Ehrlichia gây bệnh gì?
Ehrlichia canis (E. canis) là một vi khuẩn Gram âm, ký sinh nội bào bắt buộc thuộc họ Rickettsiaceae và sống ở dạng phôi dâu trong các tế bào bạch cầu đơn nhân và đại thực bào của vật chủ. E. canis được xem là tác nhân chính gây ra bệnh Ehrlichiosis hướng bạch cầu đơn nhân trên chó (Canine monocytic ehrlichiosis CME). CME là một bệnh rất nguy hiểm có thể xảy ra trên chó ở mọi lứa tuổi, hiện nay vẫn chưa có vaccine đặc hiệu
Triệu chứng cho bị nhiễm Ehrlichia
Chó bệnh biểu hiện các triệu chứng được báo cáo thường xuyên là sốt cao, gầy yếu, mệt mỏi và xuất huyết. E. canis phát triển ở tế bào nội mạch, ở đó chúng nhân lên và bài tiết ra yếu tố tiền đông máu, qua trung gian của độc tố làm cho những tế bào đó phồng lên rồi hoại tử, làm cho mạch máu bị nghẽn rồi bị vỡ nên những tổn thương ở mạch máu thấy rõ ở da
Phương thức lây truyền
lây truyền theo giai đoạn đó là truyền lây tới các giai đoạn tiếp theo của ve nhưng không truyền qua cho trứng của thế hệ tiếp theo của ve. Khi ấu trùng hoặc nhộng của ve hút những chó bị bệnh Ehrlichia và sẽ truyền cho chó nhạy cảm sau đó ít nhất 155 ngày. Bệnh xảy ra suốt mùa ấm áp, tuy nhiên bệnh này có thể xảy ra quanh năm trong những con vật bị nhiễm trùng mãn tính. Những chó sống hay du lịch trong vùng đang có bệnh là đối tượng dễ bị nhiễm bệnh nhất.
Phương pháp phát hiện Ehrlichia
Hiện nay có rất nhiều phương pháp thử nghiệm sự hiện diện của vi rút gây bệnh trên thú y như: các phương pháp phân lập và thử nghiệm sinh hóa truyền thống, quan sát máu dưới kính hiển vi, kit test nhanh [*],… Tuy nhiên hầu hết các phương pháp này đều mang lại kết quả có độ chính xác tương đối và thời gian thử nghiệm lâu, không phù hợp với các đơn vị sản xuất cần kết quả thử nghiệm có độ tin cậy, chính xác cao.
Vì vậy, việc sử dụng phương pháp real-time PCR để kiểm tra sự hiện diện của tổ hợp nhiều loại vi rút gây bệnh trên thú y chỉ thông qua một thí nghiệm sẽ giúp cải thiện được thời gian, độ nhạy và độ đặc hiệu cao.
Ehrlichia realtime PCR Visikit
Sản phẩm Ehrlichia realtime PCR Visikit được sử dụng phổ biến trong phương pháp này mang lại giá trị thử nghiệm đạt độ nhạy và độ đặc hiệu cao trong phát hiện vi rút gây bệnh. Đối với phương pháp real-time PCR sử dụng bộ kit Ehrlichia realtime PCR Visikit yêu cầu phải trang bị một số thiết bị phục vụ cho việc phát hiện mầm bệnh như máy real- time PCR, máy ly tâm, tủ bảo quản và một số vật tư tiêu hao thông thường,…cùng đội ngũ kỹ thuật viên được đào tạo về chuyên môn cũng như kỹ năng.
Visitech sẽ giúp bạn giải quyết tất cả các vấn đề trên để mang lại hiệu quả công việc và lợi nhuận tốt nhất. Chúng tôi sẽ lựa chọn cho bạn một giải pháp tốt nhất phù hợp với yêu cầu của bạn.
