Vibrio cholera real time PCR Visikit FFR-05

Đặc điểm của vi khuẩn Vibrio cholera

V.cholerae (Vi khuẩn tả) là vi khuẩn có dạng hình que hơi cong, chúng thuộc nhóm vi khuẩn Gram âm.

V.cholerae là vi khuẩn không có vỏ, không sinh nha bào, có một lông ở đầu và có khả năng di động rất mạnh. 

V.cholerae dễ nuôi cấy trong môi trường nghèo dinh dưỡng, pH từ 8,5-9,0 và  môi trường mặn. V.cholerae có khoảng 140 nhóm huyết thanh đã được xác nhận, nhưng chỉ có nhóm huyết thanh O là gây được bệnh tả.

V.cholerae gây bệnh bằng độc tố ruột. Độc tố ruột gắn vào niêm mạc ruột non, hoạt hoá enzyme adenylcyclase dẫn đến tăng AMP vòng, làm giảm hấp thu Na⁺, tăng tiết Cl^– và nước gây tiêu chảy cấp tính. Phẩy khuẩn tả có thể chuyển hoá trong thiên nhiên, thay đổi tính di truyền do đột biến từ chủng không gây dịch có thể thành chủng gây dịch và kháng nhiều loại kháng sinh.

Phương thức lây truyền bệnh

Bệnh tả lây theo đường tiêu hoá, qua đường nước bị nhiễm bẩn bởi phân người hoặc phân động vật và qua thực phẩm bị nhiễm các tác nhân gây bệnh trong quá trình chế biến hoặc bảo quản, bởi nước bẩn, qua bàn tay bẩn và ruồi…

Phương pháp xét nghiệm Vibrio cholera

Hiện nay có rất nhiều phương pháp thử nghiệm sự hiện diện của vi khuẩn Vibrio cholera như: 

Soi tươi: Tiến hành soi tươi phân và chất nôn, trực tiếp phát hiện phẩy khuẩn tả di động.

Phân lập vi khuẩn: Nuôi cấy phân lập vi khuẩn, theo thường quy của Viện Vệ sinh dịch tễ Trung ương. Những ca nghi ngờ hoặc dương tính cần được gửi lên tuyến xét nghiệm cao hơn để xác định và định týp huyết thanh. Các chủng phân lập cần được làm kháng sinh đồ để phục vụ cho việc điều trị.

Kỹ thuật di truyền phân tử: Sử dụng kỹ thuật realtime PCR để xác định đoạn gen đặc hiệu của Vibrio cholera. Kỹ thuật này có độ nhạy và độ chính xác rất cao. Các bạn có thể tham khảo sản phẩm của Visitech bên dưới.

Vibrio cholera  Real time PCR ViSiKit

Để có thể giải quyết các vấn đề đặc hiệu chúng ta có thể sử dụng phương pháp real-time PCR để kiểm tra sự hiện diện của vi khuẩn Vibrio cholera  trên mẫu thực phẩm, thủy sản.  Sản phẩm Vibrio cholera  Real time PCR ViSiKit được sử dụng phổ biến trong phương pháp này mang lại giá trị thử nghiệm đạt độ nhạy và độ đặc hiệu cao trong phát hiện Vibrio cholera   Bên cạnh các ưu điểm của phương pháp real-time PCR sử dụng bộ kit Vibrio cholera  Real time PCR ViSiKit  cũng đòi hỏi các phòng thử nghiệm phải trang bị các phòng thử nghiệm đạt độ an toàn và các thiết bị như máy real-time PCR, máy ly tâm, tủ âm sâu,… và đội ngũ kỹ thuật viên được đào tạo chuyên nghiệp. Visitech sẽ giúp bạn giải quyết tất cả các vấn đề trên để mang lại hiệu quả công việc và lợi nhuận tốt nhất.

Phương pháp này có thể sử dụng cho các phòng thí nghiệm nhỏ, các công ty, doanh nghiệp yêu cầu kiểm nghiệm, kiểm soát sự hiện diện của vi khuẩn Vibrio cholera  trong sản phẩm. 

