụng phổ biến trong phương pháp này mang lại giá trị thử nghiệm đạt độ nhạy và độ đặc hiệu cao trong phát hiện vi rút gây bệnh. Đối với phương pháp real-time PCR sử dụng bộ kit Babesia realtime PCR Visikit yêu cầu phải trang bị một số thiết bị phục vụ cho việc phát hiện mầm bệnh như máy real- time PCR, máy ly tâm, tủ bảo quản và một số vật tư tiêu hao thông thường,…cùng đội ngũ kỹ thuật viên được đào tạo về chuyên môn cũng như kỹ năng.
Visitech sẽ giúp bạn giải quyết tất cả các vấn đề trên để mang lại hiệu quả công việc và lợi nhuận tốt nhất. Chúng tôi sẽ lựa chọn cho bạn một giải pháp tốt nhất phù hợp với yêu cầu của bạn.
Điều kiện lưu trữ
-200C
Tên sản phẩm
Babesia realtime PCR Visikit
Mã sản phẩm
ANIFR- 03
Nhà sản xuất
Visitech- Việt Nam
Hạn sử dụng
12 tháng kể từ ngày sản xuất
Thành phần bộ kit
Thành phần | Quy cách |
50 test | |
Babesia qPCR mix | 64×20µL |
Chứng dương Babesia | 1×100 µL |
Chứng âm | 1x1mL |
Hướng dẫn sử dụng
Chuẩn bị mẫu
Mẫu máu toàn phần: máu được thu trong ống chuyên dụng chứa chất chống đông máu (không sử dụng ống chứa heparin vì sẽ gây ức chế phản ứng).
Huyết thanh: Lấy 3 mL máu cho vào tube (không chứa chất chống đông EDTA và heparin). Sau đó, tiến hành phân tách huyết thanh bằng cách ly tâm ở 3000 rpm trong 15 phút. Huyết thanh sau đó được chuyển vào tube polypropylene vô trùng.
Quy trình tách chiết DNA
- Các bạn có thể sử dụng các phương pháp thu hồi DNA/RNA bằng các hóa chất như Phenol, Chloroform, Isopropanol,… Tuy nhiên các phương pháp này sẽ không đảm bảo chát lượng vật liệu di truyền trong mẫu bệnh phẩm; việc tồn dư các hóa chất trong mẫu có thể gây ức chế phản ứng PCR.
- Ngoài ra nếu số lượng mẫu nhiều, khuyến cáo sử dụng máy tách chiết tự động[*] đi kèm với hóa chất sử dụng cho máy Genomic DNA Extraction Visikit [*]
- Nếu số lượng mẫu ít khuyến cáo sử dụng bộ tách chiết bằng tay theo phương pháp cột Silica: Bộ kit TopPURE® Blood DNA extraction kit [*] sử dụng cho tách chiết DNA virus từ mẫu máu toàn phần; và bộ kit Serum Viral Extraction Visikit [*] sử dụng cho tách chiết DNA virus từ mẫu huyết thanh.
Thực hiện phản ứng PCR
- Lấy số lượng cần thiết ống Babesia qPCR mix. Rã đông ống ở nhiệt độ phòng (15– 25°C), sau đó spindown để toàn bộ chất lỏng di chuyển xuống đáy.
- Hút 5 μL DNA mẫu, chứng âm tách chiết, chứng dương cho vào các tube Babesia qPCR mix đã chuẩn bị ở trên.
- Chú ý:
– Mỗi lần chạy nên có ít nhất 1 chứng âm tách chiết, 1 chứng dương và 1 chứng âm PCR.
– Chuẩn bị phản ứng theo thứ tự sau: Chứng âm, chứng âm tách chiết, mẫu và chứng dương.
✓ Đóng nắp PCR và spindown để chất lỏng di chuyển xuống đáy trước khi đặt vào máy. Chọn kênh màu FAM cho Babesia và kênh màu HEX cho chứng nội.
✓ Cài đặt chương trình nhiệt như bên dưới:
1 chu kỳ: | 95oC | 3 phút |
45 chu kỳ: | 95oC | 10 giây |
60oC | 30 giây (chọn đọc tín hiệu ở bước này) |
Phân tích kết quả
- Mẫu âm tính với Babesia : chỉ có đường biểu diễn huỳnh quang HEX của chứng nội vượt lên khỏi ngưỡng tín hiệu
- Không xuất hiện tín hiệu nào, kể cả màu HEX: Phản ứng real-time PCR bị ức chế, do đó không thể kết luận được là mẫu âm tính hay dương tính. Tiến hành pha loãng mẫu 10 lần hoặc tách lại DNA.