Điều kiện lưu trữ
-200C
Tên sản phẩm
Ehrlichia realtime PCR Visikit
Mã sản phẩm
ANIFR-04
Nhà sản xuất
Visitech- Việt Nam
Hạn sử dụng
12 tháng kể từ ngày sản xuất
Thành phần bộ kit
Thành phần | Quy cách |
50 test | |
Ehrlichia qPCR mix | 64×20µL |
Chứng dương Ehrlichia | 1×100 µL |
Chứng âm | 1x1mL |
Hướng dẫn sử dụng
Chuẩn bị mẫu
✓ Mẫu máu toàn phần: máu được thu trong ống chuyên dụng chứa chất chống đông máu (không sử dụng ống chứa heparin vì sẽ gây ức chế phản ứng).
✓ Huyết thanh: Lấy 3 mL máu cho vào tube (không chứa chất chống đông EDTA và heparin). Sau đó, tiến hành phân tách huyết thanh bằng cách ly tâm ở 3000 rpm trong 15 phút. Huyết thanh sau đó được chuyển vào tube polypropylene vô trùng.
Tách chiết DNA/RNA
Bộ Blood DNA Extraction Visikit được khuyến cáo sử dụng cho tách chiết DNA virus từ mẫu máu toàn phần; và bộ kit Serum Viral Extraction Visikit được khuyến cáo sử dụng cho tách chiết DNA virus từ mẫu huyết thanh. Qui trình thực hiện xem theo HDSD của các bộ kit kể trên.
Thực hiện phản ứng Realtime RT-PCR
Lấy đúng số lượng cần thiết ống Ehrlichia qPCR mix, rã đông ở nhiệt độ phòng, sau đó spindown để toàn bộ chất lỏng di chuyển xuống đáy.
✓ Hút 5 μL DNA mẫu, chứng âm tách chiết, chứng dương cho vào các tube Ehrlichia qPCR mix đã chuẩn bị ở trên.
Chú ý:
– Mỗi lần chạy nên có ít nhất 1 chứng âm tách chiết, 1 chứng dương và 1 chứng âm PCR.
– Chuẩn bị phản ứng theo thứ tự sau: Chứng âm, chứng âm tách chiết, mẫu và chứng dương.
✓ Đóng nắp PCR và spindown để chất lỏng di chuyển xuống đáy trước khi đặt vào máy. Chọn kênh màu FAM cho Ehrlichia và kênh màu HEX cho chứng nội.
1 chu kỳ: | 95oC | 3 phút |
45 chu kỳ: | 95oC | 10 giây |
60oC | 30 giây (chọn đọc tín hiệu ở bước này) |
Phân tích kết quả
- Mẫu âm tính với Ehrlichia: chỉ có đường biểu diễn huỳnh quang HEX của chứng nội vượt lên khỏi ngưỡng tín hiệu
- Không xuất hiện tín hiệu nào, kể cả màu HEX: Phản ứng real-time PCR bị ức chế, do đó không thể kết luận đượclà mẫu âm tính hay dương tính. Tiến hành pha loãng mẫu 10 lần hoặc tách lại DNA.
- Mẫu dương tính với Ehrlichia: đường biểu diễn huỳnh quang FAM, HEX cùng vượt lên khỏi ngưỡng tín hiệu. Trong 1 số trường hợp mẫu dương tính mạnh với trình tự mục tiêu, đường biểu diễn huỳnh quang HEX có thể nằm dưới ngưỡng tín hiệu.