Điều kiện lưu trữ

 -20⁰C

Tên sản phẩm

Vibrio cholera  Real time PCR ViSiKit 

Mã sản phẩm

FFR-05

Nhà sản xuất

Visitech – Việt Nam

Hạn sử dụng

12 tháng kể từ ngày sản xuất

Thành phần bộ kit

Hướng dẫn sử dụng

Quy trình tách chiết DNA

Quy trình tách thủ công 

Được áp dụng cho các phòng kiểm nghiệm nhỏ và số lượng mẫu tương đối ít. Các bạn có thể sử dụng các phương pháp thu hồi DNA bằng các hóa chất như Phenol, Chloroform, Isopropanol,…hoặc để tiện lợi hơn Visitech giới thiệu các bạn tham khảo bộ Kit tách chiết bằng phương pháp cột Silica của chúng tôi: Food DNA Extraction ViSiKit (**) hoặc bộ Tissue Viral Extraction kit (**)

Quy trình tách tự động

Được áp dụng phù hợp cho các phòng kiểm nghiệm độc lập, công ty thực phẩm, doanh nghiệp sản xuất có số lượng mẫu lớn, đòi hỏi thời gian kiểm nghiệm nhanh. 

Visitech hiện đang cung cấp các loại hóa chất tự động trên đa dạng nhiều loại máy khác nhau như máy tách chiết DNA/ RNA tự động Gene Pure Plus (NPA-32) (**) của hãng Bioer, máy tách chiết tự động của hãng Thermo Kingfisher, máy tách chiết tự động của hãng TANbead… Đối với mỗi dòng máy tách chiết tự động sẽ có những đặc điểm khác nhau như số lượng mẫu tách cho mỗi lượt, thời gian thực hiện, các vật tư tiêu hao dành riêng cho từng máy,.. Từ đó chúng tôi sẽ chọn Kit phù hợp cho nhu cầu của từng đơn vị. Ví dụ đối với máy NPA-32 của hãng  Bioer chúng tôi có Kit tách chiết: Maga Genomic DNA/RNA Extraction VISIKIT (MGEKA-32.R.B)(**)

Để biết thêm chi tiết cho các thiết bị liên quan đến tách chiết DNA/RNA tự động các bạn có thể liên hệ Visitech qua số hotline hoặc email (**)

Thực hiện phản ứng PCR

Đầu tiên bạn kiểm tra số lượng mẫu, lấy số lượng cần thiết ống FFR-05 rPCR mix sau đó rã đông ống ở nhiệt độ phòng (15–25°C), spindown để toàn bộ chất lỏng di chuyển xuống đáy.

Bạn hãy mở nắp lần lượt và hút 5 µL mẫu cho vào các tube FFR-05 rPCR mix đã chuẩn bị ở trên  theo thứ tự: Chứng âm, chứng âm tách chiết, DNA mẫu và cuối cùng là mẫu  đối chứng dương nhất sau đó đóng nắp tube để hạn chế việc nhiễm chéo tốt nhất.

Mỗi lần chạy nên có ít nhất một chứng âm tách chiết,một  chứng dương và một chứng âm PCR để có thể kiểm soát kết quả test.

Sau khi bạn thực hiện các bước trên bạn hãy kiểm tra lại nắp PCR và spindown để chất lỏng di chuyển xuống đáy trước khi đặt vào máy. Chọn kênh màu FAM cho Vibrio cholera  và kênh màu HEX cho chứng nội.

Cài đặt chương trình nhiệt như bên dưới:

Phân tích kết quả

• Mẫu âm tính với Vibrio cholera : chỉ có đường biểu diễn huỳnh quang HEX của chứng nội vượt lên khỏi ngưỡng tín hiệu
• Không xuất hiện tín hiệu nào, kể cả màu HEX: Phản ứng qPCR bị ức chế, do đó không thể kết luận được là mẫu

âm tính hay dương tính. Tiến hành pha loãng mẫu 10 lần hoặc tách lại DNA.