- Mẫu dương tính với Babesia: đường biểu diễn huỳnh quang FAM, HEX cùng vượt lên khỏi ngưỡng tín hiệu. Trong 1 số trường hợp mẫu dương tính mạnh với trình tự mục tiêu, đường biểu diễn huỳnh quang HEX có thể nằm dưới ngưỡng tín hiệu.
Bảng tóm tắt phân tích kết quả
STT | Babesia (FAM) | IC (HEX) | Kết luận |
1 | – | + | Mẫu âm tính Babesia |
2 | + | +/- | Dương tính Babesia |
3 | – | – | Không thể kết luận |
Xử lý sự cố
Đối với bất kì sự cố nào khi sử dụng sản phẩm của Visitech chúng tôi sẽ hỗ trợ bạn giải quyết một cách chuyên nghiệp nhất. Dưới đây là một số lỗi thường gặp và cách khắc phục:
Sự cố | Nguyên nhân | Khắc phục |
Không xuất hiện tín hiệu nào ở tất cả các giếng, kể cả chứng dương |
|
|
Chứng dương bình thường mẫu xét nghiệm không cho tín hiệu vượt ngưỡng nào, kể cả màu HEX |
|
|
Tín hiệu FAM, HEX vượt ngưỡng trong chứng âm, chứng âm tách chiết |
|
|
Visitech – Nhà sản xuất Kit PCR chất lượng cao
Ngoài việc phát hiện Babesia trên chó, Visitech chúng tôi còn cung cấp thêm các kit qPCR phát hiện các loài virus, vi khuẩn gây bệnh trên thú y theo link danh mục sau: https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/kit-test/kit-pcr/
Khi truy cập vào link này, chúng ta sẽ thấy thêm rất nhiều loại Kit cũng thường xuyên được sử dụng. Ví dụ như: Kit qPCR CDV [*] để phát hiện bệnh trong nhóm thú y. Hay Kit ASFV gây bệnh trên heo [*] hay Kit qPCR FMDV [*] để phát hiện FMDV gây bệnh cho động vật ở nhóm thú y và còn rất nhiều Kit khác…
Đặc biệt, ngoài việc cung cấp hóa chất cho phát hiện bệnh, Visitech cũng đem đến cho Qúy khách hàng một giải pháp tổng thể và đầy đủ về các trang thiết bị, vật tư tiêu hao cho một phòng thử nghiệm PCR, realtime PCR đạt chuẩn. Mời Qúy khách hàng tham khảo Link bên dưới: https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/sinh-hoc-phan-tu/
Tại sao nên chọn Visikit
Visitech tự hào là đơn vị tư nhân với nhiều năm kinh nghiệm trong nhiều lĩnh vực khác nhau, trong đó lĩnh vực sinh học phân tử là một trong những thế mạnh của chúng tôi.
Chúng tôi cam kết đưa đến tay khách hàng sản phẩm đạt chất lượng theo tiêu chuẩn ISO 13485 năm 2016, là tiêu chuẩn ISO về hệ thống quản lý an toàn cho sản phẩm.
Bên cạnh đó, Visitech có đội ngũ R & D có chuyên môn cao và giàu kinh nghiệm, luôn nghiên cứu, trau dồi để chọn lọc và đưa ra sản phẩm tốt nhất đến tay người sử dụng.
Đặc biệt, công ty chúng tôi có hàng DEMO để chạy thử nghiệm nhằm chứng minh chất lượng đối với những khách hàng có nhu cầu. Kỹ sư chúng tôi sẽ trực tiếp hướng dẫn và training cho tới khi thành thạo.
Thông tin liên hệ Visitech
Trên đây là những thông tin chi tiết về Kit PCR phát hiện Babesia của Visitech mà chúng tôi biên soạn. Hy vọng những chia sẻ trên sẽ mang đến cho Quý Khách hàng những thông tin bổ ích.
Visitech chúng tôi tự tin và tự hào với đội ngũ nhân viên có nhiều năm kinh nghiệm về lĩnh vực sinh học phân tử, đặc biệt là các xét nghiệm liên quan đến phát hiện virus, vi khuẩn trong thực phẩm, thủy sản, thú y…Chúng tôi luôn trên tinh thần sẵn sàng được tư vấn chi tiết, giải đáp thắc mắc và hỗ trợ mọi ý kiến của Qúy khách hàng. Hãy liên hệ ngay với chúng tôi theo địa chỉ bên dưới:
- Email: info@visitech.vn
- Hotline: 0919112141
- Zalo: 0919112141
- Website: https://visitech.vn/
- Map: Công ty TNHH Khoa Học Kỹ Thuật Việt Sinh
- Kênh Youtube: Visitech
- Fanpage: Visitech
- Địa chỉ: 730/1/2/7C Hương Lộ 2, Phường Bình Trị Đông A, Quận Bình Tân, Tp.HCM
Đánh giá
Chưa có đánh giá nào.