Bảng tóm tắt phân tích kết quả
STT | Ehrlichia (FAM) | IC (HEX) | Kết luận |
1 | – | + | Mẫu âm tính Ehrlichia |
2 | + | +/- | Dương tính Ehrlichia |
3 | – | – | Không thể kết luận |
Xử lý sự cố
Đối với bất kì sự cố nào khi sử dụng sản phẩm của Visitech chúng tôi sẽ hỗ trợ bạn giải quyết một cách chuyên nghiệp nhất. Dưới đây là một số lỗi thường gặp và cách khắc phục
Sự cố | Nguyên nhân | Khắc phục |
Không xuất hiện tín hiệu nào ở tất cả các giếng, kể cả chứng dương |
|
|
Chứng dương bình thường mẫu xét nghiệm không cho tín hiệu vượt ngưỡng nào, kể cả màu HEX |
|
|
Tín hiệu FAM, HEX vượt ngưỡng trong chứng âm, chứng âm tách chiết |
|
|
Visitech – Nhà sản xuất Kit PCR chất lượng cao
Ngoài việc phát hiện Ehrlichia trên gia súc, Visitech chúng tôi còn cung cấp thêm các kit qPCR phát hiện các loài virus, vi khuẩn gây bệnh trên thú y theo link danh mục sau:
https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/kit-test/kit-pcr/
Khi truy cập vào link này, chúng ta sẽ thấy thêm rất nhiều loại Kit cũng thường xuyên được sử dụng. Ví dụ như: Kit qPCR JEV [*] để phát hiện bệnh trong nhóm thú y. Hay Kit ASFV gây bệnh trên heo [*] hay Kit qPCR PED [*] để phát hiện PED gây bệnh trên heo và còn rất nhiều Kit khác…
Đặc biệt, ngoài việc cung cấp hóa chất cho phát hiện bệnh, Visitech cũng đem đến cho Qúy khách hàng một giải pháp tổng thể và đầy đủ về các trang thiết bị, vật tư tiêu hao cho một phòng thử nghiệm PCR, realtime PCR đạt chuẩn. Mời Qúy khách hàng tham khảo Link bên dưới: https://visitech.vn/danh-muc-san-pham/sinh-hoc-phan-tu/
Tại sao nên chọn Visikit
Visitech tự hào là đơn vị tư nhân với nhiều năm kinh nghiệm trong nhiều lĩnh vực khác nhau, trong đó lĩnh vực sinh học phân tử là một trong những thế mạnh của chúng tôi.
Chúng tôi cam kết đưa đến tay khách hàng sản phẩm đạt chất lượng theo tiêu chuẩn ISO 13485 năm 2016, là tiêu chuẩn ISO về hệ thống quản lý an toàn cho sản phẩm.
Bên cạnh đó, Visitech có đội ngũ R & D có chuyên môn cao và giàu kinh nghiệm, luôn nghiên cứu, trau dồi để chọn lọc và đưa ra sản phẩm tốt nhất đến tay người sử dụng.
Đặc biệt, công ty chúng tôi có hàng DEMO để chạy thử nghiệm nhằm chứng minh chất lượng đối với những khách hàng có nhu cầu. Kỹ sư chúng tôi sẽ trực tiếp hướng dẫn và training cho tới khi thành thạo.
Thông tin liên hệ Visitech
Trên đây là những thông tin chi tiết về Kit PCR phát hiện Ehrlichia của Visitech mà chúng tôi biên soạn. Hy vọng những chia sẻ trên sẽ mang đến cho Quý Khách hàng những thông tin bổ ích.
Visitech chúng tôi tự tin và tự hào với đội ngũ nhân viên có nhiều năm kinh nghiệm về lĩnh vực sinh học phân tử, đặc biệt là các xét nghiệm liên quan đến phát hiện virus, vi khuẩn trong thực phẩm, thủy sản, thú y…Chúng tôi luôn trên tinh thần sẵn sàng được tư vấn chi tiết, giải đáp thắc mắc và hỗ trợ mọi ý kiến của Qúy khách hàng. Hãy liên hệ ngay với chúng tôi theo địa chỉ bên dưới:
- Email: info@visitech.vn
- Hotline: 0919112141
- Zalo: 0919112141
- Website: https://visitech.vn/
- Map: Công ty TNHH Khoa Học Kỹ Thuật Việt Sinh
- Kênh Youtube: Visitech
- Fanpage: Visitech
- Địa chỉ: 730/1/2/7C Hương Lộ 2, Phường Bình Trị Đông A, Quận Bình Tân, Tp.HCM
Đánh giá
Chưa có đánh giá nào.