• Mẫu dương tính với Vibrio cholera: đường biểu diễn huỳnh quang FAM, HEX cùng vượt lên khỏi ngưỡng tín hiệu. Trong 1 số trường hợp mẫu dương tính mạnh với trình tự mục tiêu, đường biểu diễn huỳnh quang HEX có thể nằm dưới ngưỡng tín hiệu.

Bảng tóm tắt phân tích kết quả:

Xử lý sự cố

Tại sao nên chọn Visikit

Visitech tự hào là đơn vị tư nhân với nhiều năm kinh nghiệm trong nhiều lĩnh vực khác nhau, trong đó lĩnh vực sinh học phân tử là một trong những thế mạnh của chúng tôi. 

Chúng tôi cam kết đưa đến tay khách hàng sản phẩm đạt chất lượng theo tiêu chuẩn ISO 13485 năm 2016, là tiêu chuẩn ISO về hệ thống quản lý an toàn cho sản phẩm.

Bên cạnh đó, Visitech có đội ngũ R & D có chuyên môn cao và giàu kinh nghiệm, luôn nghiên cứu, trau dồi để chọn lọc và đưa ra sản phẩm tốt nhất đến tay người sử dụng. 

Đặc biệt, công ty chúng tôi có hàng DEMO để chạy thử nghiệm nhằm chứng minh chất lượng đối với những khách hàng có nhu cầu. Kỹ sư chúng tôi sẽ trực tiếp hướng dẫn và training cho tới khi thành thạo.

Visitech – Nhà sản xuất Kit PCR chất lượng cao

Ngoài việc phát hiện Vibrio cholera trong thực phẩm bằng phương pháp realtime PCR, Visitech chúng tôi còn cung cấp thêm các kit qPCR phát hiện các loài vi sinh gây bệnh thực phẩm khác theo link danh mục sau: https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/kit-test/kit-real-time-pcr/   

Khi truy cập vào link này, chúng ta sẽ thấy thêm một số loại Kit realtime khác dùng để phát hiện một số tác nhân gây bệnh trong thực phẩm. Ví dụ như: Kit qPCR để phát hiện Salmonella spp. (**); Kit qPCR Listeria spp (**), Kit qPCR Vibrio parahaemolyticus (**)

Đặc biệt, ngoài việc cung cấp hóa chất cho phát hiện bệnh, Visitech cũng đem đến cho Qúy khách hàng một giải pháp tổng thể và đầy đủ về các trang thiết bị, vật tư tiêu hao cho một phòng thử nghiệm PCR, realtime PCR đạt chuẩn. Mời Qúy khách hàng tham khảo Link bên dưới: https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/sinh-hoc-phan-tu/ 

Thông tin liên hệ Visitech 

Trên đây là những thông tin chi tiết về Kit qPCR phát hiện Vibrio cholera của Visitech mà chúng tôi biên soạn. Hy vọng những chia sẻ trên sẽ mang đến cho Quý Khách hàng những thông tin bổ ích. 

Visitech chúng tôi tự tin và tự hào với đội ngũ nhân viên có nhiều năm kinh nghiệm về lĩnh vực sinh học phân tử, đặc biệt là các xét nghiệm liên quan đến phát hiện virus, vi khuẩn trong thực phẩm, thủy sản, thú y…Chúng tôi luôn trên tinh thần sẵn sàng được tư vấn chi tiết, giải đáp thắc mắc và hỗ trợ mọi ý kiến của Qúy khách hàng. Hãy liên hệ ngay với chúng tôi theo địa chỉ bên dưới:

• Email: info@visitech.vn
• Hotline: 0919112141
• Zalo: 0919112141
• Website: https://visitech.vn/
• Map: Công ty TNHH Khoa Học Kỹ Thuật Việt Sinh 
• Kênh Youtube: Visitech
• Fanpage: Visitech
• Địa chỉ: 730/1/2/7C Hương Lộ 2, Phường Bình Trị Đông A, Quận Bình Tân, Tp.HCM